新生儿败血症病原学及耐药性情况分析

泰淑红，王鹏，邵艳，贾莉婷

(郑州大学第三附属医院/河南省妇幼保健院检验科，河南郑州450052)

新生儿败血症病原学及耐药性情况分析

泰淑红，王鹏，邵艳，贾莉婷

(郑州大学第三附属医院/河南省妇幼保健院检验科，河南郑州450052)

目的了解新生儿败血症病原学及细菌耐药状况，为临床合理用药提供依据。方法收集本院2014年1月-2016年6月血培养阳性的败血症病例258例，对其分离的菌株进行鉴定和体外药敏分析。结果258例血培养阳性标本中，检出革兰阳性菌152例（占58.91%），其中以凝固酶阴性葡萄球菌（CNS）为主；革兰阴性菌85例（占32.95%），其中以大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌为主；真菌21例（占8.14%），其中以白念珠菌为主。革兰阳性菌中检出的凝固酶阴性葡萄球菌、金黄色葡萄球菌对青霉素、苯唑西林、大环内酯类耐药率大于等于75%，对万古霉素、利奈唑胺、替考拉宁均敏感。革兰阴性菌中大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌对氨苄西林普遍耐药，对头孢菌素类抗生素耐药率高于30%，对氨基糖甙类、喹诺酮类及碳青霉烯类抗生素有较高的敏感性；白念珠菌对氟康唑的耐药率为8.33%，光滑念珠菌对氟康唑普遍耐药。结论CNS、大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌为新生儿败血症的常见病原菌，且对常见抗生素耐药率较高，临床医师应合理应用抗生素，以提高临床治疗效果。

新生儿；败血症；耐药性；病原菌

新生儿败血症是新生儿期病原菌侵入血循环并在其中生长、繁殖、产生毒素而造成全身性的炎症反应。由于新生儿免疫系统尚未成熟，发生感染后很难局限，病死率较高[1]。明确新生儿败血症的病原菌及其药敏有助于临床及时、合理的选用抗菌药物，能有效的降低死亡率。本文通过回顾性地分析血培养阳性败血症患儿的病原菌分布及耐药情况，旨在为临床用药提供参考依据。

1 资料与方法

1.1 标本来源收集2014年1月-2016年6月本院新生儿科血培养阳性的败血症患儿258例，所有患儿均符合新生儿败血症诊断标准[2]，对其菌株分布及耐药性进行分析。

1.2 仪器与试剂采用法国梅里埃生物有限公司BACT/ALERT3D全自动血培养仪及配套专用血培养瓶；所有菌株采用DL-96细菌测定分析系统（珠海迪尔生物工程有限公司）进行鉴定及药敏；血琼脂平板、巧克力琼脂平板购于郑州安图生物有限公司。

1.3 方法

1.3.1 血培养患儿均在入院后使用抗生素前，无菌操作下经静脉采集血标本1~3ml，注入儿童血培养瓶中，放入全自动血培养仪进行需氧培养，按操作程序直接上机培养监测。

1.3.2 菌种鉴定及药敏将阳性瓶分别转种于血琼脂平板，巧克力琼脂平板，放入隔水式二氧化碳恒温培养箱培养24~48h后分离纯菌，经革兰染色镜检后，选择相应的DL-96试剂板。取纯培养单个菌落于稀释液瓶内研磨成菌悬液，均匀滴于试剂板小孔内，然后将试剂板放入35~37℃的温箱孵育18~24h，最后将试剂板放入DL-96细菌测定分析系统，判读菌种种属及抗菌药物MIC结果。药敏结果判断参照CLSI 2013标准判读[3]。

1.4 统计学处理采用WHONET5.5软件进行抗菌药敏结分析。

2 结果

2.1 新生儿败血症病原菌分布及构成比258例血培养阳性标本中，分离出革兰阳性菌152例（58.91%），革兰阴性菌85例（32.95%），真菌21例（8.14%）。菌种分布及构成比详见表1。

2.2 新生儿败血症常见革兰阳性球菌耐药率见表2。

2.3 新生儿败血症常见革兰阴性杆菌耐药率见表3。

2.4 新生儿败血症真菌耐药率白念珠菌对氟康唑的耐药率为8.33%，6例光滑念珠菌对氟康唑全部耐药。

表1 258例新生儿败血症病原菌分布与构成比

3 讨论

血培养是临床诊断败血症的金标准，阳性结果对明确诊断、目标性治疗有极高的应用价值，但假阳性的问题一直也是微生物学诊断的难点。有资料显示，血培养中分离凝固酶阴性葡萄球菌（CNS）被认为污染的比例可高达44.1%[4]，CNS是污染菌还是致病菌需要临床结合患者的临床症状及其他指标综合进行评估。本研究发现，新生儿血培养病原菌中CNS为主要分离病原菌，占42.25%（109/258），这与国内的大多数报道相一致[5，6]，认为它是新生儿晚发型败血症的主要病原菌之一[7-10]，可能与机械通气、侵入性操作，静脉导管插管等各种介入性诊治手段的应用有关[11]，CNS可产生粘附素滞留在一次性注射器、输液器等物体上，患儿静脉营养或气管插管、窒息、住院时间长等因素均易引起CNS感染，因此需要临床加强对各种导管、器械及医护人员手的消毒，严格无菌操作，避免交叉感染，防范CNS院内感染的发生。通过苯唑西林对CNS耐药率（82.57%），可以显示耐甲氧西林的葡萄球菌在感染中占很高的比例，耐甲氧西林菌对青霉素类、头孢类、碳青霉烯类均耐药，应该引起临床的高度重视。

本组数据中无乳链球菌（GBS）6株，占2.33%（6/258），检出率与国内相关报道相近[12]，然而美国调查数据显示早发型新生儿败血症中GBS引起的感染占到38%-43%[13]，远高于国内，可能与国内对该病认识不足及检测手段局限有关，也可能与菌株分布的地区差异有关。分离到GBS的6例患儿中，有5例的母亲阴道分泌物也分离到GBS，故患儿可能通过母婴垂直传播获得。GBS常定植于妊娠妇女的下消化道和泌尿生殖道，可导致围产期孕妇的严重感染，也是引起新生儿感染性疾病的主要细菌性病原菌[14]，因此积极开展孕期GBS普遍筛查和分娩时静脉给予抗生素预防性用药具有重要的意义，研究表明该预防策略可显著降低新生儿感染GBS的发病率[15]。另外分离到产单核李斯特菌5株，均为宫内感染，病死率高，该菌对头孢类抗菌药物天然耐药，因此临床对于重症患者选择抗生素用药时应该覆盖此菌。

本研究显示革兰阴性杆菌中以大肠埃希氏菌和肺炎克雷伯菌为主，真菌以白念珠菌为主，与边兴艳等[5]曹慧春等[6]文献报道一致。大肠埃希氏菌、肺炎克雷伯菌对哌拉西林/他唑巴坦、头孢西丁耐药率均在30%~50%，对三代、四代头孢菌素的耐药率均在50%~75%，均不适合作为临床经验性治疗的首选药物，碳青霉烯类抗菌药物抗菌作用强、抗菌谱广，可作为重症败血症患者的首选。本研究中检出耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌，提示本地区可能存在碳青霉烯酶，应做好感控，防范感染的播散。

综上所述，引起新生儿败血症的病原菌主要为革兰阳性球菌，尤其以CNS为主要病原菌，革兰阴性菌中以大肠埃希菌较常见，耐药情况均较严峻。掌握本地区病原菌的分布和药敏数据，对临床经验性治疗和合理使用抗菌药物具有重要的价值。

表2 新生儿败血症常见革兰阳性球菌对15种抗菌药物的耐药率（%）

表3 新生儿败血症主要革兰阴性杆菌对19种抗菌药物的耐药率（%）

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Drug Resistance Analysis and Distribution Characteristics of Pathogens in Neonatal Septicemia

TAI Shuhong，WANG Peng，SHAO Yan，JIA Liting.Department of Laboratory Medicine，the Third Affiliated Hospital of Zhengzhou University，Zhengzhou 450052，China.

Objective To investigate distribution characteristics and antibiotic resistance of pathogens in neonatal septicemia provides the basis for clinical treatment.Methods The 258 cases of blood culture and drug susceptibility test for neonates diagnosed with septicemia from Jan 2014 to June 2016 were retrospectively analyzed，and the isolated strains were identified and their resistance to antibiotics were tested.Result A total of 258 strains were detected in culture-positive blood samples，with a result of 152 Gram-positive strains(58.91%)，85Gram-negative strains(32.95%)，and 21 strains of fungi(8.14%).The most common pathogens of Gram-negative strains，Gram-positive strains and fungi were Coagulase-negative Staphylococcus，Escherichia coli and Klebsiella pneumonia，and Candida albicans，respectively.Coagulase-negative Staphylococcus and Staphylococcus aureus demonstrated strong resistance to penicillin，oxacillin and macrolides was greater than or equal to 75%，while they were sensitive to vancomycin，linezolid and teicoplanin completely.The resistance rate of Gram-negative Escherichia coli and Klebsiella pneumonia to ampicillin and cephalosporins were respectively 100%and more than 30%，and their susceptibility to aminoglycosides，quinolones and carbapenems was evident.Candida albicans bore a low resistance to fluconazole(8.33%).Conclusion Coagulase-negative staphylococci，Escherichia coli and Klebsiella pneumonia were common pathogens causing neonatal septicemia in our hospital，and their resistance to common antibiotics condition were high and serious.It is reminded that the clinical use of antibiotics should be reasonably used to improve clinical efficacy.

∶Neonate；Septicemia；Pathogen；Antibiotic resistance

R446.5，Q939.92，R722.13+1

A

1674-1129(2017)04-0461-03

10.3969/j.issn.1674-1129.2017.04.003

2016-12-15；

2017-02-19)

河南省科技厅重点科研团队项目资助（编号：B20140269）

泰淑红，女，1982年生，硕士研究生，主管技师，主要从事临床微生物检验工作。Email：taishuhong@163.com。

贾莉婷，女，1957年生，主任技师，Email：jialt@163.com。