中华绒螯蟹家系规模化构建初探

邓燕飞，夏爱军，潘建林，李跃华，柏如发，朱清顺

（1.江苏省淡水水产研究所，江苏 南京 210017；2.江苏省农业种质资源保护与利用平台，江苏 南京 210014）

中华绒螯蟹家系规模化构建初探

邓燕飞1，2，夏爱军1，潘建林1，李跃华1，柏如发1，朱清顺1

（1.江苏省淡水水产研究所，江苏 南京 210017；2.江苏省农业种质资源保护与利用平台，江苏 南京 210014）

从中华绒螯蟹苏南养殖群体、长江干流野生群体和苏北里下河养殖群体中选择100组大规格亲蟹（雌蟹175 g以上，雄蟹250 g以上），进行家系规模化构建，成功定向构建家系169个，其中全同胞家系25个，半同胞家系144个，家系构建成功率84.5%，选择40个发育良好的家系进行育苗，最终获得23个家系蟹苗。

中华绒螯蟹；大规格；家系规模化构建

中华绒螯蟹俗称河蟹，目前河蟹产业年产值已超500亿，已成为我国重要的水产支柱产业[1]。河蟹种质混杂和退化严重已是不争的事实[2-3]，积极开展河蟹遗传育种工作，选育出优质高产抗逆性强的新品种，实现保护优质种质资源和满足生产上的良种需要，以确保我国河蟹产业可持续发展[4-7]。家系选育是一种有效的遗传育种手段，目前已成功运用于中国对虾、罗氏沼虾等甲壳动物新品种选育[8-9]，长江水系、辽河水系河蟹已开展家系选育[10-14]，笔者基于2008年成功突破长江水系大规格河蟹家系土池定向构建，2012年分别选择来源不同的长江水系河蟹，探索大规格河蟹的家系规模化构建，至2013年2月26日，总计成功定向构建家系169个，其中全同胞家系25个，半同胞家系144个，家系构建成功率84.5%，选择其中40个胚胎发育良好的家系进行育苗，最终获得23家系蟹苗。现将大规格亲蟹规模化家系构建进行总结，为今后开展河蟹遗传育种提供新的遗传材料和技术积累。

1 材料与方法

1.1 亲蟹的选择和标记

2012年11 月，外部形态特征参照GB/T 19783-2005中华绒螯蟹，从长江水系河蟹苏南养殖群体、长江干流野生群体和苏北里下河养殖群体中，选择体质健壮、无病无伤、性腺发育良好的大规格河蟹作为家系构建的亲蟹，雌蟹175 g以上，雄蟹250 g以上，雌雄比例2∶1（见表1）。用扎带穿过印有字母和数字的白皮管固定在河蟹螯足基部，对不同来源的亲蟹进行物理标记。

1.2 家系构建设施

定制特殊的连体长网箱作为家系构建设施，网箱设计为两行，每行各50个，计100个网箱隔间（规格0.6 m×0.6 m×1.5 m），每个网箱隔间设有独立的箱盖。长网箱用竹竿和铁丝固定架设于面积为2×667 m2的土池中部，网箱底部用砖块固定与池底相接。

表1 2012年构建长江水系河蟹家系亲蟹来源情况

1.3 家系规模化构建

亲蟹入池前7 d，往土池注入0.5 m深、用80目筛绢过滤的盐度为22左右的海水，用50 g/m2含有效氯30%左右的漂白粉进行消毒。亲蟹经20 g/m3甲醛消毒30 min后，各群体内亲蟹按♀∶♂=2∶1进行配组，做好配组记录，将每组亲蟹放入网箱隔间中，进行强化培育和交配。

1.4 抱卵蟹的越冬

2012年12月22日抽干池水，将抱卵雌蟹和完成配对的雄蟹移出网箱，未抱卵雌蟹继续留箱配对。至2013年2月26日抽干池水，移除雄蟹，雌蟹原池越冬，注入经消毒盐度为22左右的海水，根据气温变化逐渐加高水位并配备水车式增氧机，加强越冬期的水质和营养管理，确保抱卵蟹的越冬成活率。

1.5 家系的定向繁育准备

采用80目的筛绢网缝制成一个特殊网隔，可将面积约0.5×667 m2的土池分割为2列共40个相连的育苗隔段，每个隔断规格约为3 m×3 m。网隔底部埋入池底和池壁，网隔上部用铁丝穿引固定。每个育苗隔段配备3～5个充气头，气头贴近池底。“放幼”前10 d，注入用80目筛绢过滤的盐度为22左右的海水，有效水深1.5 m，用50 g/m3含有效氯30%的漂白粉进行消毒，待余氯消失后，按说明书施用生物有机肥并接种富含小球藻不带原生动物的“肥水”，使池水略带茶色。

1.6 家系的定向繁育

2013年4月19日，选择活力强的、胚胎发育同步的抱卵蟹40只，按照1个育苗隔段放1只抱卵蟹的原则，将抱卵蟹装笼进行定向“放幼”。“放幼”结束后移出雌蟹。Z1—Z2不喂料，Z2—大眼幼体淡化前全程投喂轮虫，每天根据吃食情况加减轮虫投喂量，同时控制好水质和增氧。

1.7 家系的淡化

灯光诱捕大眼幼体后，放入40目的筛绢网箱（规格1.5 m×1.5 m×1.5 m），按照1个网箱放1个家系大眼幼体的原则进行淡化，淡化期间投喂轮虫和淡水枝角类。

2 结果

2.1 家系规模化构建

2012年12月22日，将抱卵雌蟹移出网箱原池越冬，未抱卵雌蟹继续留箱配对，至2013年2月26日将抱卵雌蟹移出网箱，经统计共成功定向构建家系169个，其中全同胞家系25个，半同胞家系144个，家系构建成功率84.5%。

2.2 抱卵蟹的越冬

前后共选择164只带有标记、附肢齐全、活力强的抱卵蟹在交配池原池越冬，至2013年4月19日共获活力强的、卵块发育良好的抱卵蟹124只，越冬成活率达75.6%，其中苏南养殖群体的越冬成活率最高达83.2%，不同来源亲蟹越冬成活具体情况见表2。

表2 不同来源亲蟹越冬成活率比较

2.3 家系的定向繁育

40个育苗隔断中的大眼幼体经灯光诱后，根据产苗量最终选用23个家系淡化出苗（选择各家系产苗量2.2万尾以上，其中全同胞家系16个，半同胞家系7个），家系产苗量最多的达22.4万尾，产苗量最少的为2.2万尾，不同家系产苗情况见表3。

3 讨论

3.1 家系的规模化构建

3.1.1 亲蟹的标记 自2008年开始构建河蟹家系以来，笔者先后采用不同颜色绳带、不同颜色扎带、扎带与印有数字和字母的白皮管相结合进行亲蟹标记，从历年的使用情况来看，此次标记方法最为准确有效，但操作上仍存在不当之处，一是每只蟹只标记了一只螯足，导致个别亲蟹标记的螯足脱落后无法辨认。二是扎带扣好后，有的扎带末端留的太长，影响螯足活动，特别是亲蟹取食。

表3 家系产苗情况（单位万尾）

3.1.2 配对设施 采用连体网箱作为家系规模化构建的配对场所，且箱底与池底相接，使得每个隔间尽可能模拟土池环境，与小土坑[10]相比，占地面积小，而与单个网笼[10]相比活动空间更大。连体网箱把所有亲蟹集中在一起，方便随时检查亲蟹摄食、配对和抱卵情况，若用育苗隔段作为交配设施虽活动空间大，但不方便进行观察亲蟹活动情况。每个网箱隔间尽管有独立的箱盖防止亲蟹逃逸，但投喂极为不便。因此，今后用土池进行家系规模化构建则可采取每个隔间无盖，安装钙塑板倒檐即可，如有条件可使用孵化桶则更方便。

3.1.3 配对期间的管理 笔者历年采用大规格亲蟹繁育的实践证明，大规格亲蟹配对难、配对时间长。2012年12月22日、2013年2月26日分别抽干池水移出雄蟹和抱卵蟹，亲蟹从入箱到出箱时间跨度大，较常规亲蟹交配时间长。在规模化构建家系过程中，采用铁丝将植物性和动物性饵料串起来投饲，根据吃食情况灵活掌握投饲量和投喂频率，以防残饵败坏水质和确保亲蟹营养充足。

3.2 家系的越冬

本次规模化家系构建过程中，为确保抱卵蟹的越冬成活率，在越冬期间，采取不断加深水位以防水温剧烈变化、开启耕水机防止池面冻住、适时换水和适量投饵的措施，确保越冬期间池水水质良好，亲蟹营养均衡，使亲蟹的越冬成活率达75.6%。不同来源的亲蟹越冬成活率不同，其中以苏南养殖群体成活率最高、苏北里下河养殖群体次之，长江干流野生群体最低，而构建家系期间投饲及其他管理完全一致，这可能与不同来源亲蟹未选择为亲蟹前的营养积累有关[15]。

3.3 家系的定向繁育

3.3.1 “肥水”布苗 结合2009年、2011年家系育苗经验，在布苗前“肥水”，布苗时池水呈茶绿色，经镜检海链藻和小球藻为优势种。Z1—Z2期间不喂料，大量的原池饵料生物确保了Z1变Z2的营养需要，顺利度过Z1变Z2这一难关[16-20]。因此前期“肥水”较“清水”布苗为有优，且营养更均衡。“清水”布苗轮虫投喂量难以掌握，若轮虫投喂不足则影响溞状幼体发育，若轮虫投喂过多反而致使轮虫与溞状幼体竞争生存空间。

3.3.2 家系苗产量 此次家系育苗过程中，从Z1到Z2较为顺利，幼体数量多。但之后因为轮虫投喂量不足，导致幼体之间相互残杀，池水透明度越来越高，出现池水起泡等水质恶化现象，终致各家系产苗不高，较2009年、2011年产量低[10]。此次规模化家系育苗因没有配备用水源，只能相邻育苗池取水注入，且育苗隔段间的筛绢网在后期已完全被池水杂物堵塞，各段间水体无法流通，给换水带来极大困难。今后如仍采用土池隔段进行家系育苗，极有必要在池底布置排水管道，在池壁布置进水管道，并配备一个备用水源。进行规模化家系构建时，若采用孵化桶作为交配、育苗设施，则作业将更便捷。

本研究首次采用大规格亲蟹进行规模化家系构建，突破了大规格亲蟹的配对难、越冬成活率低、定向繁育难等关键技术，成功实现大规格亲蟹规模化家系构建。尽管因管理不到位造成各家系蟹苗产量不高，但仍不失为探索河蟹家系遗传育种技术的又一次突破。

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The study of lagre-scale family construction for big size Chinese mitten crab（Eriocheir sinensis）

Deng Yanfei，Xia Aijun，Pan Jianlin，Li Yuehua，Bo Rufa，Zhu Qingshun
（Freshwater Fisheries Research Institute of Jiangsu Province，Nanjing 210017，China）

A total of 100 groups of Chinese mitten crab（Eriocheir sinensis）（more than 175 g of female and more than 250 g of male）were selected to construct lagre-scale family from the wild populations of the Chinese mitten crabs，the Yangtze River population and the Lixi River breeders in northern Jiangsu cultured stock.169 families including 25 full-sib and 144 half-sib families were established，the successful ratio of family construction was 84.5%.40 of berried crabs（families）were selected for directional breeding，23 of families（16 of fullsib familes，7 of half-sib families）were desalinated successfully finally.

Eriocheir sinensis；big size；lagre-scale family construction.

Q173

A

1004-2091（2017）07-0049-04

2016-12-15）

10.3969/j.issn.1004-2091.2017.07.010

国家“十二五”科技计划项目（2012BAD26B04-03）；江苏省科技支撑计划项目（BE2012355）；江苏省水产三新工程项目（DY2012-2、PJ2011-46、JS2009-12）

邓燕飞（1982-），男，助理研究员，从事水生动物遗传育种研究.E-mail：yf-deng@163.com

李跃华，研究员.E-mail：liyuehua1816@sina.com