新型苯并吡喃类FSH拮抗剂的合成

王志涛, 吕兰亭, 任二勇, 王旭东, 张 瑞, 毛龙飞, 姜玉钦*

(1. 天方药业有限公司，河南 驻马店 463000; 2. 河南师范大学 化学化工学院，河南省手性醇类药物工程技术研究中心，河南 新乡 453007)

·制药技术·

新型苯并吡喃类FSH拮抗剂的合成

王志涛1, 吕兰亭1, 任二勇1, 王旭东1, 张 瑞1, 毛龙飞2, 姜玉钦2*

(1. 天方药业有限公司，河南 驻马店 463000; 2. 河南师范大学 化学化工学院，河南省手性醇类药物工程技术研究中心，河南 新乡 453007)

以2-溴-4,5-二甲氧基苄溴为起始原料，依次经取代、Sonogoshira偶联、水解、酰化和氧化反应合成了新型FSH拮抗剂——(R)-N-[1-羟基-3-(1H-吲哚-3-基)丙烷-2-基]-3-异丙氧基-8,9-二甲氧基-6H-苯并[c]苯并吡喃-2-甲酰胺，总收率16.8%，其结构经1H NMR和MS(ESI)确证。

2-溴-4,5-二甲氧基苄溴； FSH拮抗剂； (R)-N-(1-羟基-3-(1H-吲哚-3-基)丙烷-2-基)-3-异丙氧基-8,9-二甲氧基-6H-苯并[c]苯并吡喃-2-甲酰胺； 药物合成

Abstract： A FSH inhibitor, (R)-N-[1-hydroxy-3-(1H-indol-3-yl)propan-2-yl]-3-isopropoxy-8,9- dimethoxy-6H- benzo[c]chromene-2-carboxamide with the total yield of 16.8%, was synthesized by reaction of substitution, Sonogoshira coupling, hydrolysis and oxidation reaction, using 2-bromo-4,5-dimethoxybenzyl as the starting material. The structure was confirmed by1H NMR and MS(ESI).

Keywords： 2-bromo-4,5-dimethoxybenzyl bromide; FSH antagonist; (R)-N-[1-hydroxy-3-(1H-indol-3-yl) propan-2-yl]-3-isopropoxy-8,9-dimethoxy-6H-benzo[c]chromene-2-carboxamide; drug synthesis

促性腺激素在人体中表现出重要的生理机能，比如新陈代谢、体温调节和生殖过程。它是由下丘脑合成和分泌的，通过诱导垂体中促卵泡激素(FSH)/黄体生成激素(LH)的分泌，并进一步诱导卵巢中各级卵泡的生长发育及排卵[1-3]。FSH是哺乳动物生殖过程中的核心激素，在胎儿性分化、胎儿期卵子峰发生和卵泡闭锁、性成熟期卵泡的发生发育和成熟、颗粒细胞芳香化酶活化和雄激素向雌激素的转化、生殖周期的调节中起到不可替代的关键作用。FSH对靶器官的作用主要由FSH受体(FSHR)所介导[4-7]。研究表明，FSHR不仅只表达于性腺，也在骨骼、前列腺、卵巢表面上皮等其它组织的表达。FSH在体内水平过高，会导致骨质流失，一些激素依赖性疾病，如卵巢癌、前列腺癌、子宫内膜异位、卵巢过度刺激综合征等，都受FSH影响很大；通过抑制FSH的

Scheme1

分泌，可以进而抑制性腺分泌性激素，导致血中疾病依赖性激素水平降低，抑制癌细胞的生长或预防、缓解、治疗其他病症。例如，西曲瑞克就是按照该机理对卵巢癌发挥抗增殖效应[8-10]。目前，研究发现一种新型的FSH受体抑制剂药物分子——(R)-N-[1-羟基-3-(1H-吲哚-3-基)丙烷-2-基]-3-异丙氧基-8,9-二甲氧基-6H-苯并[c]苯并吡喃-2-甲酰胺(1)[11]，对人FSHR的抑制作用达到IC50为10.7 nmol·L-1，目前已经进入临床三期研究。

本文对1的合成路线进行研究，在结合文献报道和实验经验的基础上，设计了一条新的合成路线:以2-溴-4,5-二甲氧基苄溴为起始原料，依次与2,4-二羟基-苯甲酸甲酯和2-溴丙烷经取代成醚反应制得2-羟基-4-(2-溴-4,5-二甲氧基苄氧基)-苯甲酸甲酯(2)和2-异丙氧基-4-(2-溴-4,5-二甲氧基苄氧基)-苯甲酸甲酯(3)；再经自身Sonogoshira偶联制得3-异丙氧基-8,9-甲氧基-6H-苯并[c]苯并吡喃-2-甲酸甲酯(4)，进而水解制得3-异丙氧基-8,9-二甲氧基-6H-苯并[c]苯并吡喃-2-甲酸(5)；最后与D-色氨酸经酰化和氧化合成目标化合物(1, Scheme 1)，总收率16.8%，其结构经1H NMR和MS(ESI)表征。

1 实验部分

1.1 仪器与试剂

Avance 400 MHz型核磁共振仪(CDCl3为溶剂，TMS为内标)；UltiMate 3000型高效液相色谱仪。

2,4-二羟基-苯甲酸甲酯,2-溴-4,5-二甲氧基苄溴和1-羟基苯并三唑，郑州希派克化工有限公司；2-溴丙烷,双(三苯基膦)二氯化钯(II)，阿拉丁试剂；GF254薄层层析硅胶板，烟台江友硅胶开发有限公司；其余所用试剂均为分析纯。

1.2 合成

(1)2的合成

在反应瓶中，依次加入干燥丙酮800 mL， 2,4-二羟基-苯甲酸甲酯4.5 g(26.8 mmol), 2-溴-4,5-二甲氧基苄溴10.0 g(32. 0 mmol)和碳酸钙11.5 g(110.0 mmol)；缓慢升温至80 ℃，回流反应4 h(TLC监测)。减压蒸除溶剂，剩余物加入二氯甲烷500 mL，依次用纯净水(3×200 mL)洗涤，无水硫酸钠干燥，蒸除溶剂后经硅胶柱层析(洗脱剂：A=PE/EA=5/1,V/V)纯化得27.5 g，收率78%；1H NMRδ: 10.97(s, 1H), 7.76(d,J=8.0 Hz, 1H), 7.06(s, 1H), 7.00(s, 1H), 6.56～6.50(m, 2H), 5.08(s, 2H), 3.92(s, 3H), 3.89(s, 3H), 3.86(s, 3H); MS(ESI)m/z: 298.2{[M+H]+}。

(2)3的合成

在反应瓶中依次加入DMF 50 mL，22.4 g(6 mmol)， 2-溴丙烷1.2 mL和碳酸钾1.6 g，缓慢升温至80 ℃，反应8 h(TLC监测)。加入适量纯净水淬灭反应，用乙酸乙酯(3×50 mL)萃取，合并有机相，用无水硫酸钠干燥，蒸除溶剂，残余物经硅胶柱层析(洗脱剂：A)纯化得32.3 g，收率85%；1H NMRδ: 7.82(d,J=8.0 Hz, 1H), 7.05(s, 1H), 7.00(s, 1H), 6.60～6.53(m, 2H), 5.10(s, 2H), 4.61～4.49(m, 1H), 3.88(s, 3H), 3.85(d,J=4.0 Hz, 6H), 1.37(d,J=8.0 Hz, 6H); MS(ESI)m/z: 440.3{[M+H]+}。

(3)4的合成

在反应瓶中依次加入二甲基乙酰胺30 mL，31.1 g(2.5 mmol)和碳酸钙0.8 mg， N2保护下加入双(三苯基膦)二氯化钯(II)0.17 g，搅拌下于室温反应30 min；密闭反应瓶，移至微波反应器中，于130 ℃反应2 h(TLC监测)。加入适量纯净水淬灭反应，用乙酸乙酯(3×20 mL)萃取，合并有机相，无水硫酸钠干燥，蒸除溶剂，残余物经硅胶柱层析(洗脱剂：A=10/1)纯化得41.4 g，收率86%；1H NMRδ: 8.12(s, 1H), 7.15(s, 1H), 6.63(s,1H), 6.57(s,1H), 5.11(s, 2H), 4.61～4.50(m, 1H), 3.97(s, 3H), 3.90(s, 6H), 1.40(d,J=8.0 Hz, 6H); MS(ESI)m/z: 359.4{[M+H]+}。

(4)5的合成

在反应瓶中依次加入41.36 g(3.8 mol)和乙醇50 mL，搅拌下加入氢氧化钠0.46 g的水(5 mL)溶液，升温至80 ℃，反应1 h(TLC监测)。蒸除溶剂，残余物加入水10 mL，用乙酸乙酯(3×15 mL)洗涤，合并水相，用稀盐酸调至pH 4，用二氯甲烷(3×10 mL)萃取，合并有机相，蒸除溶剂得51.1 g，收率84.6%；1H NMRδ: 10.80(s, 1H), 8.44(s, 1H), 7.20(s, 1H), 6.61(d,J=4.0 Hz, 2H), 5.15(s, 2H), 4.88～4.74(m, 1H), 3.98(s, 3H), 3.90(s, 3H), 1.51(d,J=8.0 Hz, 6H); MS(ESI)m/z: 343.4{[M-H]-}。

(5)1的合成

在反应瓶中依次加入51.1 g(3.2 mmol)，二异丙基乙胺1.7 mL， 1-羟基苯并三唑0.65 g(4.8 mmol)， D-色氨酸0.73 g(3.5 mmol)和DMF 20 mL，搅拌使其溶解；加入1-乙基-3-(3-二甲胺基丙基)碳二亚胺盐酸盐0.9 g，于室温反应24 h(TLC监测)。加入适量纯净水，用乙酸乙酯(3×30 mL)萃取，合并有机相，用无水硫酸钠干燥，经硅胶柱层析(洗脱剂：A=10/1)纯化得10.58 g，收率为35%；1H NMRδ: 10.84(s, 1H), 8.42(d,J=8.0 Hz, 1H), 8.38(s, 1H), 7.77(d,J=8.0 Hz, 1H), 7.37(d,J=8.0 Hz, 1H), 7.27(s, 1H), 7.18(d,J=4.0 Hz, 1H), 7.10(td,J=8.0 Hz, 4.0 Hz, 1H), 7.01(td,J=8.0 Hz, 4.0 Hz, 1H), 6.94(s, 1H), 6.78(s, 1H), 5.15(s, 2H), 4.98(t,J=4.0 Hz, 1H), 4.83～4.79(m, 1H), 4.31～4.27(m, 1H), 3.91(s, 3H), 3.82(s, 3H), 3.55～3.44(m, 2H), 3.01(d,J=8.0 Hz, 2H), 1.30(dd,J=8.0 Hz, 4.0 Hz, 6H); MS(ESI)m/z: 517.6{[M+H]+}。

2 结果与讨论

2.1 合成

4的合成反应属于自身Sonogoshira偶联成环反应，一般使用钯试剂进行催化。我们研究了不同钯试剂对合成4催化效果，结果见表1。由表1可以看出，使用PdCl2(PPh3)2作钯催化剂，催化效果较好，收率达到86%，使用PdCl2(PCy3)2作催化剂的收率最低(34%)。

表1 钯试剂对4收率的影响Table 1 Effect of alkali agents on yield of 4

*A～G: Pd(acac)2, PdCl2(PPh3)2, Pd/PVP, Pd(MeCN)2Cl2, PdCl2(PCy3)2, PdCl2, Pd(dba)2。

表2 PdCl2(PPh3)2的用量对4收率的影响Table 2 Effect of the amount of PdCl2(PPh3)2 on the yield of 4

钯试剂价格比较昂贵，为了节约成本，我们研究了PdCl2(PPh3)2的用量对4收率的影响，结果见表2。从表2可以看出，随着PdCl2(PPh3)2用量的增加，收率逐渐提高，当PdCl2(PPh3)2用量为3的15wt%时，收率为86%，继续增加用量，收率提高不明显。因此，确定PdCl2(PPh3)2与3的质量比为15%。

以廉价易得的2-溴-4,5-二甲氧基苄溴为起始原料，合成了一种新型FSH抑制剂(R)-N-[1-羟基-3-(1H-吲哚-3-基)丙烷-2-基]-3-异丙氧基-8,9-二甲氧基-6H-苯并[c]苯并吡喃-2-甲酰胺。该路线具有操作简单，收率较高，成本较低等优点，具有一定的工业化应用前景。

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SynthesisofANovelFSHAntagonistofBenzopyrans

WANG Zhi-tao1, LÜ Lan-ting1, REN Er-yong1, WANG Xu-dong1, ZHANG Rui1, MAO Long-fei2, JIANG Yu-qin2*

(1. Topfond Pharmaceutical Co., Ltd., Zhumadian, 463000, China; 2. Henan Engineering Research Center of Chiral Hydroxyl Pharmaceutical, School of Chemistry and Chemical Engineering, Henan Normal University, Xinxiang 453007, China)

O626.1; R914.5

A

10.15952/j.cnki.cjsc.1005-1511.2017.10.17131

2017-06-12

河南省杰出青年创新人才项目(164100510015, 174100510025)

王志涛(1973-)，男，汉族，吉林吉林人，工程师，主要从事药品开发及质量管理研究。

姜玉钦，副教授， E-mail: jiangyuqin@htu.cn