气相色谱法测定复方薰衣草油膏中薄荷脑的含量Δ

张 群，蔡晓翠，贺金华

(1.伊犁州友谊医院药剂科，新疆 伊宁 835000； 2.新疆自治区药物研究所维吾尔药分析室，新疆 乌鲁木齐 830001)

气相色谱法测定复方薰衣草油膏中薄荷脑的含量Δ

张 群1*，蔡晓翠2，贺金华2

(1.伊犁州友谊医院药剂科，新疆 伊宁 835000； 2.新疆自治区药物研究所维吾尔药分析室，新疆 乌鲁木齐 830001)

目的：建立复方薰衣草油膏中薄荷脑含量测定的方法。方法：采用气相色谱法，色谱柱为以改性聚乙二醇为固定相的毛细管柱(30 m×0.32 mm，0.25 μm)；柱温为程序升温至230 ℃，分流比5 ∶1；进样口与检测器温度均为250 ℃。结果：薄荷脑质量浓度在0.022 67～0.680 10 mg/ml范围内呈良好的线性关系(r=0.999 5)，平均回收率为98.36%，仪器精密度、中间精密度RSD分别为0.64%、1.43%。结论：该方法简单、可行、准确、重现性好，适用于复方薰衣草油膏中薄荷脑的质量控制。

薄荷脑； 复方薰衣草油膏； 气相色谱

复方薰衣草油膏是采用薰衣草精油，结合黄芩苷、亚麻油、薄荷油等配制而成的复方制剂，对烫伤皮肤创面有促愈合作用，同时具有一定的抗炎、镇痛作用[1]，用于Ⅱ度烧伤创面早期能起到缓解疼痛、避免创面加深、缩短病程、减轻炎症反应的效果，并能减轻愈后疤痕[2]。为控制该复方油膏剂的质量，本研究采用气相色谱法对复方薰衣草油膏中薄荷脑的含量进行了测定，现报告如下。

1 材料

1.1 仪器

7890A GC型气相色谱仪(美国安捷伦公司)；色谱柱：DB-WAX 123-7032(30 m×0.32 mm，0.25 μm)、InertCap-WAX(30 m×0.25 mm，0.25 μm)；SK3300H型超声清洗仪(功率250 W，频率50 kHz，上海科导超声仪器有限公司)；UPT-11-10T优普特实验超纯水机(成都超纯科技有限公司)；DT-500A型电子计数天平(常熟市金羊砝码仪器有限公司金羊天平仪器厂)。

1.2 药品与试剂

复方薰衣草油膏(3批产品均由伊犁州友谊医院药剂科提供，该制剂正在申报批准文号)，批号：20150824、20150826、20150828)；萘对照品(深圳健竹生物科技有限公司，批号：111673-200803)；薄荷脑对照品(深圳健竹生物科技有限公司，批号：110728-200506)；甲醇(色谱纯，Sigma公司)；磷酸、乙醇(分析纯，天津市福晨化学试剂厂)。

2 方法与结果

2.1 溶液的制备

2.1.1 系列质量浓度对照品溶液的制备：精密称量萘约46.05 mg，置于25 ml容量瓶，加无水乙醇溶解并稀释至刻度，摇匀，即得1.842 mg/ml内标溶液；另精密称量薄荷脑对照品22.67 mg，置于10 ml容量瓶中，加无水乙醇溶解并稀释至刻度，摇匀，即得2.267 mg/ml对照品贮备液。分别精密吸取上述对照品贮备液0.05、0.10、0.15、0.20、0.50、1.00、1.50 ml至5 ml容量瓶中，精密加入内标溶液0.2 ml，加无水乙醇至刻度，摇匀，即得。

2.1.2 供试品溶液的制备：精密称量本品约0.1 g，置于具塞锥形瓶中，加无水乙醇约15 ml，超声处理(功率250 W，频率50 kHz)至完全溶解，转移至25 ml容量瓶中，精密加入内标溶液1 ml，用无水乙醇稀释至刻度，摇匀，即得。

2.2 气相色谱条件及系统适应性

气相色谱条件：以改性聚乙二醇为固定相的毛细管柱(柱长30 m，内径0.32 mm，膜厚度0.25 μm)；柱温为程序升温，初始温度60 ℃，保持4 min，以2 ℃/min的速率升温至100 ℃，再以10 ℃/min的速率升温至230 ℃，保持1 min；进样口温度250 ℃；检测器温度250 ℃；分流进样，分流比5∶1；进样量1 μl。理论塔板数n=5.54(tR/Wh/2)2=4 071 437，说明在选定的条件下，色谱柱的性能均符合要求，测定效果良好；分离度R=2(tR2-tR1)/(W1+W2)=2.61，《中华人民共和国药典》(2015年版)规定，分离度应>1.5，本项测定和计算结果显示，分离度符合要求。

2.3 方法学验证

2.3.1 专属性：按处方比例取除薄荷素油外的其余药材，用与与复方薰衣草油膏相同的制备工艺制得阴性样品，根据“2.1.2”项下方法制得阴性样品溶液。取阴性样品溶液、对照品溶液与供试品溶液，根据“2.2”项下方法进行测定，记录色谱图，结果见图1。可见，阴性无干扰，专属性良好。

A. 薄荷脑对照品；B.供试品；C.阴性样品A.menthol reference substance；B.test sample；C.negative sample图1 气相色谱图Fig 1 Gas chromatography

2.3.2 线性关系：精密吸取系列质量浓度对照品溶液进样分析，记录峰面积，以薄荷脑质量浓度为横坐标(X)，薄荷脑和萘峰面积比为纵坐标(Y)，得线性回归方程Y=10.782X-0.04(r=0.999 5)，薄荷脑对照品质量浓度在0.022 67～0.680 10 mg/ml范围线性关系良好。

2.3.3 仪器精密度：取同一对照品溶液，连续进样6次，记录峰面积。结果显示，薄荷脑与萘峰面积之比的RSD为0.64%，表明仪器精密度良好。

2.3.4 重复性：取同一批样品(批号：20150828)，按照“2.1.2”项下方法制成供试品溶液6份，连续进样6次，记录峰面积，计算含量。结果显示，RSD为1.74%，表明该法重复性良好。

2.3.5 稳定性：取同一批供试品溶液(批号：20150828)，室温(23～25 ℃)下放置，分别于0、2、4、8、12 h进样测定，记录色谱峰面积。结果显示，薄荷脑与萘峰面积比值的变化不明显，RSD为1.26%，表明供试品溶液在12 h内保持稳定。

2.3.6 中间精密度：取同一批供试品溶液(批号：20150828)，在上述色谱条件下，在同一个实验室、不同时间由不同分析人员用含量测定方法进行重复测定，记录色谱峰面积，计算含量及RSD。结果显示，RSD为1.43%，符合要求。

2.3.7 准确度：精密称量已知含量样品(批号：20150828)约0.05 g，置于具塞锥形瓶中，共6份，分别精密加入薄荷脑对照品储备溶液0.5 ml、萘储备溶液1.0 ml，依供试品溶液制备方法同法操作，分别进样1 μl，记录峰面积，计算含量。结果表明，回收率符合要求，见表1。

表1 准确度试验结果(n=6)

2.4 样品含量测定

取3批样品，采用“2.1.2”项下方法制备供试品溶液，按照“2.2”项下条件进样测定，记录峰面积，计算含量，结果见表2。

表2 薄荷脑的含量测定结果Tab 2 Content determination results of menthol

3 讨论

薄荷脑为易挥发性成分，已有文献报道采用气相色谱法测定了复方氯己定含漱液[3]、肿痛气雾剂[4]、小儿双清颗粒[5]、薄荷脑滴鼻液[6]、双柏散[7]、肚痛健胃整肠丸[8]、薄荷素油[9]、冰霜梅苏丸[10]、川贝枇杷糖浆[11]、痛宁凝胶[12]、氨薄荷搽剂[13]、苍耳子鼻炎滴丸[14]、小儿复方麻黄碱桔梗糖浆[15]、蛇胆川贝液[16]等制剂中薄荷脑的含量，且测定结果准确、重复性好。因此，本研究建立了气相色谱法分析方法测定复方薰衣草油膏中薄荷脑的含量。在预试验中，采用《中华人民共和国药典》(2015年版)薄荷素油中薄荷脑含量测定方法[17]测定制剂中薄荷脑的含量，结果显示，薄荷脑峰分离度佳、对称性佳。未见文献报道采用该方法测定复方薰衣草油膏中薄荷脑的含量。该方法专属性好，不受复方制剂中其他成分的影响，经系统适用性考察及方法学验证均符合要求。该方法简单、可行，可用于复方薰衣草油膏中薄荷脑含量的测定。

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[3]梁慧敏.GC法测定复方氯己定含漱液中薄荷脑的含量[J].医药前沿，2016，6(10)：358-359.

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[17] 国家药典委员会.中华人民共和国药典[S].2015年版.北京：中国医药科技出版社，2015：419-420.

Content of Menthol in Compound Lavender Oil Ointment by Gas ChromatographyΔ

ZHANG Qun1, CAI Xiaocui2, HE Jinhua2

(1.Dept.of Pharmacy, Ili Kazak Autonomous Prefecture Friendship Hospital, Xinjiang Yining 835000, China; 2.Uighur Medicine Analysis Room, the Xinjiang Institute of Material Medic, Xinjiang Urumchi 830001, China)

OBJECTIVE：To establish a method for content determination of menthol in compound lavender oil ointment by gas chromatography(GC). METHODS: GC method was adopted, capillary column (30 m×0.32 mm, 0.25 μm) was used with modified polyethylene glycol as stationary phase. The column temperature was at 230 ℃ with the split ratio of 5∶1. The temperature was set at 250 ℃ for injection port and for the detector. RESULTS: The liner range of menthol was 0.022 67 mg/ml-0.680 10 mg/ml (r=0.999 5) with the average recovery of 98.36%, and theRSDvalue for instrument precision and intermediate precision were 0.64%, 1.43% respectively. CONCLUSIONS: This method is simple, feasible, accurate, reproducible, which can be used for quality control of menthol in compound lavender oil ointment.

Menthol; Compound lavender oil ointment; GC

新疆自治区科技支撑计划项目(No.201433102)

R927.2

A

1672-2124(2017)05-0604-03

2016-09-13)

*主任药师。研究方向：医院药学管理及医院制剂。E-mail：924167490@qq.com

DOI 10.14009/j.issn.1672-2124.2017.05.010