芒柄花黄素对小鼠体内SOD、MDA、GSH-Px和BUN的影响

梁馨元，韦姗姗，李礼顺，谢为舜，黄永生，陈 健

(1.桂林医学院临床医学院，广西 桂林 541001；2.桂林医学院基础医学院生理教研室)



芒柄花黄素对小鼠体内SOD、MDA、GSH-Px和BUN的影响

梁馨元1，韦姗姗1，李礼顺1，谢为舜1，黄永生1，陈 健2

(1.桂林医学院临床医学院，广西 桂林 541001；2.桂林医学院基础医学院生理教研室)

目的 验证芒柄花黄素对小鼠体内超氧化物岐化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)的活性和血尿素氮(BUN)的含量的影响。方法 将小鼠分为低、中、高剂量组及对照四个组，将芒柄花黄素按不同浓度腹腔注射到小鼠体内，连续给药7d后进行小鼠游泳实验，小鼠在水中游泳10min后将其捞起，颈椎离断致死后立即抽取血清样本制作肝脏匀浆，检测血清样本中的BUN和肝脏中的SOD、MDA、GSH-Px等指标。结果 芒柄花黄素在浓度为32mg/kg时，能有效的降低小鼠体内MDA活性，并且提高小鼠体内SOD、GSH-Px的活性，还能降低小鼠体内血清BUN的含量(P均<0.05)。结论 芒柄花黄素通过增强抗氧化酶活性、减少氧自由基生成、调节能量代谢等方面对小鼠起到明显的抗疲劳作用。

芒柄花黄素；植物雌激素；小鼠；抗疲劳

1 材料与方法

1.1 实验材料

1.1.1 实验药材与动物 芒柄花黄素(纯度>98%)，购自天津马克生物技术有限公司，不同浓度用生理盐水配制。实验动物：选用清洁级雄性昆明种小鼠40只及基础饲料，体质量18～22g。

1.1.2 仪器与试剂 小鼠游泳箱(规格70cm×70cm×60cm)、Beckman640紫外分光光度计等。血尿素氮测定试剂盒、谷胱甘肽测定试剂盒、丙二醛测定试剂盒、超氧化物歧化酶测定试剂盒均采用南京建成生物技术研究所生产。

1.2 实验方法 40只小鼠平均分成4组，低、中、高剂量组和空白对照组。按低剂量组8mg/kg,中剂量组16mg/kg,高剂量组32mg/kg分别对小鼠给药(给药期间应根据全部小鼠平均体重的增加对腹腔注射量做适当的调整)，空白对照组给予同体积的生理盐水腹腔注射。小鼠每天注射给药1次，每次注射前断食2h，连续7d。基础饲料自由摄食。

小鼠连续给药7d后，每组小鼠于末次给药前禁食12h，在末次给药1h后将小鼠放入游泳箱内做游泳实验。把小鼠放入游泳箱游泳，水深约为35cm，水温30℃,让小鼠在水中游泳10min后将其捞起，颈椎离断致死后，立即抽取血清样本，同时取出肝脏制作肝脏匀浆，离心机分离取上清备用。

用肝脏匀浆上清和血清样本,按照试剂盒的方法分别测定丙二醛(MDA)、血尿素氮(BUN)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)的含量及超氧化物歧化酶(SOD)活性。

2 结 果

高剂量组小鼠肝脏组织中SOD、GSH-Px活性高于对照组(P<0.05)，MDA、BUN活性低于对照组(P<0.05)，结果见表1。

表1 小鼠肝脏匀浆SOD、MDA、GSH-Px活性的变化

与对照组比较，*P<0.05

3 讨 论

疲劳的发生与人体的某些生化指标密切相关，可以应用相关化学指标来评价芒柄花黄素的抗疲劳作用[9-10]。SOD、GSH-Px、MDA是反映机体内氧自由基代谢的主要指标，其中MDA含量的高低可反映体内脂质过氧化的程度，间接地反映细胞受损程度[11]。SOD的功能是有效地清除超氧自由基[12]，GSH-Px则可以有效地清除过氧化氢(H2O2) 等活性氧，从而阻止脂质过氧化，保护细胞免受运动性损伤。BUN是反应蛋白质分解代谢的主要指标，其含量可随运动的增加而增加，若机体对运动的适应能力越差，血清BUN含量会越高[13-14]。研究表明[15]，剧烈运动可促使氧自由基的产生，体内脂质过氧化增强,MDA水平升高而导致运动能力下降，产生运动性疲劳。

本实验中，在小鼠游泳10min后，取血清样本和肝组织进行实验分析显示,高剂量组小鼠体内SOD、GSH-Px活性高于对照组(P<0.05)，清除氧自由基的能力较高，能有效地阻止脂质过氧化，使细胞受损程度较小。而高剂量组小鼠体内MDA含量显著低于对照组(P<0.05),说明高剂量小组体内脂质过氧化程度较低，表明细胞受损程度低，间接反映高剂量组小鼠体内氧自由基含量较低。对照组小鼠的血清BUN含量高于高剂量组(P<0.05)，说明高剂量组队对运动的负荷能力比对照组好，有较好的抗疲劳作用。本实验的唯一变量是芒柄花黄素的浓度，实验结果证明了芒柄花黄素在体内对自由基的清除具有良性影响。但在低浓度组时并没有清除自由基起到抗疲劳的作用，其对体内自由基的清除在高浓度组才具有较好的效果。联系到芒柄花黄素在体外以邻苯三酚自氧化实验来测定其对自由基的清除的具有明显的剂量依赖性，这可能与体外实验的反应条件较易控制，过程简单，而体内的生化反应及新陈代谢复杂，反应的变量不易控制导致。故芒柄花黄素在体内清除自由基起抗疲劳作用的剂量关系，以及最佳浓度有待进一步研究。

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Experimental Study on Effects of Formononetin on SOD、MDA、GSH-Px and BUN in Mice

LIANG Xin-yuan,WEI Shan-shan，LI Li-shun,et al

(ClinicMedicalCollege,GuilinMedicalCollege,GuilinGuangxi541001，China)

Objective To explore the effects of formononetin on the activities of SOD and GSH-Ps as well as the content of MDA and BUN in mice. Methods Mice were randomly divided into four groups.After seven days of administration of formononetin,the swimming test was performed.The content of BUN in serum samples and SOD,MDA,GSH-Px in liver were also detected.Results Formononetin at a concentration of 32mg/kg can effectively reduce the content of MDA(P<0.05),and increase the activity of SOD and GSH-Px(P<0.05),but reduce the content of serum BUN in mice(P<0.05).Conclusion Formononetin plays an obvious anti fatigue effect on mice via enhancing antioxidant enzyme activity,reducing oxygen free radicals and regulating energy metabolism.

Formononetin;Phytoestrogens;Mice;Anti-fatigue

R965

A

2095-4646(2017)03-0188-03

10.16751/j.cnki.2095-4646.2017.03.0188

2017-01-06)