血清IL-6和TNF-α水平与结肠癌病程的相关性

张鹏飞 张玉军 朱振龙 安永辉 陈进军

(承德市中心医院重症医学科，河北 承德 067000)

血清IL-6和TNF-α水平与结肠癌病程的相关性

张鹏飞 张玉军1朱振龙2安永辉3陈进军4

(承德市中心医院重症医学科，河北 承德 067000)

目的 探讨不同病理分期结肠癌病人血清中的白细胞介素(IL)-6和肿瘤坏死因子(TNF)-α水平及其与结肠癌病理分期的相关性。方法 结肠癌患者168例，其中男88例，女80 例，结肠癌Ⅰ期44例，Ⅱ期43例，Ⅲ期40例，Ⅳ期41例。此外选取健康对照40例，所有入组者血清IL-6和TNF-α水平运用酶联免疫吸附法(ELISA)检测，统计分析血清中IL-6、TNF-α水平和结肠癌病程分级的相关性。结果 结肠癌Ⅰ期患者血清中的IL-6、TNF-α水平明显高于对照组(P<0.01)。IL-6及TNF-α水平与结肠癌病程具有正相关。结论 血清中IL-6、TNF-α水平在结肠癌患者中的水平较正常人明显升高，且随着结肠癌病程增加，其水平亦明显升高，因此，血清中IL-6、TNF-α水平可作为筛选和评估结肠癌预后的重要指标。

结肠癌；白细胞介素-6；肿瘤坏死因子-α

结肠癌患者的5年生存率，仅约50%，较低的生存率主要是由于缺乏有效的预防措施和早期诊断率低〔1〕。研究发现在结肠癌中许多炎症信号通路如核转录因子(NF-κB)信号通路被异常激活〔2〕，同时流行病学研究发现在应用非甾体类抗感染药(NASIDs)人群中结肠癌的发病率比较低〔3〕，表明抑制炎症可能为预防结肠癌的重要途径。本文旨在探讨血清中白细胞介素(IL)-6和肿瘤坏死因子(TNF)-α水平与结肠癌病程的相关性。

1 对象和方法

1.1 一般资料 2012年5月至2015年5月在承德市中心医院住院的结肠癌患者168例，其中男88例，女80例，年龄34～75〔平均(43.22±10.55)〕岁，均经过活检和病理诊断分级，其中肿瘤的分期和分级参照美国癌症联合委员会/国际抗癌联盟(AJCC/UICC)颁布的结直肠癌的肿瘤分期和分级标准。具体病人的分级分期和例数见表1。所有患者病情稳定，无合并肿瘤出血、肠穿孔、肠梗阻、急慢性感染，未使用糖皮质激素、抗过敏药物以及自身免疫性炎症抑制剂，且近3个月无输血史和疫苗接种史。本院接收健康志愿者40例为正常对照组，男22例，女18例，年龄35～70〔平均(42.10±19.85)〕岁，近期未有急慢性感染、自身免疫性疾病等炎症性疾病，并给予结直肠癌、家族性腺瘤性息肉病、腺瘤性息肉癌、溃疡性结肠炎、遗传性非息肉病性结肠癌等的筛查试验，排除患有肠道疾病的志愿者。免费提供腹部、盆腔的全面B超和CT检查。同时健康志愿者近期未使用糖皮质激素、抗过敏药物以及自身免疫性炎症抑制剂，且近3个月无输血史和疫苗接种史。两组均签署知情同意书，该研究方案已经通过医院伦理委员会审批。所有参与者于早晨空腹时抽血约4 ml，分离血清，置-80℃冰箱保存，用酶联免疫吸附法(ELISA)检测。

表1 所有参与者的年龄和性别分布(n)

1.2 IL-6、TNF-α检测方法 所有参与者血清中IL-6、TNF-α的含量检测均采用ELISA 法，IL-6检测试剂盒和人TNF-α检测试剂盒均购自南京建成生物科技有限公司。这两个细胞因子的检测原理均双抗体夹心法，微孔板中分别包被有IL-6和TNF-α抗体，抗体被制作成固相抗体，血清中的IL-6、TNF-α与微孔中的抗体特异性结合，再与辣根过氧化物酶(HRP)标记的IL-6抗体或HRP标记的TNF-α抗体结合，最终形成的抗体-抗原-HRP标记抗体复合物，当加入底物时该复合物与底物反应即显色。此时用酶标仪在450 nm波长下测定吸光度，因此微孔中显色的深浅和样品中的IL-6、TNF-α呈正相关，因此通过标准曲线计算人血清中IL-6、TNF-α的浓度。

1.3 统计学方法 应用SPSS17.0软件进行t检验、单因素回归分析。

2 结 果

2.1 对照组和结肠癌Ⅰ期血清中IL-6、TNF-α水平比较 结肠癌Ⅰ期患者血清中的IL-6、TNF-α水平〔(19.25±5.71)pg/ml、(23.46±8.18)pg/ml〕明显高于对照组〔(3.21±1.27)pg/ml、(5.21±1.36)pg/ml，均P<0.01〕。

2.2 结肠癌的病程和血清中IL-6、TNF-α水平的相关性 与对照组相比，IL-6、TNF-α在结肠癌患者血清中的水平明显升高，且结肠癌的病程越高，血清中IL-6、TNF-α水平越高。对照组、Ⅰ期、Ⅱ期、Ⅲ期、Ⅳ期分别赋值为0，1，2，3，4，然后利用多重线性回归分析模型对病程和炎症因子IL-6、TNF-α水平进行Logistic回归分析，IL-6、TNF-α水平与结肠癌病程均具有正相关关系(b=1.57，1.81；r=0.481，0.630；P<0.05或P<0.01)。见表2。

表2 所有参与者血清中IL-6、TNF-α水平比较

3 讨 论

结肠癌的发病率在中国多个地区呈迅速上升的趋势，且患者在发现时多已经出现了血行转移和淋巴转移，其中肝脏和胃最常发生转移的脏器〔4〕。早期发现、早期治疗已成为降低结肠癌死亡率最根本的方法。

通常情况下，肿瘤由于生长速度较快，常发生中心性坏死，坏死组织分泌化学性趋化因子，引起单核细胞和巨噬细胞在肿瘤坏死部位异常聚积，炎症细胞分泌更多的炎性因子〔5〕，其干扰正常的肠道细胞的物质和能量代谢，并最终导致正常细胞恶变或凋亡。研究显示炎症性肠病中溃疡性结肠炎患者患结肠癌的风险比一般人群高2.75倍，克罗恩病患者患结肠癌的风险比一般人群高2.64倍〔6〕。炎症性肠病最终多进展为结肠癌，这与自身免疫功能的紊乱以及炎症细胞的异常激活有关。

促炎症因子IL-6和TNF-α由激活的巨噬细胞和单核细胞分泌并释放入血。血清中IL-6和TNF-α水平不仅作为结肠癌的一个重要危险因素〔7〕，研究还发现血清中IL-6和TNF-α水平较高的结肠癌患者预后多较差〔8〕。Poutahidis等〔9〕在基础实验研究中发现用IL-6抗体和TNF-α抗体竞争性结合小鼠体内的IL-6和TNF-α，可以显著改善小鼠中溃疡性结肠炎的进展和裸鼠中的结肠癌的转移。同时，在人群研究中发现应用免疫调节剂可以显著降低结肠癌的发病率〔10〕。这些研究均提示下调IL-6和TNF-α的炎症作用可抑制结肠癌的侵袭、转移。

本研究表明血清中IL-6、TNF-α水平可以作为结肠癌筛查的一个指标，当患者血清中IL-6、TNF-α水平的水平达到较高水平时，应引起足够的重视。其次可以通过检测血清中IL-6、TNF-α的水平，评估结肠癌的预后和侵袭转移风险，对患者的治疗具有一定的指导意义。

此外，本研究推测IL-6、TNF-α可能通过干扰结肠癌患者的糖脂代谢，加速肠癌患者恶病质的进程，降低患者的生存质量，因此给予肠癌患者炎症抑制药物可降低IL-6、TNF-α的水平，可以改善癌症患者的生存质量和预后，对延缓结肠癌患者恶病质的发生具有重要的临床意义。

1 Espejo-Herrera N，Gracia-Lavedan E，Boldo E，etal.Colorectal cancer risk and nitrate exposure through drinking water and diet〔J〕.Int J Cancer，2016；139(2)：334-46.

2 Nachiappan S，Askari A，Mamidanna R，etal.The impact of adjuvant chemotherapy timing on overall survival following colorectal cancer resection〔J〕.Eur J Surg Oncol，2015；41(12)：1636-44.

3 唐人民，李俊明，邹秀兰.IKKε/TBK1信号通路调控与致癌作用的研究进展〔J〕.中国老年学杂志，2015；35(23)：6918-21.

4 付国静，杨正德.非甾体类药与老年人小肠黏膜损伤〔J〕.中华老年医学杂志，2015；34(6)：689-91.

5 张 庆，龙跃平，杜寒松，等.塞来昔布增强氟尿嘧啶对人结肠癌细胞SW480增殖与侵袭的抑制作用〔J〕.华中科技大学学报(医学版)，2013；42(5):525-9.

6 Gao XY，Wang XL.An adoptive T cell immunotherapy targeting cancer stem cells in a colon cancer model〔J〕.J BUON，2015；20(6)：1456-63.

7 Xavier RJ，Podolsky DK.Unravelling the pathogenesis of inflammatory bowel disease〔J〕.Nature，2007；448(7152)：427-34.

8 袁带秀，舒丽霞，黄 蓉.杜仲黄酮对H22小鼠的抑瘤作用及其机制〔J〕.中国老年学杂志，2016；36(2)：291-3.

9 Poutahidis T，Haigis KM，Rao VP，etal.Rapid reversal of interleukin-6-dependent epithelial invasion in a mouse model of microbially induced colon carcinoma〔J〕.Carcinogenesis，2007；28(12)：2614-23.

9 Scheller J，Garbers C，Rose-John S.Interleukin-6：from basic biology to selective blockade of pro-inflammatory activities〔J〕.Semin Immunol，2014；26(1)：2-12.

10 Djaldetti M，Bessler H.Modulators affecting the immune dialogue between human immune and colon cancer cells〔J〕.World J Gastrointest Oncol，2014；6(5)：129-38.

〔2016-12-11修回〕

(编辑 袁左鸣)

河北省自然科学基金资助项目(No.301354)

张鹏飞(1985-)，男，主治医师，主要从事重症医学基础研究。

R735.4

A

1005-9202(2017)11-2716-02；

10.3969/j.issn.1005-9202.2017.11.050

1 河北医科大学病理学教研室 2 河北医科大学第一附属医院病理科 3 河北医科大学第一附属医院肿瘤科 4 河北医科大学第一附属医院肝胆外科