解毒祛痰浓缩丸中丹皮酚含量测定

马敏怡，王建军，张文兵

（新疆兵团第六师奇台医院，新疆 昌吉 831800）

解毒祛痰浓缩丸中丹皮酚含量测定

马敏怡，王建军，张文兵

（新疆兵团第六师奇台医院，新疆 昌吉 831800）

目的 建立HPLC法测定解毒祛痰浓缩丸中丹皮酚的方法。方法 采用高效液相色谱法测定制剂中的丹皮酚的含量。结果 丹皮酚在9.52～152.32 μg/mL范围内呈良好的线性关系。结论 该方法操作简便、灵敏度高、专属性强，适用于解毒祛痰浓缩丸中丹皮酚含量测定。

解毒祛痰浓缩丸；丹皮酚含量测定

解毒祛痰平艾方临床用于治疗获得性免疫缺陷综合征毒感染属热毒内蕴，痰热郁肺证候的患者。丹皮酚为牡丹皮的主要有效成分，可以提高机体免疫力且无明显副作用等作用[1]。

1 试验材料

1.1 仪器

Waters2489高效液相色谱仪；电子天平0.01 mg（规格：AG-135厂家：瑞士）；超纯水仪（规格：Direct-QTM5厂家：MilliPore）；离心机（规格：KDC-40厂家：ΜSTC CHMANGXIN CO.，LTD）。

1.2 试剂与样品

丹皮酚对照品（生产批号：110708-200506，供含量测定用）；乙腈、甲醇为色谱纯；甲醇、无水乙醇、甲酸、冰醋酸、为分析纯。

2 方法与结果

2.1 色谱条件

色谱柱SYMMETRY C18，流动相甲醇-1%冰醋酸（55:45），柱温30℃，进样量10 μL，流速1.0 mL/min，检测波长为274 nm。

2.2 丹皮酚对照品溶液的制备

于25 mL容量瓶中精密称取丹皮酚的对照品7.0 mg，加甲醇至容量瓶刻度处，制成1 mL含0.28 mg的溶液，作为储备液，精密吸取上述储备液17 mL，置25 mL容量瓶中1.904，加甲醇至刻度，制成1 mL含0.1904 mg的溶液，即得。

2.3 供试品溶液的制备

精密称取本品细粉1g，置于50 mL锥形瓶中，加入60%甲醇10 mL，超声20 min，放冷，用60%甲醇补足减失重量，滤过。滤液用0.45 μm的微孔滤膜过滤，取续滤液，即得。

结果表明，丹皮酚与相邻色谱峰的分离度大于1.5，以丹皮酚的峰面积计算，其理论塔板数符合要求，且保留时间适中。丹皮酚对照品和供试品的色谱图见图1-2。

图1 对照品HPLC图

图2 供试品HPLC图

2.4 阴性对照溶液的制备

按解毒祛痰浓缩丸处方量，精密称取除牡丹皮以外的其余，制成阴性样品。称取阴性样品细粉1.0g，制成阴性对照溶液，结果示阴性无干扰，牡丹皮阴性对照品色谱图见图3。

图3 阴性对照品HPLC图

2.5 丹皮酚线性范围的考察

分别精密吸取“2.2”项下丹皮酚对照品溶液0.25 mL、0.5 mL、1.0 mL、2.0 mL、4.0 mL，置于5 mL容量瓶中，甲醇定容，用微孔滤膜过滤后，分别取10μL注入高效液相色谱仪，记录丹皮酚峰面积，以丹皮酚浓度（C）对其峰面积值（A）进行回归，得标准曲线方程：A=45730592 C-37441；r=0.9998。以上结果表明：在9.52～152.32 μg/mL范围内，丹皮酚峰面积值（A）与浓度（C）线性关系良好的。

2.6 精密度考察

称取供试品1份，按“2.3”制备供试品溶液1份，连续进样6次，记录丹皮酚的峰面积，结果示丹皮酚峰面积的RSD值为1.59%，表明本实验所使用的仪器有良好的精密度。

2.7 稳定性考察

精密吸取供试品溶液1份，分别在0、8、16、36、72 h进样，逐一记录各自的峰面积，结果示丹皮酚峰面积的RSD值为0.47%，表明供试品在48 h内稳定性佳。

2.8 牡丹皮加样回收率试验

取已知丹皮酚含量的供试品溶液，分别精密加入适量的丹皮酚的对照品，进行含量测定，计算回收率。结果示丹皮酚加样回收率为95.52%，RSD为0.22%，表明分析方法准确。

3 讨 论

采用HPLC法测定丹皮酚的相关报道较多，所以，本试验先根据《中国药典》2010年版一部牡丹皮项下的HPLC条件进行试验，以甲醇-水（45:55）为流动相，检测波长为274 nm，但在此流动相下，峰形不对称，有拖尾，分离度不理想，出峰时间较长。因此，本文参考文献报道[2]，并结合本制剂处方的特点，经反复实验探索，结果表明，以甲醇一1%冰醋酸（55:45）作为流动相，各组分的峰形和分离度均很好，阴性干扰，积分准确，精密度高，目标峰出峰时间合适，经方法学考察各项指标均符合含量测定的要求。

本文通过高效液相色谱法对解毒祛痰浓缩丸中丹皮酚的含量进行测定，结果表明该方法操作简便、灵敏度高、专属性强。

[1] Kitagawa I,Yoshikawa M, Tani T. Stμdies on Moμtan Cor2tex(Ò) on the chemicalcomstitμents.Shoyakμgakμ zasshi,1979,21:147-150.

[2] 冯传平.HPLC法测定桂枝茯苓丸中桂皮酸、桂皮醛及丹皮酚的含量[J].中医药导报,2009,15(3):76-78.

本文编辑：王雨辰

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ISSN.2095-8242.2017.32.6150.02