TGF—β2、TGFβRⅡ联合检测对妊娠期糖尿病的评估意义

李桂艳　孟丽

【摘要】 目的 探究在妊娠期糖尿病孕妇体内转化生长因子β2（TGF-β2）、转化生长因子β受体Ⅱ （TGFβRⅡ）的表达情况并分析其临床意义。方法 78例妊娠期糖尿病孕妇作为观察组， 78例正常孕妇作为对照组， 对两组的TGF-β2、TGFβRⅡ的表达情况进行检测， 并进行组间比较。结果 观察组血清中的TGF-β2水平（384.72±35.94）pg/ml高于对照组的（161.63±21.90）pg/ml， 差异具有统计学意义（P<0.05）。观察组TGF-β2、TGFβRⅡ的mRNA水平均高于对照组， 差异均具有统计学意义（P<0.05）。观察组中TGF-β2、TGFβRⅡ的阳性率92.31%、87.18%均明显高于对照组的23.08%、20.51%， 差异均具有统计学意义（P<0.05）。结论 妊娠期糖尿病患者及正常孕妇的TGF-β2、TGFβRⅡ表达差异很大， TGF-β2、TGFβRⅡ联合检测对妊娠期糖尿病的诊断有很高的临床价值。

【关键词】 妊娠期糖尿病；转化生长因子β2；转化生长因子β受体Ⅱ

DOI：10.14163/j.cnki.11-5547/r.2017.21.057

妊娠期糖尿病是妊娠期妇女多见的一种疾病， 在我国的发病率高达80%， 严重威胁产妇和围生儿的生命安全[1]。孕妇在处于妊娠期时， 隐性糖尿病则会显性化， 使得无糖尿病既往史的孕妇引发妊娠期糖尿病。据报道， 患有妊娠期糖尿病的孕妇体内的TGF-β2、TGFβRⅡ水平会发生异常表达[2]。因此， 本研究通过联合检测TGF-β2、TGFβRⅡ在患有妊娠期糖尿病孕妇体内的表达而评价其临床意义， 详细报告如下。

1 资料与方法

1. 1 一般资料 选择2014年3月～2016年3月本院就诊的78例妊娠期糖尿病孕妇作为观察组， 均符合本院医学伦理委员会相关要求， 且患者知情， 年龄23～35 岁， 平均年龄（27.54±2.84）岁；孕周35～39周， 平均孕周（37.04±2.03）周。

选取同期来本院体检的正常孕妇78例作为对照组， 年龄25～34 岁， 平均年龄（26.89±2.73）岁；孕周35～40周， 平均孕周（37.24±2.04）周。两组年龄、孕周等一般资料比较差异无统计学意义（P>0.05）， 具有可比性。

1. 2 试剂与方法

1. 2. 1 试剂 研究所用试剂均从R&D Systems 公司购买。

1. 2. 2 标本收集 两组研究对象在早晨空腹时， 抽取1.8 ml静脉血， 装入试管中， 混匀， 静置30 min后， 离心15 min， 分离血清待用， 贮存于-20℃。在剖宫产术中过程中， 切下一块胎盘组织， 冲洗干净， 待用。

1. 2. 3 酶联免疫吸附试验（ELISA）法 使用贮存的血清检测TGF-β2水平。

1. 2. 4 实时荧光定量聚合酶链式反应（Real-time PCR）方法 提取RNA， 检验合格后， 进行实验， 以甘油醛-3-磷酸脱氢酶（GAPDH）为内参， 每个样品设置3个复孔， 经检测后， 并计算mRNA的相对表达情况。

1. 2. 5 免疫组化方法[3] 经常规方法处理组织， 石蜡包埋连续切片， 用免疫组化方法进行TGF-β2、TGFβRⅡ染色， 使用AEC显色， 用苏木素进行复染。其中阴性对照为PBS 缓冲液， 阳性对照为已经确诊的妊娠期糖尿病。

1. 3 观察指标及判定标准 比较两组血清TGF-β2水平及TGF-β2、TGFβRⅡ的mRNA水平。观察两组TGF-β2、TGFβRⅡ的表达情况， 用显微镜观察所有切片， 其中阳性细胞的细胞膜、细胞质、细胞核呈现为淡黄色至棕色；按照阳性细胞的比例及染色程度分为以下三类， （-）：细胞无染色；（+）：阳性细胞的数量<50%， 细胞呈浅黄色， 稀少；（++）：阳性细胞的数量>50%， 细胞呈黄色， 密集。

1. 4 统计学方法 应用SPSS17.0统计学软件处理数据。计量资料以均数±标准差（ x-±s）表示， 采用t检验；计数资料以率（%）表示， 采用χ2检验。P<0.05表示差异具有统计学意义。

2 结果

2. 1 两组血清中的TGF-β2水平比较 观察组血清中的TGF-β2水平（384.72±35.94）pg/ml高于对照组的（161.63±

21.90）pg/ml， 差异具有统计学意义（P<0.05）。

2. 2 两组TGF-β2、TGFβRⅡ的mRNA水平比较 观察组TGF-β2、TGFβRⅡ的mRNA水平均高于对照组， 差异均具有统计学意义（P<0.05）。见表1。

2. 3 两组TGF-β2、TGFβRⅡ的表达情况比较 观察组中TGF-β2、TGFβRⅡ的阳性率92.31%、87.18%均明显高于对照组的23.08%、20.51%， 差异均具有统计学意义（P<0.05）。见表2。

3 讨论

妊娠期糖尿病会因糖尿病的病情以及控制血糖的水平而对母体和围生儿有不同程度的影响。血糖过高会影响胚胎的正常发育， 流产率超过15%[4-7]。若控制不好血糖， 孕妇感染的发生率明显提高， 进而加重糖代谢紊乱， 还可能引起酮症酸中毒等。妊娠期糖尿病会使胎儿发育过大， 导致难产， 损伤产妇产道， 增加剖宫产几率[4， 8-10]。因此， 寻找便捷、有效、快速的确诊方法是至关重要的。

正常孕妇体内， 细胞因子处于平衡状态， 有利于孕妇正常妊娠。而TGF-β2是一种促炎因子， 并通过其受体 TGFβRⅡ发挥促炎作用[5]。在正常孕妇体内， TGF-β2、TGFβRⅡ的表达量比非孕妇高， 而患有妊娠期糖尿病孕妇体内表达更多。本研究中， ELISA实验结果显示， 观察组TGF-β2水平高于对照组， 差异具有统计学意义（P<0.05）。Real-time PCR实验结果显示， 观察组TGF-β2、TGFβRⅡ的mRNA水平均高于对照组， 差异均具有统计学意义（P<0.05）。免疫组化结果表明， 观察组中TGF-β2及TGFβRⅡ的阳性率均明显高于对照组， 差异均具有统计学意义（P<0.05）。

综上所述， 妊娠期糖尿病患者及正常孕妇的TGF-β2、TGFβRⅡ表达差异很大， TGF-β2、TGFβRⅡ联合检测对妊娠期糖尿病的诊断有很高的临床价值。

参考文献

[1] 杨秀华， 郭峰. TGF-β2、TGFβRⅡ在妊娠期糖尿病的表达. 现代妇产科进展， 2017， 26（1）：23-25.

[2] 杨秀华， 郭峰， 任丽娜， 等. TGF-β2和TGFβRⅡ在外阴鳞癌中的表达及意义. 现代生物医学进展， 2016， 16（19）：3751-3754.

[3] 雷开容. RBP4与TGF-β1在妊娠糖尿病患者血清中表達相关性研究. 重庆医学， 2015（7）：967-968.

[4] 李智慧， 黄凤霞. 血清胱抑素C、β2-微球蛋白联合检测在妊娠期糖尿病早期肾损害中的诊断意义. 临床医学工程， 2016， 23（4）：463-464.

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[6] 杨慧霞. 2011年妊娠期糖尿病国际诊断标准解读. 中国医学前沿杂志（电子版）， 2011， 3（4）：19-20.

[7] 杨慧霞. 妊娠期糖尿病的筛查与诊断. 中华围产医学杂志， 2005， 8（5）：316-317.

[8] 魏玉梅， 杨慧霞. 妊娠期糖尿病不同诊断标准适宜性的比较. 中华妇产科杂志， 2011， 46（8）：578-581.

[9] 王美记， 牛健民， 温济英， 等. 妊娠期糖尿病的孕期管理对妊娠结局的影响. 广东医学， 2009， 30（6）：900-901.

[10] 杨慧霞. 重视妊娠期糖尿病国际新标准的临床应用. 国际妇产科学杂志， 2011， 38（3）：172-173.

[收稿日期：2017-05-26]endprint