吲达帕胺片含量测定方法改进研究

王洪萍，郑婷婷，王 芝，曾凡明

（远大医药＜中国＞有限公司，湖北 武汉 430040）

吲达帕胺片含量测定方法改进研究

王洪萍，郑婷婷，王 芝，曾凡明

（远大医药＜中国＞有限公司，湖北 武汉 430040）

目的对吲达帕胺片的含量测定方法进行研究，找出分析方法的关键控制点。方法 按照2015年版《中国药典（二部）》吲达帕胺片含量测定方法，将吲达帕胺片研细后的粉末全部过6号筛，加乙醇适量，水浴加热溶解一定时间，按紫外－可见分光光度法[2015年版《中国药典(四部)》（通则0401）]，在242 nm波长处测定吸光度。结果 吲达帕胺片的含量在90．0% ～110．0%之间，符合《中国药典》的要求。结论 经过改进的测定方法能确保在不同实验室、不同型号的仪器，以及不同分析人员等影响因素下，始终能准确地检测出吲达帕胺片的含量。

吲达帕胺片；含量测定；研细过筛；方法改进

Abstract：Ob jective To study the method for content determination of Indapamide Tablets，and to find out the critical point control of analytical methods．M ethods According to the method of China Pharmacopoeia（2015 Edition，VolumeⅡ）to determine the content of Indapamide Tablets，the porphyrization powder of Indapamide Tablets was over the No．6 sieve，the right amount of alcohol was added and heated up in water bath for a certain time．Absorbance was measured at the wavelength of 242 nm by ultraviolet－visible spectrophotometry of China Pharmacopoeia（2015 Edition，VolumeⅣ，General 0401）．Results The content of Indapamide Tablets ranged from 90．0% to 110．0%，which was in accordance with the requirements of Chinese Pharmacopoeia．Conclusion The improved method can always accurately determine the content of Indapamide Tablets in influence factor of different laboratories，different types of instruments and different analysts．

Key words：Indapamide Tablets；content determination；fine screening；improvement method

吲达帕胺为非噻嗪类吲哚衍生物，具有扩张血管平滑肌及利尿的作用[1－3]，是目前临床广泛应用的一线抗高血压药，可单独用于轻、中、高度高血压，降压温和，疗效确切，为理想的长效降压药[4－10]。本公司曾安排不同的化验人员按照2015年版《中国药典(二部)》[11]含量测定项下方法检测，结果含量差异较大。对生产的吲达帕胺片（批号为15110303）留样检测，不同的化验人员检测结果不同：新化验员检测含量为87．2%，不符合《中国药典》标准90．0%～110．0%的要求，为不合格产品；有经验的化验员检测含量为96．7%，符合《中国药典》规定。最初认为是含量均匀度问题，后通过不同化验员进行同批随机抽检，对含量均匀度进行检测，结果发现，虽新老化验员含量均匀度检测值均在药典规定范围，但新化验员10片中每1片含量均比老化验员含量检测低近10%，10片含量平均值也相差10%，从而排除含量均匀性问题。故笔者着手对该产品的产品性质，英国药典(BP2015)、美国药典(USP38－NF33)、日本药典(JP17)中提及的检测方法进行相关文献查阅，发现本品难溶于水，在乙醇中溶解[3，12]，而英国药典对吲达帕胺片剂的含量测定溶解时间也有具体规定。本研究中从药片研磨细度、溶解温度、溶解时间等方面进行试验研究，探寻检验方法的关键控制点，以准确寻找关键控制参数，保证本品含量检测的准确性。现报道如下。

1 仪器与试药

1．1 仪器

UV2450型紫外 －可见分光光度计（日本岛津公司）；Evolution220型紫外－可见分光光度计（美国赛默飞世尔公司）；MS105DU型电子天平（梅特勒－托利多公司，精度为0．01 mg）；FA2104N型电子天平（上海精密科学仪器厂，精度为0．1mg）；DK－98－Ⅱ型恒温水浴锅（武汉恒信世纪科技公司）。

1．2 试药

吲达帕胺片（薄膜衣片，远大医药＜中国＞有限公司制剂分公司，批号为15110303和17010303，规格为2．5mg）；吲达帕胺对照品(中国食品药品检定研究院，批号为 100257－201605，规格为 100 mg／支，含量为97．9%）；95%乙醇（分析纯，国药集团化学制剂公司，批号为20160302，规格为500mL／瓶）；水（远大医药 ＜中国＞有限公司制剂分公司自制纯净水）。

2 方法与结果

2．1 溶液制备

对照品溶液：称取吲达帕胺对照品20 mg，精密称定，置200mL容量瓶中，加乙醇充分溶解后，定容至刻度，精密量取5mL，置100m L容量瓶中，用乙醇溶解并定量稀释制成每1mL中含5μg的溶液，即得。

供试品溶液：取本品20片（批号为17010303），精密称定，研细，精密称取适量（约相当于吲达帕胺5mg），置100m L容量瓶中，加乙醇适量，充分振摇，使吲达帕胺溶解，用乙醇稀释至刻度，摇匀，滤过，精密量取续滤液5mL，置50mL容量瓶中，用乙醇稀释至刻度，摇匀，即得。

阴性对照溶液：按处方比例称取空白辅料，置100 m L容量瓶中，加乙醇充分溶解后，定容至刻度，摇匀，过滤，即得。

2．2 含量检测方法的建立

2．2．1 测定波长确定

取对照品溶液，在200～400 nm波长范围内进行紫外扫描，结果吲达帕胺的最大吸收波长为242 nm。

2．2．2 方法学考察

阴性干扰试验：取空白溶剂及阴性对照溶液，同法操作。结果在242 nm波长处几乎无吸收，不干扰主药测定，故选择242 nm为吲达帕胺片含量测定波长。

重复性试验：按供试品溶液的配制方法平行配制溶液6份，照紫外－可见分光光度法[2015年版《中国药典(四部)》（通则0401）]，在242 nm波长处测定吸光度；同法测定对照品溶液，计算6份供试品溶液的含量。结果6份供试品溶液的含量分别为99．7%，99．2%，98．6%，99．2%，98．7%，99．8%，RSD为 0．5%(n＝6)，表明重复性合格。

中间精密度试验：取重复性试验配制的6份供试品溶液，改变分析日期、人员、设备，照紫外－可见分光光度法[2015年版《中国药典(四部)》（通则0401）]，在242 nm波长处测定吸光度。结果用紫外分光光度法测定吲达帕胺片含量的中间精密度的 RSD为1．2%（n＝6）。

溶液稳定性试验：将对照品溶液分别于0，1，2，4，6，12 h，照紫外－可见分光光度法[2015年版《中国药典(四部)》（通则0401）]，在242 nm波长处测定吸光度。结果对照品溶液吸光度的 RSD为0．8%（n＝6），稳定性符合规定。

回收率试验：称取吲达帕胺对照品 10．0，12．5，15．0mg各3份，精密称定，置50m L容量瓶中，加入处方比例的空白辅料，加乙醇适量，充分振摇，使吲达帕胺溶解，用乙醇稀释至刻度，摇匀，滤过，精密量取续滤液1m L，置50m L容量瓶中，用乙醇稀释至刻度，摇匀，照紫外－可见分光光度法[2015年版《中国药典(四部)》（通则0401）]，在242 nm波长处测定吸光度；同法测定对照品溶液，计算9份供试品溶液的含量，并计算回收率。结果见表1。

表1 吲达帕胺回收率试验结果(n＝9)

2．3 含量测定改进方法分析

2015年版《中国药典（二部）》凡例中6号筛为“100目”，粉末等级至少为“细粉”；8号筛为“150目”，粉末等级至少为最细粉。2种过筛粉末均符合吲达帕胺片含量测定项下描述的“研细”。

不同细粉粒度的含量比较：取本品20片（批号为17010303），精密称定，研细，将细粉过100目筛，细粉能全部通过，精密称取适量（约相当于吲达帕胺5mg），置100 mL容量瓶中，加乙醇适量，充分振摇，使吲达帕胺溶解，即为A组样品。同法配制B组样品，将细粉过150目筛，细粉不能完全通过，精密称取过 150目的粉末适量（约相当于吲达帕胺5mg），同法配制，即为B组样品。将两组样品置相同室温条件下，分别于20min，1 h，3 h时用紫外分光光度法测定含量，结果见表2。将B组粉末继续研细至全部能通过8号筛，再次将样品置相同室温条件下，分别于20 min，3 h依法测定含量，结果见表3。

粉末过不同筛的含量比较：取本品20片（批号为17010303），精密称定，研细，将细粉过2号筛(24目)，即得A组样品，同法配制B组样品(过4号筛，65目)，C组样品(过6号筛，100目)，精密称取3组样品适量（约相当于吲达帕胺5 mg），置100 m L容量瓶中，加乙醇适量，充分振摇，使吲达帕胺溶解，置相同室温条件下，分别于20min，3 h时依法测定含量，结果见表4。

不同溶解方法的含量比较：取本品20片（批号为17010303），精密称定，研细，将细粉过100目筛后精密称取适量（约相当于吲达帕胺5mg），置100mL容量瓶中，加乙醇适量，分别在不同条件下溶解样品，依法测定含量，结果见表5。

表2 相同研磨条件不同放置时间的含量测定结果(%)

表3 不同细粉粒度的含量测定结果(%)

表4 粉末过不同型号筛的含量测定结果(%)

表5 不同溶解方法的含量测定结果(%)

3 讨论

本试验中设置了2个影响因素，旨在考察细粉粒度和样品溶解时间对吲达帕胺片含量的影响。吲达帕胺片研细后，只有部分粉末（约72%）过150目筛，含量明显低于过100目筛粉末的含量，因此可初步判断未过150目筛的粉末中吲达帕胺的含量高于通过150目筛粉末吲达帕胺的含量，且吲达帕胺辅料比主药更易通过筛网。

将粉末研细，全部过150目筛，比较过100目筛和150目筛粉末的含量。结果表明，在相同溶解时间下，通过100目筛和150目筛粉末的含量无明显差异，建议将粉末研细后全部通过100目筛。

同一筛网粒度下的粉末，室温放置3 h的含量略高于20min的含量，但将样品溶解3 h后进行检测，操作时间过长，建议采取其他方式如适当提高溶解温度，从而促使吲达帕胺快速溶解，缩短试验时间。

过24目筛和65目筛粉末的含量在同一放置时间下，含量无明显差异（小于1%），但比过100目筛的含量低，故需将粉末研细后过100目筛。

由于吲达帕胺在乙醇中溶解，但在室温下溶解速率较慢，稍微提高温度后溶解速率明显加快。故本试验中将样品研细后，全部通过100目筛，分别进行3组试验。结果表明，45℃水浴20min与1 h后含量无明显差异，但略高于室温放置3 h的含量，建议将样品溶解条件定为“45℃水浴20min”。

综合以上试验，建议在吲达帕胺片的含量测定中，将样品的处理方式修订为：“取本品20片，精密称定，研细，细粉应全部过100目筛，将细粉搅拌均匀，精密称取适量（约相当于吲达帕胺5mg），置100m L容量瓶中，加乙醇适量，微温（40～50℃）20min，使吲达帕胺充分溶解。”

2015年版《中国药典（二部）》在测定吲达帕胺片剂的含量时采用的是将吲达帕胺片研细后加乙醇振摇溶解，测得的含量偏低。现将该方法的关键分析点进行控制，研细后的吲达帕胺片细粉应全部过100目筛，加乙醇适量，于45℃水浴加热溶解，与普通研细后加乙醇振摇溶解相比，含量能得到明显提高。因此，本试验中找出了分析方法的关键控制点，能够确保在不同的实验室、不同型号的仪器及不同的分析人员等影响因素下，始终能准确地检测出吲达帕胺片的含量。

[1]陈全红，徐 安，顾欢平．吲达帕胺片含量均匀度测定方法的改进[J]．中国药师，2001，4（6）：477．

[2]赵 吉吉，唐素芳．吲达帕胺片溶出度检测方法研究[J]．中国药品标准，2010，11（4）：271－274．

[3]刘 伟，王 云，曲显俊．高效液相色谱法测定吲达帕胺片的含量[J]．中国药业，2008，17（17）：17．

[4]谢请春，吕竹芬，申 楼．吲达帕胺缓释片的含量测定[J]．药品评价，2006（1）：60－62．

[5]Caruso FS，Szabadi R，Vukovich RA，et al．Phamacokinetics and clinical pharmacology of indapamide[J]．American Heart Journal，1983，106（2）：212－220．

[6]Finch L，Hicks PE，Moore RA．The effects of indapamide on vascular reactivity in experimental hypertension[J]．Curr Med Res Opin，1977，5(Suppl 1)：44－54．

[7]Shah VP，Lee J，Hunt JP，et al．Lack of dose－proportional absorption－elimination of chlorothiazide[J]．Curr Ther Res，1981，29：823．

[8]袁春平，张文芳，梁华娟，等．吲达帕胺缓释片有关物质含量测定[J]．医药导报，2015，34（7）：962－966．

[9]British Pharmacopoeia Commission．British Pharmacopoeia[M]．London：the Stationary Office Press，2013：3020．

[10]Sun X，Li SH，Wu XJ，et al．Study on the in vitro dissolution of indapamide tablets from different manufacturers[J]．Chin Hosp Pharm J，2006，26（12）：1504．

[11]国家药典委员会．中华人民共和国药典（二部）[M]．北京：中国医药科技出版社，2015：477－478．

[12]JX19990200．进口药品注册标准[S]．

Im provem ent M ethod for Content Determ ination of Indapam ide Tablets

Wang Hongping，Zheng Tingting，Wang Zhi，Zeng Fanming
（Grand Pharma＜China＞Co．，Ltd．，Wuhan，Hubei，China 430040）

R927.2；R972+.4

A

1006-4931(2017)18-0011-04

10．3969／j．issn．1006－4931．2017．18．004

2017－04－10)

王洪萍（1977－），女，大学本科，工程师、执业药师，主要从事药物制剂的研究和开发工作，（电话）027－83382760（电子信箱）362600512＠qq．com。