东北汉族人群抵抗素基因rs1862513(G/C)多态性与2型糖尿病相关性研究

陈珍珍，曹振强，周广宇，李 娜，王 茜*

(1．吉林大学中日联谊医院 肾病内科，吉林 长春130033；2．吉林大学第二医院 超声科，吉林 长春130041)

东北汉族人群抵抗素基因rs1862513(G/C)多态性与2型糖尿病相关性研究

陈珍珍1，曹振强2，周广宇1，李 娜1，王 茜1*

(1．吉林大学中日联谊医院 肾病内科，吉林 长春130033；2．吉林大学第二医院 超声科，吉林 长春130041)

目的 探讨东北汉族抵抗素基因rs1862513(G/C)位点与2型糖尿病发病及临床表型相关性。方法 应用连接酶反应分型法检测79例2型糖尿病患者及79例正常对照者rs1862513(G/C)多态性。结果 2型糖尿病组和对照组抵抗素rs1862513(G/C)位点基因型分布分别为GG49.5%、GC44.3%、CC6.2%和GG40.2%、GC47.4%、CC12.4%；等位基因频率分别为G型71.6%、C 28.4%和G型63.9%、C型36.1%，该位点的基因型分布和等位基因频率在两组间分布均无统计学意义(P值均>0.05)。病例组CC基因型患者空腹血糖明显低于GG基因型患者(P值<0.05)，体重指数、总胆固醇、甘油三酯、糖化血红蛋白、高密度脂蛋白胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇、胰岛素以及胰岛素敏感指数等临床检测指标在rs1862513(G/C)三种基因型患者之间没有显著差异(P值均>0.05)。结论 东北汉族人群抵抗素基因rs1862513(G/C)多态性与2型糖尿病发病无显著相关性，但与患者空腹血糖值相关。

抵抗素;基因多态性;2型糖尿病

(ChinJLabDiagn,2017,21:1185)

我国糖尿病发病率逐渐升高，并呈年轻化趋势。随着人类基因组计划完成，以及遗传学理论与技术在医学中的应用，糖尿病发病遗传学因素成为阐述糖尿病发病机理及治疗重要依据，特别是糖尿病发生易感性基因研究成为热点[1，2]。

人抵抗素来源于单核-巨噬细胞系统，为炎性因子参与机体内多种病理过程[3]。小鼠糖尿病模型研究认为抵抗素与糖尿病发病过程中胰岛素抵抗有关[4]，而人类抵抗素是否通过诱发胰岛素抵抗引发2型糖尿病的发生还存在争论[5，6]。近几年发现抵抗素基因的单核苷酸多态性(SNP)位点可能影响血清中抵抗素的含量，并与2型糖尿病有密切关系。对rs1862513(G/C)位点研究较多[7-9]。研究结果表明抵抗素基因rs1862513(G/C)位点与我国2型糖尿病发病没有相关性[10-12]。对我国南方人群基因多态性与疾病相关性研究结果和种族以及地区不同具有一定相关性[13，14]。本研究以我国东北地区人群为研究对象，探讨抵抗素基因rs1862513(G/C)位点与本地区糖尿病发病相关性及临床表型相关性。

1 材料与方法

1.1 对象

97例2型糖尿病患者均为吉林大学中日联谊医院内分泌科明确诊断者。资料包括年龄、性别、体重指数、总胆固醇、三酰甘油、高密度脂蛋白胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇、空腹血糖、空腹胰岛素、糖化血红蛋白、胰岛素抵抗指数等。正常对照组97例为吉林大学中日联谊医院体检中心体检健康者。2型糖尿病患者平均年龄47.34±7.04(岁)，正常对照组平均年龄49.25±8.80(岁)，两组间没有显著性差异(P值=0.097)。2型糖尿病患者男49名，女48名，正常对照组男57名，女40名，组间男女分布没有显著性差异(P值=0.325)。

1.2 DNA提取

抗凝静脉血，2 000 g离心10 min，取血浆，血细胞用于DNA提取(试剂盒北京天根生物公司)。DNA用紫外分光光度计DNA含量与OD260/OD280比值，DNA分装置-80℃保存。

1.3 基因分型

97例糖尿病患者与97例对照组DNA样本用连接酶检测反应分型法抵抗素基因rs1862513(G/C)位点基因型检测。由上海捷瑞生物技术有限公司完成。

1.4 统计分析

抵抗素基因rs1862513位点在人群基因型、等位基因频率分布及各组Hardy-Weinberg equilibrium统计应用Shesis软件(http://analysis.bio-x.cn/SHEsisMain.htm)进行分析；rs1862513位点与糖尿病相关性模型(包括codominant model、dominant model、recessive model)统计应用SPSS13.0 软件二分值Logit 回归进行分析； 抵抗素基因的rs1862513位点基因型间临床相关指标包括体重指数、总胆固醇、三酰甘油、高密度脂蛋白胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇、空腹血糖、糖化血红蛋白、空腹胰岛素、胰岛素抵抗指数和胰岛素敏感指数等的差异分析应用SPSS13.0 软件方差分析方法进行分析。P值<0.05为有统计学意义。

2 结果

2.1 抵抗素基因rs1862513(G/C)基因型与等位基因人群分布频率

Hardy-Weinberg遗传平衡分析结果显示rs1862513基因型在两组人群中分布符合Hardy-Weinberg遗传平衡定律。见表1。rs1862513基因型频率分布在T2DM组与正常组人群差异无统计学意义(P=0.220),见表1。rs1862513等位基因频率在T2DM组与正常组人群分布差异无统计学意义(P=0.103),见表2。

表1 rs1862513基因型在正常组与糖尿病组分布频率

#基因型在各组分布差异性比较，*各组Hardy-Weinberg遗传平衡检测P值

表2 rs1862513等位基因在正常组与糖尿病组分布频率

2.2 rs1862513位点与糖尿病相关性分析

通过分析rs1862513位点3种遗传模式与糖尿病相关分析结果显示：rs1862513位点3种遗传模式与糖尿病没有相关性，见表3。

表3 rs1862513位点与糖尿病相关性分析结果

*Codominant:GG vs.GC vs.CC;Dominant:CC+GC vs.GG;Recessive：CC vs.GC+GG

2.3 2型糖尿病患者rs1862513基因型与临床生化指标相关性分析

病例组CC基因型患者空腹血糖明显低于GG基因型患者(P值<0.05)，患者其他临床生化指标在病例组中rs1862513 3种基因型患者间没有显著差异(P值均>0.05)，见表4。

3 讨论

rs1862513(G/C)位点位于抵抗素基因启动子区域-420位置，该位点基因型与血清抵抗素浓度高低相关，说明该基因型影响抵抗素基因启动子的活性[7,15]。本研究检测东北汉族人群97例2型糖尿病患者，97例正常对照者rs1862513(G/C)多态性。结果显示rs1862513(G/C)基因型在人群中分布以GG型为主，等位基因CC为少数型，与其他几个研究位点基因分布不同，上述人群rs1862513(G/C)位点分布GG为少数型[8，16-18]。同时本研究发现rs1862513(G/C)基因型与等位基因频率在人群中分布无差异性，而与2型糖尿病相关性分析结果rs1862513(G/C)位点与2型糖尿病无相关性，这与国内研究结果相同[10，11]。

表4 rs1862513位点基因型间2型糖尿病患者相关生化指标的差异分析结果±SD)

*与GG相比P<0.05

通过分析临床患者相关生化指标在rs1862513(G/C)基因型之间差异，发现糖尿病患者CC基因型空腹血糖(7.615±1.387 μmol/L)明显低于GG基因型患者(9.656±2.296 μmol/L)(P值<0.05)。Makino H等在日本人群研究罗格列酮治疗糖尿病有效性相关分子机制过程中发现rs1862513(G/C)不同基因型人群的空腹血糖没有差异，给予罗格列酮后，通过相关性分析发现rs1862513(G/C)GG型与罗格列酮降糖效果密切相关[19]。病例组样本体重指数、总胆固醇、三酰甘油、高密度脂蛋白胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇、糖化血红蛋白、胰岛素敏感指数在rs1862513(G/C)中三种基因型间没有显著性差异(P值均>0.05)。

上述研究结果表明东北汉族人群抵抗素基因rs1862513(G/C)多态性与2型糖尿病无显著相关性，但rs1862513(G/C)基因型与血糖的水平有关，说明该基因多态性可能通过调节抵抗素表达影响血糖代谢，具体分子机制需要进一步研究。

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The correlation of resistin gene rs1862513(G/C)polymorphism with type 2 diabetes in northeast Chinese Han population

CHENZhen-zhen,CAOZhen-qiang,ZHOUGuang-yu,etal.

(Nephrology,China-JapanUnionHospitalofJilinUniversity,Changchun130033,China)

Objective To explore the correlation of resistin gene rs1862513 (G/C) polymorphism with type 2 diabetes and its clinical phenotype in northeast Chinese Han population.Methods Seventy-nine type 2 diabetic patients and 79 normal controls were enrolled.The polymorphism of rs1862513 (G/C) was detected by ligase detection reaction.Results The genotype frequencies of rs1862513(G/C) in type 2 diabetes group and normal control group are GG 49.5%,GC44.3%,CC6.2% and GG 40.2%,GC 47.4%,CC 12.4% respectively.Allele frequency is G 63.9%,C 36.1% and G 71.6%,C 28.4% respectively.There was no difference of resistin gene polymorphism in disease group and normal control group (P>0.05).The level of fasting blood glucose in patients with genetype CC were significantly lower than that in patients with genetype GG (P<0.05).There was no difference in body mass index,total cholesterol ,triglyceride,sglycated hemoglobin,high density lipoprotein cholesterol,low density lipoprotein cholesterol,insulin and insulin sensitive index(P>0.05)between the two patient groups.Conclusion There is no significant correlation between resistin gene rs1862513(G/C) and type 2 diabetes in northeast Han population，but there is significant correlation with level of blood glucose.

Resistin gene;Polymorphism;Type2 diabetes

吉林省科技厅项目(编号：20150204065SF)

1007-4287(2017)07-1185-04

R587.1

A

2016-11-30)

*通讯作者