鸡矢藤的薄层色谱鉴别方法研究及应用

胡明勋 陈 玲 蒋运斌 吴 兵 杨 洁 兰 杨 马逾英成都中医药大学药学院/中药资源系统研究与开发利用省部共建国家重点实验室培育基地，四川 成都 611137



鸡矢藤的薄层色谱鉴别方法研究及应用

胡明勋 陈 玲 蒋运斌 吴 兵*杨 洁 兰 杨 马逾英*
成都中医药大学药学院/中药资源系统研究与开发利用省部共建国家重点实验室培育基地，四川 成都 611137

目的：建立鸡矢藤薄层色谱鉴别方法。 方法：采用硅胶G薄层板，以氯仿-甲醇-冰醋酸-水(10∶4∶1∶1)为展开剂，鸡矢藤苷为对照品，采用薄层色谱法对不同品种和不同产地鸡矢藤药材进行定性鉴别。 结果：鸡矢藤薄层色谱中，在与对照品色谱相应位置上显相同颜色的斑点。 结论：该方法准确、简便，可为鸡矢藤药材的质量控制提供参考。

鸡矢藤；薄层色谱；鸡矢藤苷

鸡矢藤为常用民族民间药物，彝族、苗族、土家族等24个[1]少数民族都有使用。鸡矢藤为茜草科植物鸡矢藤Paederiascandens(Lour.) Merr.或毛鸡矢藤P.scandens(Lour.) Merr. var.tomentosa(BI.) Hand.-Mazz.的干燥地上部分[2]，其原植物生长于海拔200～2000m的山坡、林缘、林中、沟谷边灌丛中或缠绕在灌木上，分布于我国的西南、中南至东部[3]；其功效为祛风活血、止痛解毒、消食导滞、除湿消肿[2, 4-5]。《中国药典》1977年版及四川、上海、湖南、福建等地方中药材标准中均有收载，但记载的鸡矢藤质量控制方法较为简单；2010年版《四川省中药材标准》中含有检查项和浸出物项，无鉴别项[2]。现代研究表明[6]，鸡矢藤主要含有烯醚萜苷类、黄酮类、甾醇类、三萜类、挥发油类和烷烃、脂肪醇、脂肪酸类化合物等。据报道，环烯醚萜苷类成分为鸡矢藤的主要活性成分，具有抗炎、镇痛、影响胃肠道活动的作用[7]。笔者以鸡矢藤环烯醚萜苷类成分中的鸡矢藤苷为指标性成分，建立鸡矢藤药材的薄层色谱鉴别方法，以期为鸡矢藤药材的质量控制提供参考依据。

1 仪器与试药

SB-3200DTD超声波清洗器(宁波新艺超声有限公司)、101-2型电热鼓风干燥箱(北京中兴伟业仪器有限公司)、正德牌远红外控调温电炉(成都市桑 电器厂)、SQP万分之一分析天平(赛多利斯科学仪器有限公司)、DEY-500g摇摆式高速中药粉碎机(温岭市林大机械有限公司)、ZF-90型暗箱式紫外透射仪(上海顾村电光仪器厂)、HWS26型电热恒温水浴锅(上海-恒科学仪器有限公司)。甲醇、无水乙醇、冰乙酸、氯仿、丙酮、乙酸乙酯(成都科龙化工试剂厂)；硫酸、盐酸(四川西陇化工有限公司)，以上试剂均为分析纯，薄层硅胶G(青岛海洋化工有限公司)、薄层硅胶GF254(青岛海洋化工有限公司)，水为蒸馏水。鸡矢藤苷对照品(成都曼思特生物科技有限公司，纯度HPLC≧98.0%，批号：MUST-15101422 )；23批鸡矢藤药材样品，采于四川各地，经成都中医药大学马逾英教授鉴定，为茜草科鸡矢藤属植物鸡矢藤P.scandens(Lour.) Merr.、毛鸡矢藤P.scandens(Lour.) Merr.var.tomentosa(BI.)Hand.-Mazz.，详见表1。

表1 样品来源

2 方法与结果

2.1 对照品溶液的制备 取鸡矢藤苷对照品适量，加甲醇制成1mg/mL的溶液，即得。

2.2 供试品溶液的制备 取样品粉末1g，加75%乙醇10mL，超声提取30min，放冷，滤过，滤液挥干，残渣加75%乙醇2mL使溶解，即得。

2.3 展开系统的优选 根据鸡矢藤的化学成分研究，且为了获得最佳的展开效果，试验了多种展开系统：A氯仿-甲醇-冰醋酸-水(10∶4∶1∶1)，B氯仿-甲醇-水(7∶3∶0.5)，C乙酸乙酯-甲醇-水(10∶1∶0.5)。按照2015版《中国药典》四部通则0502薄层色谱法进行试验，分别吸取上述对照品溶液和供试品溶液各4μL，点于3块硅胶G薄层板上(薄层板点样前105℃，活化30min)，分别以A、B、C展开系统为展开剂，预饱和15min，展开15cm，取出晾干。喷以10%硫酸-乙醇溶液，105℃烘烤至斑点清晰，置于日光下检视。结合试验结果，最终确定展开系统为A氯仿-甲醇-冰醋酸-水(10∶4∶1∶1)，在此条件下色谱图斑点清晰、分离度较好、Rf重复性好。详见图1。

2.4 薄层色谱鉴别 按照2015版《中国药典》四部通则0502薄层色谱法进行试验，分别吸取上述对照品溶液和供试品溶液各4μL，点于硅胶G薄层板上(薄层板点样前105℃，活化30min)，以氯仿-甲醇-冰醋酸-水(10∶4∶1∶1)为展开剂，预饱和15min，展开15cm，取出晾干。喷以10%硫酸-乙醇溶液，105℃烘烤至斑点清晰，置于日光下检视。

2.4.1 不同品种鸡矢藤药材的薄层色谱鉴别 选择不同品种的鸡矢藤药材样品进行薄层色谱鉴别。供试品色谱中，在与对照品相应位置上，显同样颜色的斑点，毛鸡矢藤和鸡矢藤样品的薄层斑点的颜色、数量有所差别；鸡矢藤较毛鸡矢藤在Rf=0.63、0.59、0.53、0.48的薄层斑点颜色较深；斑点数目方面，鸡矢藤较毛鸡矢藤在Rf=0.69处斑点清晰，而毛鸡矢藤在Rf=0.69处基本无斑点，见图2。

2.4.2 不同产地鸡矢藤P.scandens的薄层色谱鉴别 选择不同产地鸡矢藤P.scandens样品进行薄层色谱鉴别。供试品色谱中，在与对照品相应位置上，显同样颜色的斑点，其中Rf=0.69的薄层斑点中，颜色差别较大，17、18和23样品斑点较浅，基本无；Rf=0.63的薄层斑点中，17和18样品的斑点颜色较浅；Rf=0.59的薄层斑点中，18样品基本没有斑点，其他产地均有，颜色偏浅；Rf=0.53的薄层斑点中，17和18样品的斑点颜色较浅；Rf=0.48的斑点薄层中，18样品基本没有斑点，17和23样品的斑点颜色较浅。不同产地的鸡矢藤P.scandens样品的斑点的颜色深浅有差异。见图3。

2.4.3 不同产地毛鸡矢藤P.scandensvar.tomentosa的薄层色谱鉴别 选择不同产地毛鸡矢藤P.scandensvar.tomentosa样品进行薄层色谱鉴别。供试品色谱中，在与对照品相应位置上，显同样颜色的斑点，其中Rf=0.63的薄层斑点，颜色深浅不一样，2、8和9样品的薄层斑点颜色较淡；Rf=0.59的薄层斑点，斑点颜色大致一样；Rf=0.53的薄层斑点中，2、8和9样品的薄层斑点颜色较浅；Rf=0.48的薄层斑点，斑点颜色大致一样，普遍较浅。不同产地的毛鸡矢藤P.scandensvar.tomentosa样品的斑点颜色深浅有所差异，但薄层色谱信息基本一致。见图4。

3 讨论

3.1 提取方法的考察 对冷浸法、超声提取法、加热回流法3种提取方法进行考察，以上提取方法得到的薄层色谱信息相同，故选择简单、方便及快速的超声提取法。

3.2 提取溶剂的考察 对水、40%乙醇、75%乙醇、无水乙醇、甲醇、丙酮6种溶剂进行考察，75%乙醇、甲醇提取溶剂得到的薄层色谱斑点较多且清晰，考虑到经济性和毒性，确定75%乙醇为提取溶剂。同时，考察对点样浓度、展开时间、温度、湿度、展距进行了考察，保证了色谱图斑点多且清晰。

3.3 显色剂的选择 对比了10%硫酸-乙醇溶液和5%香草醛-硫酸溶液的显色效果，10%硫酸-乙醇溶液显色后得到的色谱斑点多且清晰。

对不同品种和产地鸡矢藤药材进行薄层色谱鉴别，结果表明所建立的方法对鸡矢藤药材鉴别有较好的适应性和重现性。本研究显示，鸡矢藤在Rf=0.69处较毛鸡矢藤多1个斑点，且其他斑点颜色也较深，提示鸡矢藤比毛鸡矢藤可能含有更丰富的化学成分。不同产地毛鸡矢藤各产地的薄层信息基本一致；鸡矢藤各产地中17和18号样品较其他产地薄层信息差异较大，体现在斑点数目较少和斑点颜色较浅，提示不同产地可能对鸡矢藤化学成分的影响较大，但具体是哪些化学成分引起薄层色谱的差异，还需进一步研究。

[1]贾敏如，李星炜．中国民族药志要[M]．北京：中国医药科技出版社，2005：437-438

[2]四川省食品药品监督管理局．四川省中药材标准[M]．成都：四川科学技术出版社，2010：335-338．

[3]中国科学院中国植物志编辑委员会.中国植物志[M]．北京：科学出版社，1999：110-118．

[4]上海市卫生局．上海市中药材标准[M]．上海：上海市卫生局，1994：158．

[5]福建省食品药品监督管理局．福建省中药材标准[M]．福州：海风出版社，2006：133．

[6]徐金龙，刘雷，张巧艳，等．鸡屎藤的化学成分、药理活性及临床应用研究进展[J]．药学实践杂志，2011，29(6)：401-404．

[7]王新杰，缪刘萍，周海凤，等．鸡矢藤的研究进展[J]．世界临床药物，2012，33(5)：303-310．

TLC Identification and Application of National Folk Paederiae Herba

HU Mingxun CHEN Lin JIANG Yunbin WU Bing*YANG Jie LAN Yang MA Yuying*

School of Pharmacy, Chengdu University of Traditional Chinese Medicine/State Key Laboratory Breeding Base of Systematic Research, Development and Utilization of Chinese Medicine Resources, Chengdu 611137, China

Objective To establish TLC identification method of Paederiae Herba. Methods Paederiae Herba from different species and growth environment were identified by TLC on Silica-G-CMC-Na plate with developing solventchloroform-methanol-glacial acetic acid-water (10∶4∶1∶1).Paederoside was selected as reference substance. Results Based on the position and color of reference substance paederoside, there were corresponding spots in TLC of Paederiae Herba. Conclusion The developed method is accurate and simple, and can be used for quality control of Paederiae Herba.

Paederiae Herba; TLC; Paederoside

胡明勋(1992-)，男，汉族，硕士研究生，研究方向为中药品种、质量及资源开发研究。E-mail：1575130555@qq.com

吴兵(1966-)，男，汉族，实验师，研究方向为中药品种、质量及资源开发研究。E-mail：466945108@qq.com

马逾英(1985-)，女，汉族，学士，教授，博士生导师，研究方向为中药品种、质量及资源开发研究。E-mail：ma-yuying@126.com

R931

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1007-8517(2017)12-0024-04

2017-04-12 编辑：穆丽华)