免疫印迹法检测门诊消化不良患者幽门螺杆菌感染及其分型

北京怀柔医院（101400）梁文燕

幽门螺杆菌感染一直被认为是慢性胃炎、消化性溃疡、胃癌的主要致病因素，是世界上感染率最高的细菌[1]。人们对幽门螺杆菌的感染心生恐惧，纷纷要求根除Hp，近年来随着抗菌药物的广泛使用，抗生素的不良反应越发严重，抗Hp治疗的效果也不断降低。门诊经常遇到表现为消化不良的患者，主动或是被动来检查Hp，要求治疗，那么这些Hp阳性患者该不该一概而论的全部治疗呢？现已有研究表明，并非所有Hp感染都会引发疾病，Hp感染时20%～30%没症状，50%以上感染者能引起慢性炎症发生，可能会有有消化不良的表现[2]。本研究旨在探讨经13C呼气试验检测幽门螺杆菌（H.pylori）为阳性消化不良者，针对这部分患者再进行免疫印迹法分型检测，观察分析其结果。

1 资料和方法

1.1 一般资料 入选标准：2015年9月～2016年12月本院收治的312患者例因消化不良表现为上腹部不适或疼痛、胃胀、烧心、嗳气等症状，经行13C呼气试验检测Hp阳性的患者，男性156例，女性146例，年龄14～44岁为青年组，平均（28.6±14.2）岁，74例；45～59岁为中年组，平均（51.3±7.2）岁，123例；60岁以上为老年组，平均（67.4±6.6）岁，105例，所有患者抽静脉血2ml，离心取10μL血清检测。

1.2 仪器及试剂 Hp抗体分型检测（免疫印迹法）（深圳市伯特劳生物制品有限公司提供）。

1.3 研究方法 严格按照说明书操作：将10μL血清与缓冲液同时加至孵育槽中与印迹膜孵育30分钟，再次洗净后加入显色剂反应5～10分钟后，与Hp标准区带比较，检测细胞毒素相关蛋白（CagA、空泡毒素A(VacA)、尿素酶A(UreA)、尿素酶B(UreB)）的结果。

1.4 Hp感染判断标准 采用我国卫生部发布的Hp感染标准对结果进行判断：①HpⅠ型：结果显示CagA和（或）VacA抗体阳性，尿素酶抗体A、B均为阳性；②HpⅡ型：结果仅有尿素酶抗体A、B呈阳性，而CagA和VacA抗体呈现阴性；③Hp阴性：CagA、VacA、UreA、UreB抗体均表现为阴性。

1.5 统计学处理 采用SPSS17.0软件进行统计，采用χ2检验和多组之间两两比较的χ2检验，P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 Hp感染分型与性别关系 312例再行Hp抗体分型检测（免疫印迹法）分型检测302例，Ⅰ型235例，男性为121例，阳性率77.6%，女性114例，阳性率78.%，应用SPSS软件进行卡方分析，卡方值为0.1121，P＞0.05，表明在Hp抗体分型检测（免疫印迹法）分型检测，Ⅰ型、Ⅱ型阳性率在男女间并不存在差异，见附表1。

2.2 312例患者行Hp抗体分型检测（免疫印迹法）分型，检测出阳性结果302例，阳性率96.7%，其中Ⅰ型235例，占总阳性77.8%（235/302)；Ⅱ型67例，占总阳性22.2%（67/302），HP阴性10例，Ⅰ型阳性率高于Ⅱ型，具体见附表2。

2.3 幽门螺杆菌两型分布的特征 按年龄分布分3组。年龄14～44岁为青年组，阳性74例，阳性率53.4%（40/74）；45～59岁为中年组，阳性123例，阳性率80.5%（99/123）；60岁以上为老年组阳性105例，阳性率91.8%（96/105）；应用SPSS软件进行多组间的两两比较，并行χ2检验，经计算青年组和中年组的χ2值为101.66，P<0.0125，青年组和老年组的χ2值为191.05，P<0.0125，中年组和老年组的χ2值为56.65，P<0.0125有统计学意义，老年感染率最高，以Ⅰ型为主，见附表3。

附表1 Hp抗体分型检测及性别关系

附表2 Hp抗体分型检测及临床分型

附表3 Hpylori感染和年龄的关系

3 讨论

我国是幽门螺杆菌高发国家，世界卫生组织（WHO）已将其列为胃癌的头号致癌因子，临床上一般将其分为两类[3]：即Ⅰ型和Ⅱ型。Ⅰ型可产细胞毒素Hp菌株，其中细胞毒（Cag A）蛋白，空泡毒素（Vac A）蛋白毒力较强。这类菌株能使上皮细胞出现空泡、变形和损害，易引起溃疡和诱发癌变。Ⅱ型是不产生细胞毒素的Hp，即CagA 和VacA 阴性菌株，这类菌株毒性较小，感染后一般只是引起慢性浅表性胃炎而无临床症状[4]，因此检测HP分型对指导Hp感染的治疗具有非常重要的意义。本研究显示，Ⅰ型感染在男女间并不存在差异，老年患者感染率最高，13C呼气试验检测阳性患者接受分型检测其阳性率为96.7%，两种检测方式一致性较高，在检测有无Hp感染方面二者均可，Hp分型检测更加对临床工作有指导意义。若为Ⅰ型感染，主张积极给予抗HP治疗，若为Ⅱ型感染，可不予治疗，随访观察。这样就可以避免见Hp就杀，广泛应用抗生素的现象发生。临床上用来诊断感染的方法很多，如胃组织做快速尿酶测定，组织切片染色，细菌培养。13C呼气试验等，但这些结果易受试剂质量，标本量，反应时间，环境温度，用药情况的影响，还需采用侵入性、创伤性的手段来采集样本，给患者带来一定的痛苦和心理负担；而免疫印迹法为无创伤性诊断检测方法，还具有敏感性高、特异性强、方法简单、时间短等特点，免疫印迹法检测门诊消化不良患者HP感染及其分型简便易行，同时对抗HP治疗有很好的指导作用。