1 214例急性呼吸道感染住院患儿9种病原体检测分析

王敏华

调查研究

1 214例急性呼吸道感染住院患儿9种病原体检测分析

王敏华

目的 分析急性呼吸道感染住院患儿病原体的特点，为临床早期病原学诊断和合理用药提供依据。方法 2014年5月至2015年7月宜兴市中医医院儿科收治住院的急性呼吸道感染患儿1 214例，采用间接免疫荧光法检测患儿血清中9种常见病原体IgM抗体，并对上述病原谱、病原流行情况等进行资料汇总分析。结果 1 214例急性呼吸道感染患儿中检出病原体IgM抗体阳性371例，阳性率30.5%，其中肺炎支原体阳性率最高，占总样本的16.8%，其次是乙型流感病毒(5.8%)和副流感病毒(2.7%)。205例患儿肺炎支原体混合其他1种或1种以上感染，占总混合感染的55.2%。肺炎支原体春夏季病毒检出率高于秋冬季，差异有统计学意义(P<0.008 3)。乙型流感病毒夏季病毒检出率高于秋季，差异有统计学意义(P<0.008 3)。1～3岁患儿肺炎支原体感染率均高于<1岁和>3岁患儿，差异有统计学意义(P<0.017)；1～3岁患儿乙型流感病毒感染率均高于<1岁和>3岁患儿，但差异无统计学意义(P>0.017)；不同年龄段副流感病毒感染率比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论 本院急性呼吸道感染住院患儿主要病原体是肺炎支原体、乙型流感病毒、副流感病毒；肺炎支原体合并其他病原体感染比较普遍；肺炎支原体和乙型流感病毒以夏季感染为主；1～3岁肺炎支原体感染率高。

急性呼吸道感染； 呼吸道病原体； 混合感染； 儿童

急性呼吸道感染是儿科最常见的疾病之一。随着抗生素的广泛使用，典型细菌感染的比例有所下降，而不典型病原体感染占相当大的比重。常见不典型病原体包括嗜肺军团菌、肺炎支原体、肺炎衣原体、Q热立克次体、腺病毒、呼吸道合胞病毒、甲型流感病毒、乙型流感病毒、副流感病毒等，且混合感染较常见。因此，及时确认病原体种类，能为临床早期病原体学的诊断和合理用药提供实验室依据。本文对1 214例住院急性呼吸道感染患儿采用间接免疫荧光法检测患儿血清中9种呼吸道病原体IgM抗体，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 临床资料 2014年5月至2015年7月宜兴市中医医院儿科收治住院的急性呼吸道感染患儿1 214例，其中男725例，女489例；年龄1个月至14岁，平均2.5岁，其中<1岁284例，1～3岁359例，>3～14岁571例；急性上呼吸道感染 182例，急性支气管炎653例，支气管肺炎379例。

1.2 诊断标准 参照《诸福棠实用儿科学》第7版中急性上呼吸道感染、急性支气管炎、支气管肺炎的诊断标准[1]。

1.3 纳入标准 (1)符合急性上呼吸道感染、急性支气管炎、支气管肺炎的诊断标准；(2)年龄1个月至14岁；(3)患儿家属知情同意。

1.4 排除标准 (1)心脑肝肾系统严重疾病者；(2)精神疾病者。1.5 检测方法 采用间接免疫荧光法联合检测血清9种常见病原体IgM抗体。采用西班牙Vircell公司呼吸道病原体IgM抗体检测试剂盒，由郑州安图绿科生物有限公司提供，并且在有效期内使用，操作严格按照说明书进行。荧光显微镜为Olympus 2BX60。

1.6 统计学方法 采用SPSS 11.0软件进行统计学处理，多组计数资料采用χ2检验，组间两两比较采用χ2分割法，P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 9种呼吸道病原体检测结果 1 214例患儿9种呼吸道病原体检出中，其中阳性率最高的是肺炎支原体，其次是乙型流感病毒，再次是副流感病毒；单一感染中嗜肺军团菌、Q热立克次体、肺炎衣原体、甲型流感病毒均未检出。见表1。

2.2 混合感染检测结果 1 214例呼吸道感染患儿血清标本，371例呼吸道病原体IgM抗体阳性，阳性率达30.5%，混合感染占53.4%。见表2。2.3 不同季节本地区常见病原体检出情况 不同季节肺炎支原体、乙型流感病毒比较差异有统计学意义(P<0.05)。肺炎支原体春夏季病毒检出率高于秋冬季，差异有统计学意义(χ2=17.3，9.1，35.4，23.4，P<0.008 3)。乙型流感病毒夏季病毒检出率高于秋季，差异有统计学意义(χ2=11.2，P<0.008 3)。见表3。

表1 1 214例9项病原体检出情况[n(%)]

表2 1 214例患儿混合感染病阳性数情况(%)

表3 肺炎支原体、乙型流感病毒不同季节检出情况[n(%)]

2.4 不同年龄本地区常见病原体的检出情况 见表4。

表4 不同年龄肺炎支原体、乙型流感病毒、副流感病毒检出情况[n(%)]

表4结果表明，1～3岁患儿肺炎支原体感染率均高于<1岁和>3岁患儿，差异有统计学意义(χ2=24.48,40.19,P<0.017)；1～3岁患儿乙型流感病毒感染率均高于<1岁和>3岁患儿，但差异无统计学意义(χ2=4.94,5.17,P>0.017)；不同年龄段副流感病毒感染率比较差异无统计学意义(P>0.05)。

3 讨论

急性呼吸道感染是儿科住院患者最常见的疾病，90%的上呼吸道疾病和部分的下呼吸道疾病是由细菌以外的病原体引起的。其中以非典型病原体最为常见，如嗜肺军团菌、肺炎支原体、肺炎衣原体、Q热立克次体、腺病毒、呼吸道合胞病毒、甲型流感病毒、乙型流感病毒、副流感病毒等微生物，病原学不仅复杂且常常混合存在[2]。非典型病原体感染的临床症状不典型，极易被误诊，甚至忽视，从而导致抗生素的滥用、疾病的延误[3]及医源性交叉感染的上升。经相关的统计学调查分析发现，儿童肺炎支原体感染的发生占各种肺炎的比例最高，这一比例可以超过10%[4]。所以对非典型病原体的病原学及时、准确的诊断是治疗急性呼吸道感染的一个重要环节和首要手段。非典型病原菌的检测方法种类较多，如培养法、血清学检测法和核酸检测法等，但各有其优缺点。培养法虽然是诊断的金标准，但因其培养困难，培养时间长，培养技术条件要求高，检测费用昂贵等，故在临床上推广应用比较困难；大部分感染在疾病早期，即大量使用抗菌药物，故培养阳性率低[5]。本研究采用间接免疫荧光法法，能直接、快速检测9种常见不典型病原体IgM抗体，对2种或2种以上病原体混合感染也能同时检测；而且该方法通过吸附剂对血清进行预处理(将IgG抗体沉淀),从而减少了IgG抗体非特异性结合对试验的干扰，提高了方法的特异性和敏感性。即本方法简便、快速、成本低廉，敏感性和特异性高，适合儿童急性呼吸道感染病原体的快速诊断。

检测结果显示，本院住院患儿1 214份血清标本中，9种呼吸道病原体IgM抗体阳性的有371例，其阳性率为30.5%，与陈铮铮等[6]研究一致。但低于曹科等[7]的结果。可能与不同地区病原体的流行特征、人群易感性、研究对象、研究方法及不同季节等因素有关。本地区肺炎支原体、乙型流感病毒、副流感病毒是引起急性呼吸道感染的主要和常见病原体，其感染率分别是16.8%、5.8%、2.7%，略低于俞晓春等[8]研究，这可能与地域差异、检测时间等有关。单一感染以肺炎支原体感染为主，2种或2种以上病原体感染亦以肺炎支原体混合其他感染为主，这可能是机体受到肺炎支原体感染后，造成正常机体免疫防御系统功能紊乱，引发迟发型变态反应，使机体受到损害，所以易受到其他病原体的入侵[9]。本研究发现，肺炎支原体感染一年四季均较高，但夏季为高，这与杨震[10]研究的一致。乙型流感病毒流行特点存在季节差异，一般以冬、春季高发，夏季、秋季偏低，但本研究发现乙型流感病毒感染以夏季为主，与刘德贝等[11]研究不一致，这可能与地域差异、不同年份病原体流行季节不同有关。从各年龄组病原体阳性率比较可知，肺炎支原体、乙型流感病毒、副流感病毒发病率<1岁组明显低于1～3岁和>3岁组，与曹科等[7]研究一致。这可能与以下原因有关：(1)<1岁的婴幼儿活动范围小；(2)病原体接触的机会减少；(3)现在提倡母乳喂养，机体从母体获得相应的抗体。

综上所述，急性呼吸道感染的病原学因不同地区、年份、季节和年龄而有所不同。本文通过对宜兴市2014年5月至2015年6月的住院患儿急性呼吸道感染病原学监测，为本地区儿童呼吸道感染的病原学和流行病学研究积累数据，为在不同季节进行有效的病原体预防控制提供理论依据，给临床诊断和治疗及防止抗生素滥用提供了可靠的依据。

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[10]杨震.昆明市儿童肺炎支原体肺炎的流行病学调查[J].实用预防医学，2012，19(12)：1815-1816.

[11]刘德贝，曹艳林.常德地区小儿呼吸道病毒性感染病原学分析[J].检验医学与临床，2012，9(18)：2286-2287.

(本文编辑：刘颖)

Detection and analysis of 9 pathogens in hospitalized children with acute respiratory infection in 1 214 cases

WANGMinhua.
YixingTraditionalChineseMedicineHospital,Yixing214200,China

Objective To analyze the pathogen characteristics among hospitalized children with acute respiratory infections(ARI) and provide the basis for early etiology diagnosis and rational use of drugs.Methods Total1y 1 214 cases of hospitalized ARI children from May 2014 to July 2015 were included as research subjects. Indirect immunofluorescence assay(IFA) was applied to detect serum IgM antibodies of nine kinds of common pathogens, and the above-mentioned pathogen spectrum and prevalence state were analyzed.Results Among 1 214 cases of ARI children, positive rate of pathogen IgM antibody was 30.5% (371 cases). Positive rate of mycoplasma pneumoniae(MP) was the highest(16.8%), followed by influenza B virus(Flu B)(5.8%) and parainfluenza virus(PIV)(2.7%).A total of 205 cases of children had MP infection mixed with another one kind or more than one kind of infection, accounting for 55.2% of total mixed infections. There was statistical significance on infection rate of MP between different seasons (P<0.008 3). The number of 1 to 3-year old children with pneumonia mycoplasma and hepatitis b virus infection was higher than that of children < 1 year old and > 3 years old(P<0.017). There was statistical significance on infection rate of Flu B between different seasons(P<0.008 3).The number of 1 to 3-year old children with flu viruses infection was higher than that of children < 1 year old and > 3 years old, but there was no statistically significant difference(P>0.017).Conclusion The major pathogens of hospitalized ARI children in our hospital are MP, Flu B and PIV; the mixed infection of MP with other pathogens is relatively common; MP and Flu B infections mainly occur in summer; the infection rate of MP in children between 1 and 3 years old is high.

Acute respiratory infections； Pathogen； Mixed infection； Child

214200 江苏 宜兴，宜兴市中医医院儿科

王敏华(1980-)，女,医学硕士，主治医师。研究方向：小儿呼吸系统疾病的诊治，E-mail：wangminhua353@163.com

10.3969/j.issn.1674-3865.2017.02.028

R725.6

A

1674-3865(2017)02-0175-03

2016-10-21)