15%唑啉草酯·氯氟吡氧乙酸异辛酯可分散油悬浮剂高效液相色谱分析

潘 静，徐 妍，傅 杨，东 琴，刘润峰，高敬雨，金鼎俊



15%唑啉草酯·氯氟吡氧乙酸异辛酯可分散油悬浮剂高效液相色谱分析

潘 静1，徐 妍1，傅 杨2，东 琴1，刘润峰1，高敬雨1，金鼎俊2

(1.北京明德立达农业科技有限公司，北京 102206；2.云南农业大学，云南 650201)

采用高效液相色谱法，以乙腈和水(0.05%磷酸水溶液)为流动相，使用C18反相柱和紫外可变波长检测器，在230 nm波长下对15%唑啉草酯·氯氟吡氧乙酸异辛酯可分散油悬浮剂进行分离和定量分析。结果表明，该分析方法对有效成分唑啉草酯、氯氟吡氧乙酸异辛酯的线性相关系数分别为0.999 3和0.999 5，标准偏差分别为0.12和0.17，变异系数分别为1.92%和1.83%，平均回收率分别为99.32%和99.57%。

唑啉草酯；氯氟吡氧乙酸异辛酯；高效液相色谱；分析

唑啉草酯，英文名称：pinoxaden，CAS号：243973-20-8，分子式：C23H32N2O4，化学名称：8-(2,6-二乙基-4-甲苯基)-1,2,4,5-四氢-7-氧-7吡唑[1,2-d] [1,4,5]氧二唑频-9-基-2,2-二甲基丙酸酯。唑啉草酯是瑞士先正达作物保护有限公司开发的一种新型除草剂[1]。该剂属新苯基吡唑啉类除草剂，为乙酰辅酶A羧化酶(ACC)抑制剂，可以阻止脂肪酸的合成，使细胞生长分裂停止，破坏细胞膜的含脂结构，导致杂草死亡。唑啉草酯具有内吸传导性，主要用于防除多种一年生禾本科杂草，如燕麦属、黑麦草属、藕草属和狗尾草属等属的重要禾本科杂草[1-3]。

氯氟吡氧乙酸异辛酯，英文名称：fluroxypyr-meptyl，CAS号：81406-37-3，分子式：C15H21Cl2FN2O3，化学名称：4-氨基-3,5-二氯-6-氟-2-吡啶氧乙酸异辛酯。氯氟吡氧乙酸异辛酯由美国陶氏益农公司开发生产，是有机杂环类选择性内吸传导型苗后除草剂，施药后很快被植物吸收，使敏感植物出现典型激素类除草剂的反应，植株畸形，扭曲，最终枯死。该剂适用于小麦、大麦、玉米、葡萄、果园、牧场、林地、草坪等地防除阔叶杂草，如猪殃殃、卷茎蓼、马齿苋、龙葵、田旋花、蓼、苋等，对禾本科杂草无效。氯氟吡氧乙酸异辛酯对作物安全，在土壤中易降解，半衰期较短，不会对后茬作物造成药害[4]。

药效试验证明，唑啉草酯和氯氟吡氧乙酸异辛酯复配适用于防除小麦田一年生禾本科、阔叶杂草，速效性好，杀草谱广。唑啉草酯和氯氟吡氧乙酸异辛酯单剂的分析方法已有报道[2,4,5]。有关唑啉草酯和氯氟吡氧乙酸异辛酯油悬浮剂的液相色谱分析，目前尚未见公开报道。

本文采用反相高效液相色谱法。使用C18反相柱，紫外可变波长检测器，对有效成分进行分离和定量分析。此方法同时适用唑啉草酯和氯氟吡氧乙酸异辛酯原药及制剂的分析，具有简便、快速、准确、灵敏度高、重复性好的特点[2,5]，适用于大生产时产品质量的检测分析。

1 试验部分

1.1 仪器与试剂

高效液相色谱仪：Agilent 1260，具可变波长紫外检测器；色谱数据处理工作站；色谱柱：150 mm×4.6 mm (i.d.)不锈钢柱，内装ZORBAX SB-C18填充物，粒径5 µm；过滤器：滤膜孔径0.45 μm；进样器：50 μL；超声波清洗器。

乙腈：色谱纯；磷酸：分析纯；水：新蒸二次蒸馏水；唑啉草酯标准样品：已知质量分数≥98.0%(沈阳化工研究院)；氯氟吡氧乙酸异辛酯标准样品：已知质量分数≥98.0%(沈阳化工研究院)；15%唑啉草酯·氯氟吡氧乙酸异辛酯油悬浮剂(江苏明德立达作物科技有限公司)。

1.2 液相色谱操作条件

流动相：乙腈+水(0.05%磷酸水溶液)=75+25(体积比)；流速：1.0 mL/min；柱温：25 ℃；检测波长：230 nm；进样体积：10 µL；保留时间：唑啉草酯约：3.6 min，氯氟吡氧乙酸异辛酯约：9.8 min。唑啉草酯、氯氟吡氧乙酸异辛酯的液相色谱图见图1、图2。

1.3 测定步骤

1.3.1 标样溶液的配制

称取唑啉草酯标样约10 mg、氯氟吡氧乙酸异辛酯标样约15 mg(精确至0.000 2 g)于50 mL容量瓶中，用乙腈溶解并定容，摇匀后备用。

1.3.2 试样溶液的配制

称取试样约163 mg(精确至0.000 2 g)于50 mL容量瓶中，用乙腈溶解、定容，摇匀后离心，取上清液备用。

1.3.3 测定

在上述操作条件下，待仪器稳定后，连续注入数针标样溶液，直至相邻2针唑啉草酯、氯氟吡氧乙酸异辛酯响应值相对变化小于1.5%时，按照标样溶液、试样溶液、试样溶液、标样溶液的顺序进行测定。

1-唑啉草酯；2-氯氟吡氧乙酸异辛酯

1-唑啉草酯；2-氯氟吡氧乙酸异辛酯

1.3.4 计算

将测得的2针试样溶液以及试样前后2针标样溶液中的唑啉草酯、氯氟吡氧乙酸异辛酯峰面积分别进行平均。试样中的唑啉草酯、氯氟吡氧乙酸异辛酯质量分数1(%)按下式计算：

式中：1——标样溶液中唑啉草酯、氯氟吡氧乙酸异辛酯峰面积的平均值；2——试样溶液中唑啉草酯、氯氟吡氧乙酸异辛酯峰面积的平均值；1——唑啉草酯、氯氟吡氧乙酸异辛酯标样的质量，g；2——试样的质量，g；——标样中唑啉草酯、氯氟吡氧乙酸异辛酯的质量分数，%。

2 结果与分析

2.1 色谱条件的选择

通过紫外可见分光光度计UV-1800在190~400 nm波长范围内进行紫外扫描选择，发现唑啉草酯在200.20~230.00 nm和255.00~275.00 nm均有较大吸收，氯氟吡氧乙酸异辛酯在210.40~240.00 nm均有较大吸收，但考虑到溶剂及助剂对吸收的影响和样品中两组分的峰高及峰面积尽量接近，最终选定了230 nm作为检测波长(图3、图4)。

图3 唑啉草酯紫外扫描图

图4 氯氟吡氧乙酸异辛酯紫外扫描图

色谱柱选择常规的ZORBAX SB-C18反相柱。根据唑啉草酯、氯氟吡氧乙酸异辛酯物化性质，用乙腈作为溶剂溶解样品，并选择乙腈和磷酸水溶液作为流动相。为了得到更好的分离效果和峰形，将流动相按不同的比例在色谱柱上进行选择比较试验，最终确定流动相为乙腈+水(0.05%磷酸水溶液)。当流速控制在1.0 mL/min时，有效成分与杂质能很好地分离，峰形对称，基线平稳，保留时间短。综合以上因素，最终选定乙腈、水(0.05%磷酸水溶液)作为流动相，体积比为75︰25。

2.2 分析方法的线性相关性试验

按1.3.1中方法配制不同浓度的唑啉草酯、氯氟吡氧乙酸异辛酯标准溶液，按上述色谱条件操作，每个浓度重复进样2次，并且相邻2针的峰面积相对偏差小于1%，求其峰面积平均值。以质量浓度为横坐标、峰面积值为纵坐标绘制标准曲线，得唑啉草酯线性方程为=10.123 3－6.004 1，相关系数2=0.999 3，表明线性关系良好(图5)；氯氟吡氧乙酸异辛酯的线性方程为=16.450 7+52.090 2，相关系数2=0.999 5，表明线性关系良好(图6)。

图5 唑啉草酯线性关系图

图6 氯氟吡氧乙酸异辛酯线性关系图

2.3 分析方法的精密度试验

选取有代表性的15%唑啉草酯·氯氟吡氧乙酸异辛酯OD试样一个，在上述色谱操作条件下平行测定5次，计算唑啉草酯和氯氟吡氧乙酸异辛酯的标准偏差分别为0.12、0.17，变异系数分别为1.92%、1.83%，结果见表1。

表1 分析方法的精密度测定结果

2.4 分析方法的准确度试验

采用标准添加法，在测得质量分数的唑啉草酯、氯氟吡氧乙酸异辛酯试样中加入一定量的唑啉草酯、氯氟吡氧乙酸异辛酯标准品，再按上述色谱操作条件进行分析，测得唑啉草酯的平均回收率为99.32%，氯氟吡氧乙酸异辛酯的平均回收率为99.57%，结果见表2。

表2 分析方法的准确度测定结果

3 结 论

本文提出的15%唑啉草酯·氯氟吡氧乙酸异辛酯可分散油悬浮剂中有效成分唑啉草酯、氯氟吡氧乙酸异辛酯的分析方法，同时适用于唑啉草酯、氯氟吡氧乙酸异辛酯原药及制剂的分析。试验结果表明，唑啉草酯、氯氟吡氧乙酸异辛酯在测试浓度范围内线性关系良好，方法准确度和精密度较高，具有操作简便、快速、准确、可靠及分离效果好的优点，是产品质量控制和应用研究中较为理想的分析方法。

[1] 《农药科学与管理》编辑部. 唑啉草酯[J]. 农药科学与管理, 2010, 31(11): 59－60.

[2] 武鹏, 于荣. 5%唑啉草酯乳油高效液相色谱分析方法研究[J]. 农药科学与管理, 2016, 37(4): 48－50.

[3] 叶萱. 唑啉草酯[J]. 世界农药, 2014, 36(1): 60－61.

[4] 刘长令. 世界农药大全(除草剂卷)[M]. 1版. 北京:化学工业出版社，2008: 47－50, 109－110, 206－208.

[5] 王海霞,高晓晖. 高效液相色谱法测定氯氟吡氧乙酸异辛酯的含量[J]. 农药, 2014, (1): 31－33.

Analysis of Pinoxaden + Fluroxypyr-meptyl 15% OD by HPLC

PAN Jing, XU Yan, FU Yang, DONG Qin, LIU Runfeng, GAO Jingyu, JIN Dingjun

(1.Beijing Mindleader Agroscience Co., Ltd, Beijing 102206,China; 2.Yunnan Agricultural University, Yunnan 650201,China)

A method for separation and quantitative analysis of pinoxaden + fluroxypyr-meptyl 15% OD by HPLC with acetonitrile and 0.05% phosphoric acid solution as mobile phase, ZORBAX SB-C18column and UV-absorbance detector at 230 nm wavelength was established. The results showed that the linears correlation coefficient of pinoxaden and fluroxypyr-meptyl were 0.999 3 and 0.999 5, the standard deviations were 0.12 and 0.17, the variation coefficients were 1.92% and 1.83%, and average recoveries were 99.32% and 99.57%, respectively.

pinoxaden; fluroxypyr-meptyl; HPLC; analysis

10.16201/j.cnki.cn31-1827/tq.2017.03.09

TQ450.7

A

1009-6485(2017)03-0052-04

云南省科技惠民计划专项(2016RA007)“防除云南高原麦田恶性虉草农药新制剂配方研究与示范”

潘静(1974—)，女，安徽凤阳人，工程师，主要从事农药质量分析与检测工作。Tel: 010-56071481，E-mail：panjing@mdldagro.com。

2016-12-31。