超高效液相色谱串联质谱法测定鸡肉中噻节因残留

田 海，冯玉洁，张艳玲，王明月，李 琼，罗金辉

（1.中国热带农业科学院 分析测试中心/海南省热带果蔬产品质量安全重点实验室，海口 571101；2.海南省农业科学院 植物保护研究所，海口 571101）

◆环境与残留◆

超高效液相色谱串联质谱法测定鸡肉中噻节因残留

田 海1，冯玉洁2，张艳玲1，王明月1，李 琼1，罗金辉1

（1.中国热带农业科学院 分析测试中心/海南省热带果蔬产品质量安全重点实验室，海口 571101；2.海南省农业科学院 植物保护研究所，海口 571101）

建立鸡肉中噻节因的超高效液相色谱串联质谱（UPLC-MS/MS）残留测定方法。鸡肉样品选用乙腈提取，采用UPLC-MS/MS多反应模式（MRM）进行分析测定。噻节因添加质量在0.2～10 μg范围内，方法平均回收率为87.6%～101.6%，相对标准偏差为2.44%～5.90%。方法的最小检出量为0.005 mg/L，最低检测浓度为0.01 mg/kg。该方法简单、准确，重复性较好，适用于禽蛋中噻节因的残留检测。

噻节因；鸡肉；超高效液相色谱串联质谱；残留；检测

噻节因（dimethipin），化学名称2,3-二氢-5,6-二甲基-1,4-二噻因-1,1,4,4-四氧化物，分子式C6H10O4S2，相对分子质量210.3，ADI值为0.02 mg/kg（JMPR，2014）。噻节因属于植物生长调节剂，可使玉米、苗木、橡胶树和葡萄落叶，促进植物成熟并能降低收获后水稻和向日葵种子的含水量。施用后，其能够抑制植物蛋白质合成，对蛋白质合成的抑制作用比放线菌酮的活性高10倍。噻节因加速植株自然衰老过程，而不是诱导衰老[1]。

噻节因具有中等毒性，长期使用可能会对生态和食品安全产生较大风险[2]。美国环保署（EPA）将噻节因归为可能的人类致癌物[3]；目前欧盟禁止噻节因在农作物上使用。国际食品法典委员会（CAC）、美国、日本等国家或组织制定了食品中噻节因的最大残留限量（MRLs）[4]。其中，CAC规定鸡肉中噻节因的最大残留限量为0.01 mg/kg。我国食品安全国家标准（GB 2763—2014）也制定了噻节因在马铃薯、葵花籽、棉籽油等农产品中的最大残留限量，鸡肉中噻节因最大残留限量值正在制定中。

关于噻节因的检测方法，目前主要有气相色谱法、气质联用法、液质联用法等[2,5-9]。本研究采用超高效液相色谱串联质谱法检测鸡肉中噻节因残留，方法具有操作简便、快捷，灵敏度、准确度和精密度高的特点，可用于食品安全、环境监测等领域。本研究可为农产品质量安全监测及评价提供支持。

1 材料与方法

1.1 仪器与试剂

超高效液相色谱仪（Acquity H-CLASS），美国Waters公司；质谱系统（API 4000），美国AB SCIEX公司；Acquity UPLC BEH C18色谱柱（50 mm×2.1 mm，1.7 μm），美国Waters公司；高速离心机（Anke GL-10C），上海安亭科学仪器厂；XW-80旋涡混合器，美国Scientific Industries公司；Milli-Q超纯水机，德国Millipore公司。

噻节因标准品（99.0%），德国Dr.Ehrenstorfer公司；甲醇、乙腈（色谱纯），美国Fisher公司；水为超纯水。

1.3 前处理方法

称取鸡肉样品20 g于100 mL离心管中，加入乙腈40 mL，摇匀后振荡提取30 min，5 000 r/min离心5 min，转移上清液至装有5 g氯化钠的离心管中，剧烈振荡2 min后静置30 min，取有机相20 mL旋转蒸发近干，用甲醇＋水（体积比3∶2）定容至2 mL，过0.22 μm滤膜，进行UPLC-MS/MS分析。

1.4 色谱条件

色谱柱：Acquity UPLC BEH C18色谱柱（50 mm×2.1 mm，1.7 μm）；柱温：35℃；流动相：乙腈＋5 mmol乙酸铵水溶液，梯度洗脱（见表1）；流速：0.15 mL/min；进样量：10.0 μL。

表1 梯度洗脱表

1.2 基质标样溶液的配制

称取适量噻节因标准品用甲醇溶解配制成母液，移取适量母液至容量瓶，氮气吹干，用空白样品提取液定容成质量浓度分别为0.005,0.01,0.05, 0.1,0.5 mg/L系列标样溶液，混匀后放入4℃冰箱保存备用。

1.5 质谱条件

离子源：电喷雾离子源ESI；扫描方式：负离子源；检测方式：多重反应监测（MRM）；碰撞气：0.04 MPa；气帘气：0.137 MPa；雾化器Gas 1：0.345 MPa；雾化器Gas 2：0.345 MPa；离子喷雾电压：-4 500 V；离子源温度：600℃。噻节因母离子（m/z）209、子离子（m/z）91（定量离子）、子离子（m/z）161（定性离子），碰撞能量分别为14.34 V、28.91 V、22.83 V，锥孔电压为66.80V。噻节因保留时间为1.74min，色谱图见图1。

图1 标准品、CK样品、样品添加色谱图

2 结果与分析

2.1 噻节因标准曲线

在质量浓度为0.005～0.5 mg/L范围内，采用上述色谱操作条件，对1.2中配制的系列标样溶液进行测定，并以噻节因标样溶液质量浓度为横坐标，峰面积为纵坐标作标准曲线。噻节因线性方程为y=4.77×105x-2.66×103，相关系数（R2）为0.999 9。

2.2 回收率、精密度与检出限

在空白样品中分别加入0.2 μg、1.0 μg、10.0 μg噻节因标准品，每个添加浓度重复测定5次取平均值，得到噻节因的添加回收率、最小检出量（LOD）、最低检测浓度（LOQ）、相对标准偏差（RSD）值，见表2。

表2 噻节因在鸡肉中的添加回收率、相对标准偏差

3 结论

本文研究建立了鸡肉中噻节因残留的UPLCMS/MS方法。噻节因在鸡肉中的平均回收率为87.6%～101.6%，相对标准偏差为2.44%～5.90%，LOD值为0.005 mg/L，LOQ值为0.01 mg/kg。研究结果表明，方法的灵敏度、准确度、精密度均能满足农药残留分析要求，该方法杂质干扰小，有良好的线性，可广泛用于禽蛋中噻节因的残留检测。

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[4]周宏琛,朱涛,王勇,等.“日本肯定列表制度”农药残留新标准对我国农产品出口的影响[J].现代食品科技,2006,22(4):197.

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[9]董静,潘玉香,秦亚萍,等.程序升温大体积进样气相色谱-负化学离子源质谱法测定白菜和苹果中103种农药残留 [J].色谱, 2010,28(7):1186-1195.

（责任编辑：顾林玲）

Determination of Dimethipin Residues in Chicken by Ultra-High Performance Liquid Chromatography-Tandem Mass Spectrometry

TIAN Hai1,FENG Yu-jie2,ZHANG Yan-ling1,WANG Ming-yue1,LI Qiong1,LUO Jin-hui1
(1.Analysis and Test Center,Chinese Academy of Tropical Agricultural Sciences/Hainan Provincial Key Laboratory of Quality and Safety for Tropical Fruits and Vegetables,Haikou 571101,China;2.Institute of Plant Protection,Hainan Academy of Agricultural Science,Haikou 571101,China）

A method for determination of dimethipin residues in chicken by ultra-high performance liquid chromatography-tandem mass spectrometry (UPLC-MS/MS)was established.The chicken samples were extracted by acetonitrile,then analyzed by UPLC-MS/MS under the multiple reaction monitoring(MRM)mode.The average recoveries ranged from 87.6%to 101.6%with the relative standard deviations(RSD)of 2.44%-5.90%when the fortified concentrations were 0.2-10 μg.The limit of detection was 0.005 mg/L,and the limit of quantification was 0.01 mg/kg.This method was simple,accurate,and was suitable for determination of dimethipin residues in chicken samples．

dimethipin;chicken;UPLC-MS/MS;residue;determination

TQ 450.2＋63

A

10.3969/j.issn.1671-5284.2017.04.012

2017-04-18

田海（1986—），男，助理研究员。研究方向：农药残留与农产品质量安全。E-mail：tianhai666@163.com