60例男性无精子症患者睾丸活检的病理研究

王晓燕，李家丽，樊元春Δ

1.成都医学院第一附属医院 病理科(成都 610500);2.益阳市妇幼保健院 病理科(益阳413000)

·论著·

60例男性无精子症患者睾丸活检的病理研究

王晓燕1，李家丽2，樊元春1Δ

1.成都医学院第一附属医院 病理科(成都 610500);2.益阳市妇幼保健院 病理科(益阳413000)

目的 探讨男性无精子症患者睾丸活检的病理价值和意义。方法 回顾性分析2012年1月至2017年1月，在成都医学院第一附属医院泌尿外科诊治的60例男性无精子症患者的睾丸活检组织切片，HE染色观察病理变化；免疫组化染色观察IgA、IgG、IgM的表达情况。结果 60例男性无精子症患者睾丸活检标本可分为5种类型：活检正常型占6.67%(4/60)，生精细胞剥落和排列紊乱型占13.33%(8/60)，生精功能低下型占18.33%(11/60)，成熟障碍型占26.67%(16/60)，混合损害型占35.00%(21/60)；其中，混合损害型中唯支持细胞综合征占6.67%(4/60)，克氏综合征占10.00%(6/60)，严重生精障碍占18.33%(11/60)；睾丸活检组织免疫组化中IgG阳性率81.7%(49/60)，IgA阳性率68.3%(41/60)，IgM阳性率61.7%(37/60)。结论 睾丸活检能直接评价睾丸生精功能和生精功能障碍程度，对不育症患者的治疗和预后判断有重要意义，且无精子症患者睾丸病变与体液自身免疫紊乱有较大关联。

男性无精子症；睾丸活检；病理研究

无精子症患者在男性不育患者中占有较大比例，其病因有睾丸性、睾丸前性和睾丸后性等，其中睾丸性无精子症病因表现复杂且多样，如睾丸外伤、炎症、睾丸血管病变等。临床上睾丸组织活检对确定是否为睾丸性原因，睾丸损伤类型与程度及病因判断和治疗均有重要意义[1]。本研究通过对60例男性无精子症患者睾丸组织的病理学分型及免疫组化染色结果的回顾性分析，探究男性无精子症的病因，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 临床资料

选取2012年1月至2017年1月在成都医学院第一附属医院泌尿外科进行诊治的男性无精子症患者100例，纳入标准：1)根据WHO《人类精液检查与处理实验室手册》(第5版)，所有患者均禁欲5～7 d后，手淫取精液，显微镜下检查3次以上证实无精子或严重少精子；2)患者精液中精浆果糖量正常。排除标准：隐睾等先天性睾丸发育不良者。本研究共纳入60例男性无精子症患者，年龄25～40(29.7±2.8)岁；不育时间2～12(5.7±1.5)年。

1.2 方法

所有患者均经泌尿外科医师检查性征和副性征等，包括外生殖器发育情况，睾丸和附睾的大小、质地，观察喉结和阴毛分布情况。B超检测睾丸横径、纵径和前后径。局麻下进行睾丸活检手术，切开睾丸处皮肤约1 cm，分离后取出4×3×2 mm3睾丸组织，采用Bouin氏液进行固定，常规石蜡包埋、切片，HE染色后，中性树胶封片，在光学显微镜下观察生精小管的组织学形态；对睾丸组织病理性改变进行分类，计算每种病理分型的百分率，并进行95%可信区间比较。另对每例睾丸活检组织行免疫组织化学SP法染色，观察IgG、IgA、IgM蛋白的表达情况。

1.3 统计学方法

2 结果

2.1 无精子症患者HE染色下病理分型及数量比较

60例睾丸活检组织切片经2位以上高年资病理医师诊断后，发现其分为5种类型(图1、图2)：正常型、生精细胞剥落和排列紊乱型、生精功能低下型、成熟障碍型、混合损害型，其中混合损害型数量最多，占35.00%(21/60)(表1)。睾丸活检正常型：镜下见曲细精管生精细胞数量、形态正常；生精细胞剥落和排列紊乱型：可见生精细胞排列不规则，并伴大量细胞脱落致曲细精管管腔堵塞；生精功能低下型：镜下形态为生精小管壁内可见不同发育阶段的生精细胞，比例基本正常，但总体数量减少，生精上皮变薄；成熟障碍型：生精细胞比例失常，精原细胞及精母细胞可见，精子细胞及精子少见；混合损害型：表现多样，以严重生精障碍型最多见，占总数的18.33%(11/60)。其中唯支持细胞综合征(sertoli-cell-onlysyndrome ,SCOS)表现为曲细精管内生精细胞完全缺如,生精上皮仅由支持细胞组成,支持细胞显著增生,排列疏松、紊乱,部分曲细精管广泛纤维化、玻璃样变性、皱缩、塌陷甚至管腔闭锁。克氏综合征则无生精细胞，基底膜增厚，间质细胞过度增生，精小管内仅存支持细胞，无胚细胞存在，局灶精小管纤维化和透明样变(表2)。

图1 活检正常型

病理类型例数构成比/%95%CI活检正常型46.672.46～23.13生精细胞剥落和排列紊乱型813.333.41～21.35生精功能低下型1118.339.57～32.14成熟障碍型1626.679.63～24.28混合损害型2135.0023.57～45.35合计60100.00

表2 混合损害型分布情况比较

图2 活检异常型

2.2 睾丸活检组织免疫组化染色结果比较

睾丸活检组织免疫组化中IgG、IgA和IgM蛋白均表达于细胞质中，阳性表达率分别为81.7%(49/60)、68.3%(41/60)和61.7%(37/60)，组间比较采用2检验，IgG、IgA和IgM阳性率比较，差异无统计学意义(P>0.05)(表3)。

表3 睾丸活检组织免疫组化染色结果比较[n(%)]

图3 免疫组化结果

3 讨论

无精子症在临床上可分成梗阻性和非梗阻性两大类型，梗阻性是由于输精管道缺如或输精管阻塞导致精子不能通过输精管排出；而非梗阻性则是由于生精细胞分化或生精细胞变形等引起生精障碍，如双侧隐睾、精索静脉曲张等。

睾丸活检不仅能对生精功能有相对准确的评价，且对不育病因的判断及不育症的治疗具有重要价值。本研究60例男性无精子症患者睾丸活检病理结果显示，4例患者活检正常，推测其不育症原因是精道精囊后前病变阻塞造成的结果。在不育症病理分型上，以睾丸混合损害型最高，占35.00%，与前期关于无精子症睾丸活检病理研究[2-3]报道结论类似，其在病理表现为生精上皮细胞变薄，生精细胞数目严重减少，局灶曲细精管或间质细胞纤维化及玻璃样变性。目前，此类无精子症患者在治疗上仍无有效方法，且疗效较差，但有助于临床诊断，可在治疗方面做有力参考依据。生精细胞剥落和排列紊乱型是由于生精细胞脱落造成输精管梗阻的类型，故针对病因治疗或可恢复生育能力[4]；生精功能低下型和成熟障碍型患者能够通过激素治疗或者辅助生殖技术使其配偶受孕[5]，目前针对此类无精子症患者采用卵泡浆内单精子注射技术，将不成熟生精细胞作为配子可以使卵子受精并发育成胚胎[6-7]。因此，无精子患者睾丸活检病理组织学评估对临床指导不育症治疗有重要价值。

研究[8-10]发现，无精子症患者血清抗精子自身抗体大多为阳性，可见自身免疫性因素与睾丸病变所致的无精子症关系密切。本研究免疫组化染色结果显示，IgG、IgA和IgM阳性率分别为81.7%、68.3%和61.7%，推测无精子症病因有以下两种可能：1)由于机体产生自身抗体及其免疫复合物造成曲细精管基底膜沉积，造成血-生精屏障破坏，曲细精管管壁增厚，伴纤维化，造成其内环境改变，生精细胞因营养不足而变性[11]；2)抗体及其复合物在睾丸间质血管壁上沉积，造成血管壁损伤，导致血管壁增厚及纤维化，进而导致微循环障碍，加重曲细精管生精细胞和支持细胞缺氧变性，生精细胞坏死脱落[12-13]。

综上所述，睾丸组织活检切片可有效评价患者生精功能及其障碍程度，对不育症患者的治疗和预后判断有重要意义。免疫组化染色结果分析显示，无精子症患者睾丸病变多由体液自身免疫紊乱导致，通过改善患者免疫功能状态，拮抗抗原抗体复合物沉积，改善睾丸组织内环境及采用各种辅助生殖技术或可达到助孕目的[14-15]。在睾丸组织取材方面，切开睾丸白

膜后避免因止血而过度挤压组织，大小以4×3×2 mm3为宜，避免切取组织过大影响睾丸功能[16]。

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The Pathological Study on the Testicular Biopsy of 60 Azoospermia Patients

Wang Xiaoyan1,Li Jiali2,Fan Yuanchun1△.

1.Department of Pathology,The First Affiliated Hospital of Chengdu Medical College,Chengdu 610500,China; 2.Department of Pathology,The Maternal and Child Health Care Hospital of Yiyang City,Yiyang 413000,China

Objective To investigate the pathological value and significance of testicular biopsy in azoospermia patients.Methods The histological sections of testicular biopsy of the 60 azoospermia patients treated from January of 2012 to January of 2017 in The First Affiliated Hospital of Chengdu Medical College were analyzed retrospectively.The HE staining was used to observe the pathological changes and the immunohistochemical staining was adopted to detect the expressions of IgA,IgG and IgM.Results The testicular biopsy specimens of the 60 cases could be divided into five types including the type of normal specimens (6.67%),the type of spermatogenic cell spalling and disorganizing (13.33%),the type of spermatogenic dysfunction (18.33%),the type of dysmaturity (26.67%),and the type of mixed damage (35.00%).In the type of mixed damage,the sertoli cell-only syndrome accounted for 6.67%,the klinefelter syndrome accounted for 10%,and the severe spermatogenic dysfunction accounted for 18.33%.The results of the immunohistochemical staining showed that the positive rates of IgG,IgA and IgM were 81.7%,68.3% and 61.7% respectively.Conclusion The Testicular biopsy can be used directly to evaluate the testicular spermatogenesis and the degree of spermatogenic dysfunction,which is of importance for the treatment and prognosis of infertile patients.In addition,the testicular lesions of azoospermia patients are correlated closely with their humoral autoimmune disorder.

Azoospermia; Testicular biopsy; Pathological study

http://kns.cnki.net/kcms/detail/51.1705.R.20170502.1628.006.html

10.3969/j.issn.1674-2257.2017.03.019

R698.2

A

△通信作者：樊元春，E-mail:1521124905@qq.com