乳与乳制品中三聚氰胺的快速检测-高效液相色谱法

□ 王新喜 北京和瑞祥通检测技术有限公司

乳与乳制品中三聚氰胺的快速检测-高效液相色谱法

□ 王新喜 北京和瑞祥通检测技术有限公司

通过测定高效液相色谱检在牛奶中三聚氰胺的残留量。目前为止，三聚氰胺已作为蛋白质添加在食品中。但是根据相关规定，三聚氰胺为非食品添加剂。本文根据三聚氰胺的概述、三聚氰胺的检测现状以及三聚氰胺的检测 分析结果有效认识三聚氰胺。

三聚氰胺；高效液相色谱检测；检测

由于三聚氰胺在食品中的添加引发了大规模的食品事件。三聚氰胺严重超出蛋白质含量。因为，三聚氰胺属于化工原料，无色无味[1-3]。如果过多摄入三聚氰胺的使用量会导致婴儿死亡。所以，加强对三聚氰胺的快速检测是必要的。

1 三聚氰胺的概述

1.1 三聚氰胺的实验原理

用乙腈作乳与乳制品中的蛋白沉淀剂和三聚氰胺的提取剂，用强阳离子交换色谱柱分离，高效液相色谱仪-DAD检测，外标法定量。复色光通过样品池被组分选择性吸收照射在二极管阵列装置上。

1.2 三聚氰胺在食品中的检测现状

我国在蛋白质、细菌和脂肪等检测检验标准有明确规定，目前三聚氰胺不允许添加到食品中。三聚氰胺的检测方法有三聚氰胺HPLC-UV定量方法、HPLC-MS检测方法等。

2 材料与方法

2.1 仪器与试剂

仪器：液相色谱仪；二极管阵列检测器（DAD）；分析天平（感量0.001 g）。

试剂：乙腈（色谱纯）；氨水（分析纯）；三氯乙酸（分析纯）；5%氨水甲醇溶液（取5.0 mL氨水 用水定容至100 mL）；75%乙腈水溶液（取75 mL用水定容至100 mL）；1%三氯乙酸溶液（取10 g三氯乙酸溶在1 L水中）。

2.2 三聚氰胺的提取与净化

（1）提取。根据提前储存在冰箱中的牛奶，在实验之前必须在恒温条件下，称取样品5 g（精确到0.01 g）放入50 mL的离心管中，等待检测；在样品中放入1%三氯乙酸溶液15.0 mL，乙腈5 mL，震荡摇匀25 min，8 000 r/min的速度离心5 min，取上清液。

（2）净化。MCX混合型阳离子交换固相取柱在装置上，使用甲醇3.0 mL和超纯水活化后，添加样品提取液5.0 mL；按照顺序依次使用3.0 mL甲醇和0.1 mol/L盐酸水溶液3.0 mL，3.0 mL 5%氨水甲醇溶液洗脱收集。使用氮气吹干后；流动相定容，高效液相色谱分析。

（3）液相色谱条件。流动相：磷酸盐缓冲液+乙腈=80+20；流速：1.0 mL/min；柱温：35 ℃；进样量：20 μL。

2.3 测量方法与含量计算

通过保留时间定性（光谱图辅助定性），外标法峰面积定量。根据表1、图1和图2结合实际探究结果如下。

计算公式。以三聚氰胺的含量为质量，数值以mg/kg表示。

表1 不同浓度三聚氰胺标准浓液与峰面积表

图1 样品色谱图

图2 三聚氰胺的光谱图

表2 样品添加回收率表

式中：C——工作液中的浓度；

V——溶解后的体积；

m——称样量；

F——稀释倍数。

通过三聚氰胺的光谱图和样品色谱图，不能明显看出DAD检测器的优势。通过样品回收率以及标准曲线图具体分析。样品添加回收率见表2。

2.4 实验结果分析

根据三聚氰胺的标准曲线图得知：在0.0～50 mg/L线性关系良好。具有良好精密度和准确度，样品处理简单，快速，适合实验室大批量检测。与其他检测器相比，DAD检测器具有噪音低、灵敏度高，可以得到任意波长的色谱图，效果极为方便。而UV检测器只是对特定波长做检查，结果出来是特定波长下的吸收，在定性上不如DAD有优势。

3 结论

三聚氰胺是我国最大的尿素生产能源，这种含有大量的化工原料是严重禁止在食品、乳制品之中使用。长时间摄取能给造成很大的伤害。综上所述：通过对三聚氰胺的认知，明确三聚氰胺的使用范围，希望能够引起人们的足够重视,加强检测。希望相关部门能够合理地处理三聚氰胺带来的危害。

[1]黄儒添,廖少平,叶小玲.牛奶中三聚氰胺残留量的高效液相色谱检测分析[J].中国医药指南,2014(5): 58-59.

[2]韩冰.高效液相色谱法检测牛奶中三聚氰胺残留量的方法研究[J].中兽医医药杂志,2009,28(1):49-51.

[3]程海燕,王辉,曹晓燕.牛奶中三聚氰胺残留量的高效液相色谱检测[J].食品安全导刊,2017(9):143-145.