顶空进样气相色谱－质谱联用法分析天麻丸中挥发性成分

李海燕，郭 琪

（河南省食品药品检验所，河南 郑州 450003）

·实验研究·

顶空进样气相色谱－质谱联用法分析天麻丸中挥发性成分

李海燕，郭 琪

（河南省食品药品检验所，河南 郑州 450003）

目的 比较直接粉碎成细粉和挥发油测定法提取天麻丸中的挥发性成分的差异。方法 利用顶空进样气相色谱－质谱联用（GCMS）仪进行鉴定分析，GC－MS条件：HP－5MS石英毛细管柱（30 m×0.25 mm，0.25 m）；起始温度为40℃，保持1 min后以3℃ ／min的速率升温至195℃，并保持2 min，再以5℃ ／min的速率升温至240℃，保持6 min至完成分析；载气为氦气；柱流量为1.1 mL／min；分流比为10∶1；进样口温度为250℃；EI电离源能量为70 eV；离子源温度为230℃；扫描范围为 m／z 45～500。结果 在天麻丸粉末中检测出37种成分，鉴定出26种成分，占总挥发性成分的83.48%；在天麻丸挥发油中检测出32种成分，鉴定出21种成分，占总挥发性成分的87.25%。结论 采用直接粉碎成细粉和挥发油测定法提取得到的天麻丸中挥发性成分有较大差异，为进一步阐明该药的活性物质基础提供了实验数据。该方法为天麻丸气相色谱指纹图谱的研究及其质量控制提供了依据。

天麻丸；粉末；挥发油；挥发性成分；顶空进样；气相色谱－质谱联用法

天麻丸由天麻、羌活、独活、盐杜仲、牛膝、粉萆薢、附子（黑顺片）、当归、地黄、玄参等中药组方，具有祛风除湿、通络止痛、补益肝肾的功效，用于风湿瘀阻、肝肾不足所致的痹病，症见肢体拘挛、手足麻木、腰腿疼痛。天麻丸收载于2015年版《中国药典（一部）》[1]，原质量标准仅对少部分药物进行质量控制，而天麻丸处方中天麻、羌活、独活、粉萆薢[2]、杜仲、附子[3]、当归等药材均有挥发性成分，因此制订了采用气相色谱－质谱联用(GC－MS)仪测定天麻丸粉末及挥发油中挥发性成分的方法，以更好地控制其质量。采用顶空进样GC－MS对天麻丸粉末及挥发油总离子流图进行分析，对2种提取方法所得挥发性成分进行鉴定和比较。现报道如下。

1 仪器与试药

GCMS－QP 2010 Ultra型气质联用仪（日本岛津公司）；HP－5MS型石英毛细管柱（30 m×0.25 mm，0.25 μm）。天麻丸(河南省百泉制药有限公司，批号分别为141001，141002，141003）；试验所用试剂均为分析纯。

2 方法与结果

2.1 气相色谱条件

色谱柱：HP－5MS石英毛细管柱（30 m×0.25 mm，0.25 μm）；载气：高纯度氦气；柱流量：1.1 mL／min；分流比：10∶1；进样口温度：250℃；程序升温：初始温度40℃（1 min），以3℃ ／min的速率升至195℃，保持2 min，再以5℃／min的速率升至240℃，保持6 min。

2.2 质谱条件

电子轰击离子源：EI源；电离源能量：70 eV；离子源温度：230℃；四级杆温度：150℃；扫描范围：m／z 45～500。

2.3 溶液制备

表1 各化合物相对百分含量

取天麻丸适量，研细，精密称取0.5 g，置20 mL进样瓶中，密封，即得天麻丸粉末样品溶液。取天麻丸适量，研细，精密称取 40 g，置挥发油提取器中，加水250 mL。按2015年版《中国药典（四部）》通则2204“挥发油测定法”项下甲法提取挥发油，得到黄色油体约0.6 mL，得油率为1.5%（mL／g），取挥发油置25 mL容量瓶中，加正己烷稀释至刻度，精密量取2 mL，置20 mL进样瓶中，密封，即得天麻丸挥发油样品溶液[4－5]。

图1 天麻丸挥发性成分的总离子流图

2.4 测定方法

取2.3项下溶液顶空进样[6]，顶空瓶加热温度为70℃，保温时间为20 min，气体进样量1 mL，注入GC－MC。

2.5 TIC与百分含量

样品经GC－MS分析，总离子流图（TIC）见图1。谱图数据经NISTⅡ及NISTⅡS谱图库自动检索，与标准谱图对照、人工谱图解析等方法确认各化合物，采用面积归一化法确定各组分的相对百分含量，结果见表1。

3 讨论

本试验结果表明，天麻丸粉末顶空进样测定，共分离出37个峰，鉴定出26种成分，占挥发油相对含量的83.48%，鉴定的化合物主要有萜烯类、酯类、酰胺类等，相对含量较高的成分有2－蒎烯（20.09%）、左旋乙酸冰片酯（14.93%）、正己醛（8.19%）；天麻丸挥发油测定，共分离出32个峰，鉴定出21种成分，占挥发油相对含量的87.25%，鉴定的化合物主要有烷烃类、酮类、醛类等，相对含量较高的成分有甲基环己烷（33.04%）、环己酮（18.64%）和正己醛（9.89%）。当归挥发油中含有的花侧柏烯[7]，天麻、杜仲挥发油中的正庚醛[8－9]，羌活挥发油中的2－蒎烯、α－水芹烯[10]，独活挥发油中的糠醛[11]，均可在天麻丸粉末总离子流图或天麻丸挥发油总离子流图中显示出来。

本试验结果显示，两者共有成分5种，直接粉碎成细粉法特有成分21种，挥发油测定法特有成分16种。直接粉碎成细粉法提取的成分基本在30 min前出峰，而挥发油测定法提取的成分在 38 min时还有成分，30 min后的成分占挥发性成分总面积的6%。可见，挥发油测定法得到的挥发性成分极性较大，沸点较高。

[1]国家药典委员会.中华人民共和国药典（一部）[M].北京：中国医药科技出版社，2015：591－592.

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[4]颜巧蓉，唐宇航，刘文涵.精制狗皮膏挥发性成分的提取及其GC－MS分析[J].浙江化工，2011，42（9）：23－27.

[5]张 浩，张楠淇，张 旭，等.GC－MS法分析健胃愈疡胶囊中挥发性成分[J].中国现代中药，2015，17（8）：851－853.

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[11]贾淑云，王 斌.HS－GC－MS法测定绩独活中挥发性成分[J].安徽医药，2014，18（8）：1429－1433.

Analysis of Volatile Constituents from Tianma Pill by Headspace GC－MS

Li Haiyan，Guo Qi
（Henan Provincial Institute of Food and Drug Control，Zhengzhou，Henan，China 450003）

Objective To compare the differences of the volatile components of the Tianma Pill were extracted by direct pulverized into fine powder and steam distillation method.Methods The structures were analyzed and identified by headspace GC－MS.The GC－MS conditions were set as follows：HP－5MS quartz capillary column（30 m×0.25 mm，0.25 μm），the initial temperature was 40℃ and maintained for 1 min，the temperature was heating to 195℃ at a rate of 3℃ ／min and maintained for 2 min，then heating to 240℃at a rate of 5℃ ／min and maintained for 6 min until completion of analysis.The carrier gas was helium，the column flow rate was 1.1 mL／min，the split ratio was 10∶1，the inlet temperature was 250℃，the EI ionization source was 70 eV，the ion source temperature was 230℃，the scan range ofm／z 45－500.Results Totally 37 compounds were detected from Tianma Pill powder，among them，only 26 compounds were identified，which accounted for 83.48% of total volatile composition.Totally 32 compounds were detected from Tianma Pill volatile oil，among them，only 21 compounds were identified，which accounted for 87.25% of total volatile composition.Conclusion The type of constituents contained in the volatile oil extracted by direct pulverized into fine powder and steam distillation methods are totally different，and GC－MS can be used to identify the structures and relative content of volatile components，the results of this study can provide an experimental basis for development and utilization of Tianma Pill.The proposed method could provide useful information for the basic study on gas chromatography fingerprint and the quality evaluation of Tianma Pill.

Tianma Pill；powder；volatile oil；volatile components；headspace；GC－MS

R284.1

A

1006－4931(2017)16－0015－03

2017－04－10)

10.3969／j.issn.1006－4931.2017.16.005

李海燕（1978－），女，硕士研究生，副主任药师，研究方向为中药检验及质量标准，（电子信箱）kjlhy＠139.com。