无偿献血者血液初检、复检、再检结果研究

冯娟

(安阳市中心血站 检验科 河南 安阳 455000)

无偿献血者血液初检、复检、再检结果研究

冯娟

(安阳市中心血站 检验科 河南 安阳 455000)

目的对无偿献血者血液初检、复检、再检结果进行比较，分析其符合情况，确保检测结果的准确性。方法对2014年5月至2015年5月安阳市中心血站无偿献血者67 436人份标本的初检、复检、再检结果进行比较、分析。结果HBsAg、抗-HCV、抗-HIV、抗-TP初、复检符合率分别为99.05%、99.55%、99.57%、99.60%；再检符合率分别为38.10%、25.99%、45.52%、51.11%；HBsAg、抗-HIV、抗-TP初、复检阳性率比较，差异均具有统计学意义(P<0.05)。结论选择质量优良的试剂和规范实验室操作是保证检测结果准确性的关键所在。

无偿献血者；初检；复检；再检；符合率；假阳性

根据GB18467-2001《献血者健康检查要求》对非预检献血者经健康情况征询和体格检查合格后即可采血，采出的血液必须进行初检和复检，献血者血液初检和复检不得用同一试剂厂生产的试剂，同一标本的初检和复检不得由同一人进行操作，合格后方可供临床应用。由于同一份血液标本用不同的试剂检测，实际检测中有部分标本初、复检结果不一致，需要用初、复检试剂进行双孔再检，根据再检结果判断该血液是否合格。为保障临床输血的安全性，确保检测结果的准确性，本研究对2014年5月至2015年5月安阳市无偿献血者初检、复检、再检结果进行统计学分析。

1 材料与方法

1.1样本来源选择2014年5月至2015年5月无偿献血者67 436人份标本，初、复检标本为采血人员采血时直接留取的真空采血管标本，再检标本为血袋上小辫标本。

1.2试剂与仪器初检试剂：HBsAg、抗-HCV、抗-HIV、抗-TP(均为北京万泰)；复检试剂：HBsAg(法国伯乐)、抗-HCV(北京科卫)、抗-HIV(法国伯乐)、抗-TP(北京科卫)。以上试剂均有国家批准文号和批检标识，且在有效期内使用。仪器：ML-STAR CH.8全自动加样系统(瑞士HAMILTON公司)，ML-FAME 24/20全自动酶免后处理系统(瑞士HAMILTON公司)，爱康全自动酶免仪Uranus AE280(深圳爱康)。

1.3检测方法与结果判定分别用ELISA法初检、复检试剂对同一献血者血液标本进行检测，初、复检结果一致时，按标准判断结果，初、复检结果不一致时，用原有初、复检试剂对血袋小辫进行双孔再检，再检结果一致时，按标准判断结果，不一致时，按有反应性结果报告。判定标准：S/CO≥1判为阳性；0.7≤S/CO<1判断为灰区；S/CO<0.7判为阴性；阳性、灰区结果判定为有反应性。

1.4统计学分析采用SPSS 19.0统计学软件进行数据处理分析，定性资料的组间比较采用χ2检验，P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1初、复检结果情况HBsAg、抗-HCV、抗-HIV、抗-TP初、复检符合率分别为99.05%(66 793/67 436)、99.55%(67 132/67 436)、99.57%(67 146/67 436)、99.60%(67 166/67 436)；再检率分别为0.95%(643/67 436)、0.45%(304/67 436)、0.43%(290/67 436)、0.40%(270/67 436)。见表1。

2.2初、复检不符标本再检结果情况HBsAg、抗-HCV、抗-HIV、抗-TP再检符合率分别为38.10%(245/643)、25.99%(79/304)、45.52%(132/290)、51.11%(138/270)，再检不符率分别为 61.90%(398/643)、74.01%(225/304)、54.48%(158/290)、48.89%(132/270)。 见表2。

2.3初、复检阳性检出及统计情况HBsAg、抗-HIV、抗-TP初、复检阳性率比较，差异均有统计学意义(P<0.05)。见表3。

表1 初、复检结果情况(n，%)

表2 初、复检不符标本再检结果情况(n，%)

表3 初、复检阳性检出及统计情况(n)

3 讨论

血站采用法规要求的方法对无偿献血者的血液标本进行检测，ELISA是目前检测输血相关性疾病的主要方法之一。但由于ELISA实验影响因素多，有一部分初筛反应性样本需要通过重复试验进行最终判断。本次调查发现HBsAg、抗-HCV、抗-HIV、抗-TP初、复检符合率分别为99.05%、99.55%、99.57%、99.60%，再检率分别为0.95%、0.45%、0.43%、0.40%，再检符合率分别为38.10%、25.99%、45.52%、51.11%，低于濮阳再检符合率[1]。以上数据分析可以看出HBsAg初、复检符合率较其他项目偏低，其再检符合率也较低，提示HBsAg检测中产生的假阳性较高，假阳性结果成为血液初、复检结果不符的主要原因。假阳性结果的产生与标本状态、实验操作、试剂质量等因素有关。①标本状态：标本处理不完全，血清中的纤维蛋白与酶结合物易黏附到ELISA检测板上，洗板时清洗不干净，可造成残留出现假阳性结果[2]。溶血标本可以使红细胞溶解释放出大量具有过氧化物活性的血红蛋白，从而导致非特异性显色。此外，类风湿因子、嗜异性抗体、自身抗体及外源性物质等也会干扰检测结果。②实验操作：温度是ELISA试验结合反应的重要影响因素，为保证检测标本在温度一致的条件下反应，实验前应将试剂平衡至室温，避免由于ELISA反应板升降温速度的差别，引起周边与内部位置结果的差异导致的边缘效应[3]。加样过程中的污染、拖带，在使用一次性加样尖情况下可以有效避免。加样速度不可太快，避免加在孔壁上部的非包被区，易导致非特异吸附。洗板机注液针堵塞或洗液配置比例不当会导致非特异性结合未被洗掉而显色。ELISA影响因素较多，实验过程中的每个环节都会对试验结果产生影响，特别是加样、孵育、洗板、显色等关键点，应避免检测过程中操作误差的影响，排除各种影响因素的干扰才能提供出正确可靠的检测结果。

目前血站系统血液检测大多采用全自动酶免系统，提高了工作效率，减少了人为误差的因素。设备的运行状态是获得稳定结果的前提，设备运行期间的监控可作为分析失控或试验无效原因的重要依据。室内质控是实验室监测和评价工作质量，以决定报告能否发放所采取的一系列检查、控制手段，是实验室自我检测的最主要的方法。应建立和实施血液检测过程的质量保证程序[4]，才能提高实验室对检测样品获得正确结果的技术能力，发现问题并制定纠正措施，提高实验室检测能力。

除抗-HCV外，其他试剂初、复检阳性率比较，差异均具有统计学意义。可见不同试剂间的差异是明显的。目前国内ELISA试剂已较为成熟，但试剂灵敏度与特异性仍存在一定的差别，由于试剂包被的抗原或抗体片段来源不同，检测的能力也有所不同。非特异性吸附固相载体的干扰物质、抗原或抗体纯度不够，含有杂蛋白产生非特异性吸附也不可避免。尽管大部分试剂能够检出最低检出量，但由于试剂灵敏度的不同，S/CO值的结果差距较大，导致弱阳性标本初、复检结果不一致。因此，选择高质量的试剂是保证检测结果准确的关键之一，应选择灵敏度高、特异性好、稳定性好、批间差小的检测试剂。国家参比实验室每年对各家试剂进行质量评估，可作为选择试剂的参考依据，在使用前对试剂进行评估、确认，也是有效监控的手段之一。

综上所述，排除各种影响因素的干扰和正确的操作是保证ELISA 检测结果准确可靠的必要条件，保证标本状态、设备运行状态、环境温度、人员操作等达到最佳状态并进行持续有效的人为监控，对检测结果进行室内质控符合性检查，结果异常时的重复试验也是保障结果准确性的有效措施，必须对ELISA试验过程进行全方面的质量控制。

[1] 胡秀兰.无偿献血者血液初复检结果不一致再检的意义[J].临床输血与检验,2014,16(4):424-425.

[2] 张春艳.酶联免疫吸附试验检测结果的影响因素和应对措施[J].中国医药指南,2014,12(29):393-394.

[3] 谢璟,崔江龙,王宏碧,等.ELISA法对乙肝六项检测结果的影响及处理对策[J].实验与检验医学,2011,29(1):83-84.

[4] 丁永波,金花.浅谈实验室自动化血液检测过程的质量保证[J].新疆医学,2011,41(2):114-115.

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10.3969/j.issn.1004-437X.2017.19.020

2016-03-26)