阮红刚 付潮泓 许腊梅
·药物研究·
慢性化脓性中耳炎脓液的病原菌分布及药敏性分析
阮红刚 付潮泓 许腊梅
目的 研究慢性化脓性中耳炎(CSOM)脓液中病原菌的种类分布和对抗菌药物敏感性。方法 研究对象选取2015年2月到2016年6月间收治的CSOM患者121例,提取患者耳道分泌的脓液,进行细菌培养和药敏试验检测,并对所有患者的培养阳性病原菌种类及药物敏感性结果进行统计分析。结果 本研究病原菌检出率为89.26%。其中革兰阳性球菌比例为51.85%,以金黄色葡萄球菌为主(28.70%);革兰阴性球菌比例为36.11%,以铜绿假单孢菌为主(13.89%)。金黄色葡萄球菌和表皮葡萄球菌对利奈唑胺和呋喃妥因的药物敏感性最高(100%),铜绿假单孢菌、变形杆菌及大肠埃希菌等主要革兰阴性球菌对大多抗菌药物均具有较高药敏性。结论 引起CSOM发生的病原菌主要以金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、凝固酶阴性葡萄球菌、铜绿假单胞菌等,不同病原菌对抗菌药物的敏感性存在明显差异,对病原菌种类及药敏的检测,可为临床选择合适抗菌药物治疗提高依据,具有重要临床价值。
慢性化脓性中耳炎;病原菌种类;抗菌药物敏感性
慢性化脓性中耳炎(CSOM)是耳鼻喉科常见的疾病,常指炎症侵袭到耳黏膜、骨膜甚至骨质的慢性化脓性炎症,且多数患者并发有乳突的炎症[1]。临床急性炎症久治不愈、咽鼓管功能障碍、邻近器官的炎症病变、自身免疫力低下等因素均可引起该病发生,临床研究显示,急性化脓性中耳炎致病病原菌毒性过强,及治疗不当、延迟等因素是临床引起CSOM发生的主要原因[2]。患者临床常表现为耳内持续性或间断的脓液生成、鼓膜损伤及听力的集聚下降,如未得到及时有效治疗,后期可导致患者失聪,甚至引起中耳骨质的破坏,出现颅内及路外感染,危及患者生命[3]。临床治疗CSOM以抗菌药物为主,通过对致病菌的抑制可取得较好疗效,但随着近年来抗菌药物在临床使用泛滥,许多患者自身不合理用药,加之CSOM致病菌种类繁多,导致病原菌对药物敏感性降低,对耐药株的报道逐渐增加[4]。研究显示,近年来常规抗菌药物治疗方案对CSOM的疗效发现显著降低,难治性病例逐年增加,因此加强对CSOM患者病原菌及对病原菌药敏的检测,对于临床科学使用抗菌药物意义重大[5]。为了解我院CSOM患者病原菌分析及药敏特点,为临床治疗提高科学指导,提高治疗疗效,笔者选取108例CSOM患者进行研究,报道如下。
1.1 一般资料 研究对象选取我院2015年2月到2016年6月间收治的CSOM患者121例,纳入标准[6]:(1)均满足临床关于CSOM诊断标准;(2)无合并耳鼻喉科其他感染;(3)无严重免疫系统、血液系统等疾病;(4)无合并心脑血管肝肾肺等器官组织疾病;(5)所有患者检查前均停止服用抗菌药物48 h以上。其中男74例,女47例;年龄4~71岁,平均年龄(39.56±12.73)岁;病程7个月~31年,平均病程(13.84±4.67)年;其中未成年患者(<18岁)共26例,中青年患者(18~60岁)共70例,老年患者(>60岁)共25例;其中慢性单纯性中耳炎患者共95例、肉芽型中耳炎患者共11例、乳突手术后中耳炎患者共9例、胆脂瘤型中耳炎患者共6例。
1.2 方法
1.2.1 检测方法:检测前采用75.0%医用乙醇消毒患者外耳周围皮肤及外耳道前1/2处,将灭菌儿科棉签置入0.9%氯化钠溶液浸润后,缓慢进入外耳道直至鼓室、鼓膜穿孔部位或是外耳道深处采集中耳分泌脓液,随后将脓液置入无菌培养试管内待检查,以上步骤均严格执行无菌操作,并在30 min内将培养物送至细菌实验室进行涂片镜检、细菌鉴定及药敏试验,所有实验室培养步骤均准守《全国临床检验操作规定》进行,采用巧克力平板、血琼脂平板、葡萄糖蛋白胨真菌培养基对病原菌进行培养,并参考相关文献标准进行鉴定。参考WHO指定的K-B法进行细菌药检测,采用法国生物-梅里埃公司生产实际FOUNG3对真菌进行药敏检测,同样采用该公司生成的头孢硝噻吩纸片对葡萄球菌的β-内酰胺酶检测,药敏试验结果则参照2012年CLSI拟定标准。
1.2.2 试剂[7]:巧克力平板、血琼脂平板、葡萄糖蛋白胨真菌培养基均由英国OXOID公司生成,质控菌株金黄色葡萄球菌(ATCC 25923)、大肠埃希菌(ATCC 25922)、铜绿假单胞菌(ATCC 27853)、表皮葡萄球菌(ATCC 1228)、变形菌属(ATCC 12453)均由卫生部临检中心提供,采用梅里埃公司生产的全自动微生物分析仪VITEK2-compact进行病原菌鉴定,采用上海博讯有限公司生产的全自动生物安全柜。
1.3 观察指标 分析所有患者的病原菌种类分布,及每种病原菌对抗菌药物敏感性结果。
2.1 所有患者病原菌种类分布 121例患者中共检测出108株病原菌,病原菌检出率为89.26%。其中革兰阳性球菌共56株,所占百分比为51.85%;革兰阴性球菌共39株,所占百分比为36.11%;真菌共13株,所占百分比为12.04%。革兰阳性球菌中金黄色葡萄球菌为主,共31株,所占百分比为28.70%,其次是表皮葡萄球菌,共13株,所占百分比为12.04%;革兰阴性球菌中以铜绿假单孢菌为主,共15株,所占百分比为13.89%,其次为变形杆菌,共11例,所占百分比为10.19%,再其次为大肠埃希菌,共10例,所占百分比为9.26%。见表1。
表1 所有患者病原菌种类分布
2.2 主要革兰阳性球菌药敏试验结果 所有抗菌药物中,金黄色葡萄球菌和表皮葡萄球菌对利奈唑胺和呋喃妥因的药物敏感性最高,达100%,同时万古霉素药敏性也较高,分别为96.77%和100%。见表2。
表2 主要革兰阳性球菌药敏试验结果
2.3 主要革兰阴性球菌药敏试验结果 所有抗菌物中,铜绿假单孢菌对阿米卡星、美罗培南及亚胺培南的药敏性较高,达100%,而对头孢西丁和氨卡西林的药敏性为0。变形杆菌和大肠埃希菌对所有抗菌药物均有较高的药敏性。见表3。
CSOM是临床常见的疾病,具有较高的临床发病率,临床常表现为听力进行性下降、鼓膜穿孔及反复脓液流出等症状,如不及时有效治疗,还可引起严重并发症发生,甚至出现严重的颅内外感染,危及患者生命。抗菌药物是CSOM的主要治疗方法,短时间内服用可取得较理想疗效[8]。但研究发现,近年来随着经济快速发展,抗菌药物医源性使用不当及自身不合理使用等因素,导致抗菌药物耐药率逐年增加,出现多种耐药病原株,极大提高临床治疗难度[9]。国内外大量对CSOM患者脓液病原菌培养研究显示,大多患者均以混合感染为主,同时病原菌混合种类方式多样化,且不同地区、不同年龄患者的病原菌种类均存在差异,造成国内外对病原菌种类分布迟迟未达成一致[10]。准确检测患者病原菌种类,并进行药敏检试验指导抗菌药物的使用,对临床治疗CSOM具有重要意义[11]。CSOM病原菌种类检测显示,病原菌感染多以革兰阳性球菌为主,且革兰阴性球菌也具有较大比例,其中又以金黄色葡萄球菌最为常见,同时表皮葡萄球菌和凝固酶阴性葡萄球菌感染也较多,本研究结果显示,革兰阳性球菌感染比例为51.85%,这与刘春玲等[12]报道的50.00%基本一致。这其中又以金黄色葡萄球菌感染最为常见,本研究结果为28.70%,与部分文献报道存在差异,其原因可能与地域及年龄等因素有关。同时国内学者发现,近年来CSOM的真菌感染率呈上升趋势,本研究结果显示,真菌感染率为12.04%,具有较高的诊断率,同时排除实验室污染可能,与目前研究基本[13]一致。
表3 主要革兰阴性球菌药敏试验结果
既往研究已证实,对病原菌药敏试验对于临床合理使用抗菌药物,提高CSOM治疗疗效具有重要作用[14]。本研究对各类革兰阳性球菌药敏试验结果显示,金黄色葡萄球菌和表皮葡萄球菌对抗菌药物敏感性种类基本相似,均对利奈唑胺、呋喃妥因及万古霉素具有较高的药敏性,均达到95.00%以上,同时对庆大霉素和头孢西汀也具有一定药敏性,但对于红霉素及青霉素的药敏性较低,均在20.00%以下。对各类革兰阴性球菌药敏试验结果则显示,铜绿假单孢菌、变形杆菌及大肠埃希菌等主要革兰阴性球菌对大多抗菌药物均具有较高药敏性,这其中仅铜绿假单孢菌对头孢噻肟、甲氧苄啶、头孢西丁、氨卡西林的药敏性较低,和变形杆菌对甲氧苄啶的36.36%的药敏性。本研究结果证实,不同病原菌种类对抗菌药物敏感性存在明显差异,因此临床治疗过程中需针对不同种类病原菌采用不同抗菌药物治疗,是提高CSOM临床治愈率的关键。但同时需注意各抗菌药物存在的不良反应,如氨基糖苷类抗菌药物对儿童存在一定肾毒性和耳毒性[15],喹诺酮类抗菌药物则可引起关节软骨坏死等严重并发症,同时庆大霉素则对儿童存在耳毒性,因此诸类药物在儿童中应谨慎使用。且本研究对真菌感染患者研究发现,多数为中耳乳突术后常规换药不能干耳患者,因此对于耳乳突术后长时间抗菌药物不能治愈患者,应考虑真菌感染可能,并针对进行抗菌药物使用,但本研究由于实验条件限制,未对真菌进行药敏试验,需在日后工作中进一步完善。
综上所述,金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、凝固酶阴性葡萄球菌、铜绿假单胞菌等是引起CSOM的主要病原菌,不同病原菌对抗菌药物的敏感性存在明显差异,对病原菌种类及药敏的检测,可为临床选择合适抗菌药物治疗提高依据,具有重要临床价值。
1 李颖,任红波,韩富根,等.慢性化脓性中耳炎患儿感染病原菌分布与药敏分析.中华医院感染学杂志,2016,26:1647-1649.
2 Aduda DSO,Macharia IM,Mugwe P,et al.Bacteriology of chronic suppurative otitis media (CSOM)in children in garissa district,kenya:a point prevalence study.International Journal of Pediatric Otorhinolaryngology,2013,77:1107-1111.
3 郝春艳,刘红宇,张贵,等.慢性化脓性中耳炎患者耳道分泌物病原菌培养及药敏结果分析.山东医药,2016,56:273-274.
4 Orji FT,Dike BO.Observations on the current bacteriological profile of chronic suppurative otitis media in South eastern Nigeria.Annals of Medical & Health Sciences Research,2015,5:124-128.
5 孙小娇,崔万明.DGGE法分析慢性化脓性中耳炎耳道菌群变化及药敏试验研究.中国微生态学杂志,2014,26:400-403.
6 Tiedt NJ,Butler IR,Hallbauer UM,et al.Paediatric chronic suppurative otitis media in the Free State Province:clinical and audiological features.Samj South African Medical Journal,2013,103:467-470.
7 王慧敏,连荣,余文发,等.慢性化脓性中耳炎患者脓液中病原菌分布及药物敏感性分析.中华医院感染学杂志,2013,23:1199-1200.
8 Weckwerth PH,At DMF,Ca DML,et al.Bacterial pathogens related to chronic suppurative otitis media in individuals with cleft palate:bacteriological culture and polymerase chain reaction.Cleft Palate-Craniofacial Journal,2014,51:145-153.
9 龙彬,韩淑贞,王玉杰,等.慢性化脓性中耳炎患者的病原菌特点及药敏分析.中国卫生检验杂志,2013,26:1993-1995.
10 Asish J,Amar M,Hajare V,et al.To study the bacteriological and mycological profile of chronic suppurative otitis media patients and their antibiotic sensitivity pattern.International Journal of Pharma & Bio Sciences,2013,4:186-199.
11 吴学文,王风君,高可雷,等.我国慢性化脓性中耳炎患者的病原学及其动态变化分析.中国耳鼻咽喉颅底外科杂志,2016,22:1034-1039.
12 刘春玲,利显民,陈妙儿.慢性化脓性中耳炎主要病原菌种类及耐药性分析.中国当代医药,2012,19:176-177.
13 Gu X,Niu L,Keyonmu Y,et al.The analysis of the main pathogenic bacteria and drug sensitivity in patients with chronic suppurative otitis media and patients with middle ear cholesteatoma in xinjiang.Journal of Audiology & Speech Pathology,2014,22:489-493.
14 杨丽,王晋超.新疆各民族慢性化脓性中耳炎病原菌及耐药性分析.中华全科医学,2013,11:1524-1525.
15 张伟琳.慢性化脓性中耳炎脓液的菌种分布和药物敏感性分析.临床合理用药杂志,2014,15:54.
10.3969/j.issn.1002-7386.2017.15.040
442000 湖北省十堰市,湖北医药学院附属东风医院检验科(阮红刚、付潮泓),手术室(许腊梅)
付潮泓,442000 湖北省十堰市,湖北医药学院附属东风医院检验科;
E-mail:fuchaohong20@163.com
R 764.21
A
1002-7386(2017)15-2375-04
2017-02-06)