谭俊锋
[摘要] 目的 分析EAST-6特异性T淋巴细胞在结核性胸膜炎诊断中的临床价值。 方法 选取2014年8月~2016年7月我院收治的28例胸腔积液患者为研究对象,按照患者的皮肤结核菌素实验结果,将其分为结核性胸膜炎组(16例)和肿瘤性胸膜炎组(12例),采用酶联免疫斑点测定法(Elispot)对两组患者胸腔积液及外周血中T淋巴细胞内早期分泌抗原靶蛋白6(EAST-6)进行检测,并分析EAST-6对诊断结核性胸膜炎的应用价值。 结果 通过检测发现,结核性胸膜炎组患者的胸腔积液及外周血中T淋巴细胞内EAST-6的阳性检出率分别为87.5%及81.25%,均明显高于肿瘤性胸膜炎组的8.33%及8.33%,差异有统计学意义(P<0.05);胸腔积液中T淋巴细胞内EAST-6临床诊断的特异度和敏感度分别为84.61%和93.33%,外周血中T淋巴细胞内EAST-6的临床诊断的特异度和敏感度分别为78.57%和92.86%,EAST-6诊断结核性胸膜炎的特异度和敏感度较高。 结论 EAST-6特异性T淋巴细胞在结核性胸膜炎诊断中具有较高的特异性,为临床诊断结核性胸膜炎提供参考依据。
[关键词] EAST-6;结核性胸膜炎;诊断;临床价值
[中图分类号] R521.7 [文献标识码] A [文章编号] 2095-0616(2017)07-207-04
Study on EAST-6 specific T lymphocytes in the diagnosis of tuberculous pleurisy
TAN Junfeng
Department of Respiratory,Foshan Gaoming District People's Hospital, Foshan 528500,China
[Abstract] Objective To analyze the clinical value of EAST-6 specific T lymphocytes in the diagnosis of tuberculous pleurisy. Methods 28 patients with pleural effusion who were admitted to or hospital from August 2014 to July 2016 were selected as the research object.They were allocated to the tuberculous pleurisy group with 16 cases and the cancerous pleurisy group with 12 cases according to results of tuberculin skin tests.Enzyme linked immunospot assay (ELISPOT) were used to detect early secreting antigenic target-6(EAST-6) in T lymphocytes of pleural effusion and peripheral blood and to analyze the applicative value of EAST-6 in the diagnosis of tuberculous pleurisy. Results By testing,it is found that the positive rates of EAST-6 in T lymphocytes of pleural effusion and peripheral blood of patients with tuberculous pleurisy were respectively 87.5% and 81.25%,both significantly higher than those of the cancerous pleurisy group 8.33% and 8.33% (P<0.05).The specificity and sensitivity of clinical diagnosis of EAST-6 in T lymphocytes of pleural effusion were respectively 84.61% and 93.33% while those of the peripheral blood were respectively 78.57% and 92.86%.In addition,specificity and sensitivity of EAST-6 in diagnosis of tuberculous pleurisy were higher. Conclusion EAST-6 specific T lymphocytes in the diagnosis of tuberculous pleurisy HAS high specificity and it can provide the reference for the clinical diagnosis of tuberculous pleurisy.
[Key words] Early secreting antigenic target-6;Tuberculous pleurisy;Diagnosis;Clinical value
結核性胸膜炎是由结核杆菌引起的胸膜炎症,已成为临床较为常见的结核病[1],但由于目前缺乏对该病诊断的特异性指标,因此结核性胸膜炎的早期诊断和鉴别仍成为临床研究的重点课题[2]。有研究报道,EAST-6为结核分枝杆菌感染早期分泌的蛋白,具有高度的特异性[3],本院通过采用酶联免疫斑点测定法对结核性胸膜炎患者胸水及外周血中T淋巴细胞内EAST-6进行检测,取得较好的效果,现将研究结果报道如下。
1 资料与方法
1.1 一般资料
选取我院于2014年8月~2016年7月期间收治的胸腔积液患者28例;对所有患者行超声引导下胸膜活检联合胸水结核分歧杆菌培养[4],并按照检测结果将患者分为结核性胸膜炎组和肿瘤性胸膜炎组,病例数分别为16例和12例。结核性胸膜炎组男10例、女6例;年龄38~72岁,平均(44.6±5.3)岁;肿瘤性胸膜炎组男7例、女4例;年龄38~72岁,平均(44.7±5.1)岁;淋巴瘤伴胸膜转移患者2例,肺癌伴胸行膜转移患者5例,卵巢癌伴胸膜转移1例,乳腺癌伴胸膜转移3例,胃癌伴胸膜炎转移1例。两组患者年龄、性别比较差异无统计学意义(P>0.05)。具有可比性。
1.2 研究方法
于清晨采集所有患者胸腔积液100mL,其中40mL用于常规生化指标检验,另60mL经每分钟1800转离心处理10min后,取底层沉渣进行涂片,经常规处理后,将涂片置于-38℃的冰箱中密封备用。另外于清晨采集所有患者外周静脉血10mL,其中3mL用于生化指标检测,另7mL经离心处理,分离外周血T淋巴细胞,并取2mL血清作为检测样本。对所有患者的胸腔积液及外周血进行常规生化指标检测,采用酶联免疫斑点测定法(Elispot)对两组患者胸腔积液及外周血中T淋巴细胞内早期分泌抗原靶蛋白6(EAST-6)进行检测,并分析EAST-6对诊断结核性胸膜炎的应用价值。
1.3 统计学处理
采用SPSS18.5软件进行统计分析,计量资料采用t检验,计数资料采用χ2检验,P<0.05为差异有统计学意义。
2 结果
2.1 两组胸腔积液T淋巴细胞内EAST-6的阳性检测比较
结核组和肿瘤组患者胸腔积液中T淋巴细胞内早期分泌抗原靶蛋白6(EAST-6)检测出的阳性例数分别为14例和1例,阳性检测率分别为87.5%、8.33%,经统计学分析,两组差异有统计学意义(P<0.05),见表1。
2.2 外周血T淋巴细胞内EAST-6的阳性检测比较
结核组患者的外周血中T淋巴细胞内EAST-6的阳性例数为13例,检出的阳性率为81.25%,而肿瘤组患者的外周血中T淋巴细胞内EAST-6的阳性例数为1例,检出的阳性率为8.33%,经统计学分析,两组差异有统计学意义(P<0.05),见表2。
2.3 EAST-6的临床诊断价值比较
胸腔积液中T淋巴细胞内EAST-6临床诊断的特异度和敏感度分别为84.61%、93.33%,阳性预测值和阴性预测值分别为87.50%、91.67%,阳性似然比和阴性似然比分别为6.06、0.08,约登指数为0.77。而外周血中T淋巴细胞内EAST-6的临床诊断特异度为78.57%,敏感度为92.86%,阳性预测值为81.25%,阴性预测值为91.67%,阳性似然比和阴性似然比分别为4.33和0.09,约登指数为0.77,经统计学分析差异无统计学意义(P>0.05),见表3,结果提示胸腔积液与外周血中T淋巴细胞内EAST-6在诊断结核性胸膜炎中的特异度和敏感度均较高。
2.4 两组患者生化检验结果比较
对结核组和肿瘤组患者生化指标进行检测,发现两组患者在LDH及CEA等指标方面的差异有统计学意义(P<0.05),见表4。
3 讨论
近年来,结核性胸膜炎已成为胸腔积液中较为常见的病因[5],它是由结核菌及其代谢产物进入正处于高度过敏状态的机体胸膜腔中所引起的胸膜炎症[6-7]。当机体处于高度变态反应状态,结核菌及其代谢产物侵入胸膜,则引起渗出性胸膜炎[8]。结核性胸膜炎病变早期表现为胸膜充血,血管通透
性改变,中性粒细胞浸润,随着病情进展,以淋巴细胞浸润为主,胸膜表面有纤维素性渗出,继而出现浆液渗出[9]。结核性胸膜炎感染的途径有三个:肺内结核病变通过胸膜直接蔓延;结核分枝杆菌经肺门、纵隔淋巴结、淋巴管到达胸膜;通过血行播散到胸膜[10]。目前,临床对于结核性胸膜炎的早期诊断主要通过胸膜活检、胸腔积液检验、胸部CT检查等检查方法[11],而胸膜活检病理验证和胸腔积液检验出结核分枝杆菌作为临床诊断结核性胸膜炎的金标准因存在创伤性大、檢测阳性率低等缺点为结核性胸膜炎的早期诊断及治疗带来困难[12]。结核分枝杆菌是引起结核病的病原菌,当机体被该病菌感染后,机体会出现该病菌的抗原,而宿主免疫功能状态不会对结核菌抗原的临床检验造成干扰,因此,可将结核菌抗原作为结核分枝杆菌存在的依据[13]。
EAST-6即早期分泌抗原靶蛋白6,是结核分枝杆菌在感染早期分泌出的一种抗原,常存在于感染细胞的吞噬小体内,或者以游离的形式存在于培养基中[14]。有研究报道,早期分泌抗原靶蛋白6在感染的T淋巴细胞内生长时的表达较其在普通培养基生长时表达的水平明显较高[15],正因如此,检测T淋巴细胞内早期分泌抗原靶蛋白6较检测细胞外早期分泌抗原靶蛋白6的特异度会更高。本院通过对28例胸腔积液患者胸水中及外周血中T淋巴细胞内早期分泌抗原靶蛋白6进行研究发现,EAST-6特异性T淋巴细胞在结核性胸膜炎诊断中具有较高的特异度和敏感度。
研究发现,与肿瘤组患者比较,结核组患者胸腔积液中T淋巴细胞内EAST-6检测的阳性病例数14例及阳性率87.0%均明显较高;同时研究还发现结核组患者外周血中T淋巴细胞内EAST-6检测的阳性例数为13例,阳性率为81.25%,明显高于肿瘤组水平。结果提示,EAST-6在结核性胸膜炎中的表达较高。但在试验中还发现,在胸腔积液和外周血中T淋巴细胞内EAST-6检测阴性结果分别有2例和3例,可能是由于抗原阳性细胞数较少而导致的。
研究表明,胸腔积液与外周血中T淋巴细胞内EAST-6在诊断结核性胸膜炎中的特异度和敏感度均较高,特异度分别为84.61%和78.57%,敏感度分别为93.33%和92.86%。研究结果提示,EAST-6在结核性胸膜炎诊断中具有较高的临床价值。
综上所述,EAST-6特异性T淋巴细胞在结核性胸膜炎诊断中具有较高的特异性,对于临床鉴别和诊断结核性胸膜炎提供参考依据。因此,EAST-6作为一项诊断结核性胸膜炎的新型技术具有较好的临床应用价值[16]。由于本次研究的样本量较少,研究结果可能与其他学者报道的不一致。在今后的工作中,本院会加大样本量的搜集,进行深入探讨。
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(收稿日期:2017-01-03)