肺炎支原体感染后患儿血清免疫球蛋白及T淋巴细胞亚群的动态变化分析

胡蝶+刘艳杰

[摘要] 目的 探究肺炎支原體感染后患儿血清免疫球蛋白及T淋巴细胞亚群的动态变化分析情况。方法 便利选取该院2014年4月—2016年4月期间确诊的肺部支原体感染患儿70例为观察组，选取同时期于该院体检的健康小儿45名为对照组，抽取两组研究对象外周血以免疫散射比浊法和流式细胞术进行检测。比较两组在IgG、IgM、IgA血清免疫球蛋白与CD3+、CD4+、CD4+/CD8+ T淋巴细胞亚群的变化情况。结果 观察组患儿血清免疫球蛋白检测中IgG、IgM及IgA水平均低于对照组健康小儿。观察组急性期患儿血清免疫蛋白中IgG（9.12±1.48）g/L、IgM（0.76±0.41）g/L、IgA（1.03±0.19）g/L与对照组相比差异有统计学意义（P<0.05），且观察组急性期IgG、IgM、IgA水平略低于恢复期（P<0.05）。②观察组患者各时期T淋巴细胞亚群中CD3+、CD4+、CD4+/CD8+均分别低于对照组，差异有统计学意义（P<0.05）。观察组各时期CD8+（34.27±3.48）%均高于对照组，且观察组急性期CD3+（59.56±7.34）%、CD4+（40.38±7.23）%、CD4+/CD8+（1.14±0.53）%与恢复期比较差异有统计学意义（P<0.05）。结论 小儿肺炎支原体感染后，在急性期与恢复期的血清免疫球蛋白及T淋巴细胞亚群均出现不同幅度的变化，MP与机体免疫反应存在相关，可据此做出相对应的MP诊治方案。

[关键词] 肺炎；支原体感染；血清免疫球蛋白；T淋巴细胞亚群；动态变化

[中图分类号] R4 [文献标识码] A [文章编号] 1674-0742（2017）04（c）-0030-03

[Abstract] Objective To study the dynamic changes of serum immune globulin and t lymphocyte subsets in children after the mycoplasma pneumoniae infection. Methods 70 cases of children with mycoplasma pneumoniae infection diagnosed in our hospital from April 2014 to April 2016 were conveniently selected as the observation group， and 45 cases of healthy children in our hospital at the same period were selected as the control group， and the peripheral blood was tested by the scattering immunoturbidimetric assay and flow cytometry， and the changes of IgG，IgM，IgA serum immune globulin and CD3+，CD4+，CD4+/CD8+ T lymphocyte subsets were compared between the two groups. Results The IgG， IgM and IgA in the serum immune globulin test in the observation group were respectively （9.12±1.48）g/L， （0.76±0.41）g/L and （1.03±0.19）g/L， which were lower than those in the control group， and the differences between groups were statistically significant（P<0.05）， and the IgG， IgM， IgA levels in the acute phase were slightly lower than those in the recovery phase（P<0.05）， and the CD3+，CD4+，CD4+/CD8+ in the T lymphocyte subsets in various phases in the observation group were respectively lower than those in the control group， and the differences between groups were statistically significant（P<0.05）， and the CD8+（34.27±3.48）% in the observation group was higher than that in the control group， and the difference in the CD3+（59.56±7.34）%，CD4+（40.38±7.23）%，CD4+/CD8+（1.14±0.53）% in the acute phase in the observation group was bigger than that in the recovery stage（P<0.05）. Conclusion The serum immune globulin and t lymphocyte subsets have different degrees of changes in the acute phase and recovery phase after the infection of mycoplasma pneumoniae in children and the MP is correlated with the organ immune reaction， and we can make the corresponding MP diagnosis and treatment plan on the basis of the above.

[Key words] Pneumonia； Mycoplasma infection； Serum immune globulin； T lymphocyte subsets； Dynamic change

小儿肺炎支原体感染（MP）是好发于5～15岁儿童的感染性疾病，病症临床表现为咳嗽、咳痰、咽痛等症状，严重时可引发心脑血管疾病等诸多并发症，威胁到幼儿的身体健康[1]。当患儿肺部感染支原体引发炎症后，患儿身体免疫机能受到波及。国内外有关研究表明肺炎支气管感染与细胞免疫及体液免疫存在相关联系[2]。为探究肺部支原体感染与患儿免疫的相关联系，该研究便利选择2014年4月—2016年4月期间收治的70例肺部支原体感染患儿血液中血清免疫球蛋白（Ig）及T淋巴细胞亚群的变化进行分析，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

参照《实用儿科学》中关于小儿肺部支原体感染判定标准[3]，便利选取于该院儿科确诊收治的肺部支原体感染患儿70例为研究对象，将其作为观察组，其中男性43例，女性27例。年龄在1～13岁，平均年龄（5.9±1.2）岁；病程1～10 d，平均病程（3.9±2.1）年；其中急性期患儿43例，恢复期患儿27例，且患儿均表现出咳嗽、咳痰、发热等肺部炎症症状，经影像学方式检测肺部均出现不同程度的阴影，肺部可闻及中小水泡音。选取同时期于该院体检的健康小儿45名作为对照组，其中男性31名，女性14名。年龄在1～11岁，平均年龄（6.2±1.4）岁。两组研究对象在年龄、性别等基本资料的对比差异无统计学意义（P>0.05）。

1.2 纳入标准与排除标准

纳入标准：观察组：确诊为肺部支原体感染的患儿；年龄在1～15岁；经患儿家属知情并同意参与。排除标准：观察组：其他原因引起免疫系统损伤；患有心肝肾等器官性疾病；近2周有呼吸道感染；患有其他急、慢性疾病、抽血采样前经过抗肺炎支原体感染相关治疗[4]。

1.3 检测方法

分别采集观察组患儿与对照组小儿外周静脉血5 mL，并将其分为两管，一管2 mL静脉血注入EDTA-K 2 抗凝管中，室温保存用于T淋巴细胞亚群检测；另一管3 mL静脉血注入真空采血管，经离心后采集血清用于免疫球蛋白检测。采用免疫散射比浊法对比两组患儿血清中免疫球蛋白IgG、IgM、IgA水平，应用SIEMENS BN2特定蛋白分析仪以及配套试剂进行检测。

将抽取的抗凝血在 24 h内采用BD FACSCanto流式细胞仪对T淋巴细胞亚群进行检测。加入研究对象抗凝血50 μL，加入六色荧光抗体10 μL，混匀后避光放置于室温孵育15 min，加1 mL溶血素，避光放置15 min，1 500 r/min离心10 min，弃上清，加入200 μL PBS上机检测，设门分析各淋巴细胞亚群。

1.4 统计方法

该研究采用SPSS 17.0统计学软件进行分析，计量数据采用（x±s）表示，行t检验，以P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 比较两组血清免疫球蛋白水平

观察组患儿血清免疫球蛋白检测中IgG、IgM及IgA水平均低于对照组健康小儿。观察组急性期患儿血清免疫蛋白中IgG、IgM、IgA与对照组相比差异有统计学意义（P<0.05），且观察组急性期IgG、IgM、IgA水平略低于恢复期（P<0.05）。见表1。

2.2 比较两组T淋巴细胞亚群变化情况

观察组患者各时期T淋巴细胞亚群中CD3+、CD4+、CD4+/CD8+均分别低于对照组，差异有统计学意义（P<0.05）。观察组各时期CD8+均高于对照组，且观察组急性期CD3+、CD4+、CD4+/CD8+与恢复期比较，差异有统计学意义（P<0.05）。见表2。

3 讨论

肺炎支气管感染在儿童肺炎中所占比例达到10%～40%[5]，特别是婴幼儿，因其免疫功能较差，易受到支原体攻击与感染。若少儿长期反复受到肺炎支原体感染，引起患儿生长发育受阻，严重影响患儿的身心健康发展。因肺部支原体引发炎症，机体炎症因子水平迅速升高，宿主细胞受到攻击后影响整个机体免疫系统产生变化。因此，对肺炎支原体及患儿免疫系统的相关性及影响的研究是诊治小儿肺炎支原体感染的关键。

人体免疫功能状态主要通过体液及细胞免疫反应出来，其中血清免疫球蛋白与T淋巴细胞亚群是两项表现敏感的判定指标。血清免疫球蛋白能够高选择性的与特异性抗原结合，是机体免疫系统受到抗原刺激后产生的重要保护分子，是检测体液免疫最为常用的判定指标。在肺炎支原体感染后，病原刺激B细胞产生应对肺炎支原体感染的IgG、IgM抗体，引起宿主细胞膜抗原结构的变化或存在于MP抗体相似成分，從而使自身抗体发生病理免疫反应[6]。因IgG、IgM、IgA最能代表IG水平变化情况。IgM是最早出现的人体免疫抗体，因此，该文以血清免疫球蛋白与T淋巴细胞亚群变化进行判断。陈欣等人[5]在有关报道提到：IgM及IgA含量在肺炎支原体感染后出现显著的下降，而IgG通常在2周后出现变动。该研究中观察组急性期IgG、IgM及IgA均略低于对照组血清免疫球蛋白水平（P<0.05），且观察组急性组患儿IgG、IgM及IgA均低于恢复期（P<0.05），急性期血清免疫球蛋白值更低，表明患儿体液免疫功能的下降程度更大，合成抗体数目减少，从而加剧机体免疫紊乱，引起机体组织损伤。因肺炎支原体感染引起IgG、IgM、IgA水平变化作用于B淋巴细胞，刺激B淋巴细胞大量繁殖，导致体液免疫亢奋，加重MP免疫损伤。此外，因B淋巴细胞与T淋巴细胞存在负相关，一定程度上抑制T淋巴细胞的合成与分泌，进一步加剧机体免疫功能失调和紊乱。

T淋巴细胞是在骨髓中多能干细胞在诱导下发展成为具有免疫活性的T细胞。T淋巴细胞按照表型分类为亚型与亚群。其中CD3+细胞标志为最具代表性的成熟T淋巴细胞。CD4+标志为辅助型T淋巴细胞，能优化T淋巴细胞与B淋巴细胞的防御免疫应答反应。CD8+标志为具有表面毒性T细胞，通过释放穿孔素、丝氨酸酯酶以及淋巴毒素杀伤靶细胞，达到诱导细胞凋亡的作用。CD4+/CD8+ 表示为机体细胞免疫功能相对情况，是评估机体免疫能力的重要指标。比值异常变化越大表明机体免疫功能的紊乱。

该研究结果中，观察组各时期T淋巴细胞亚群中CD3+、CD4+、CD4+/CD8+水平值均低于对照组（P<0.05），肺炎支原体感染的患儿机体内T淋巴细胞与正常小儿比较应答反应更弱，细胞活性功能下降。观察组各时期CD8+水平高于对照组（P<0.05），观察组急性期CD3+、CD4+、CD8+、CD4+/CD8+波動幅度大于观察组恢复期。肺炎支原体感染进入血液循环后刺激血液中T淋巴细胞亚群，可见T淋巴细胞亚群变化幅度越大，对机体组织及免疫功能的损伤越大，与李政锦相关研究中提到的T淋巴细胞亚群中CD3+、CD4+、CD8+失调比例严重性与肺炎支原体感染呈正相关的结论基本一致[7-8]。

综上所述，肺炎支原体感染后引起IgG、IgM及IgA降低与CD3+、CD4+、CD8+、CD4+/CD8+水平的变化，表明机体血清免疫球蛋白与T淋巴细胞活性受到抑制，患者免疫功能下降。可见肺炎支原体感染与机体免疫调节紊乱有关联。因此，通过检测机体免疫细胞及免疫系统可辅助诊断肺炎支气管感染。

[参考文献]

[1] 杨清广，钟勇勋. 小儿肺炎支原体感染后免疫功能的变化规律及其临床意义[J].临床和实验医学杂志，2014，14（24）：2021-2023.

[2] 苏晓霁，卓佳佳，许自成，等.婴幼儿支原体感染与免疫功能的变化[J]. 国际检验医学杂志，2014（24）：3327-3328，3331.

[3] 楼兰芳，李小兵，张兰青. 小儿肺炎支原体感染后血清免疫球蛋白、红细胞免疫及外周血T淋巴细胞亚群的变化情况分析[J]. 中国妇幼保健，2015，30（3）：385-387.

[4] 牛波，池跃朋，帅金凤，等.儿童难治性肺炎支原体肺炎免疫机制探讨[J]. 中国医药导报，2016，13（6）：107-110.

[5] 陈欣，赵涛，郭建光，等.难治性肺炎支原体肺炎的肺外表现及免疫状态的临床分析[J].临床肺科杂志，2015（12）：2186-2190.

[6] 杨香红，李艳莉，罗春玉. 肺炎支原体肺炎患儿免疫功能的变化及其与病情程度和疾病分期的关系[J].实用临床医药杂志，2016，20（7）：113-116.

[7] 李政锦，周文，彭昌，等.小儿肺炎支原体感染后免疫功能变化的研究[J].中华医院感染学杂志，2012，22（15）：3221-3223.

[8] Zhou Z，li F，Chen X，et al.Mycoplasma pneumonia combined with pulmonary infarction in a child[J].Int J Clin Exp Med，2015，8（1）：1482-1486.

（收稿日期：2017-01-24）