病毒性脑炎患儿脑脊液和血清中NSE、CK-BB、LDH同工酶的临床分析

许晓琳，李 琛，孙玉敏

(1.沧州医学高等专科学校，河北 沧州061001；2.沧州市中心医院，河北 沧州061000)

病毒性脑炎患儿脑脊液和血清中NSE、CK-BB、LDH同工酶的临床分析

许晓琳1，李 琛2，孙玉敏1

(1.沧州医学高等专科学校，河北 沧州061001；2.沧州市中心医院，河北 沧州061000)

目的 了解轻、重度病毒性脑炎患儿脑脊液和血清中神经元特异性烯醇化酶(NSE)、脑型肌酸激酶同功酶(CK-BB)、乳酸脱氢酶(LDH)同工酶的变化。方法 回顾性分析2010年1月至2015年12月沧州市中心医院收治的30例病毒性脑炎重症患儿、30例轻症患儿和30例排除颅内感染的偏头痛患儿，并对其脑脊液和血清中NSE、CK-BB、LDH同工酶进行检测，采用多因素方差分析进行多组间均数的分析及比较。结果 在血清分析中，三组患儿NSE、CK-BB、LDH同工酶检测结果有统计学差异(F值分别为168.62、73.82和27.08，均P<0.01)；在脑脊液分析中，三组患儿NSE、CK-BB、LDH同工酶检测结果也有统计学差异(F值分别为291.72、891.83和60.544，均P<0.01)。结论 病毒性脑炎患儿脑脊液和血清中NSE、CK-BB、LDH变化可作为诊断病毒性脑炎及评估病情轻重的临床指标，可广泛应用于临床。

病毒性脑炎；神经元特异性烯醇化酶；脑型肌酸激酶同功酶；乳酸脱氢酶

病毒性脑炎是儿科临床中较为常见的神经系统感染疾病之一，为了准确诊断病毒性脑炎，除却有禁忌症的患儿之外，疑似病毒性脑炎的患儿均需行腰椎穿刺，留取患儿脑脊液进行脑脊液常规检测、细胞形态学检测、生化检测及病原学检测[1-2]。

本研究对2010年1月至2015年12月入住沧州市中心医院的60例病毒性脑炎患儿(30例重症患儿和30例轻症患儿)及30例排除颅内感染的偏头痛患儿的脑脊液和血清中神经元特异性烯醇化酶(neuron specific enolization enzymes, NSE)、脑型肌酸激酶同功酶(creatine kinaes BB isozyme, CK-BB)、乳酸脱氢酶(Lactate dehydrogenase,LDH)同工酶检测结果进行回顾性分析，现报告如下。

1 研究对象与方法

1.1研究对象

随机选取2010年1月至2015年12月之间沧州市中心医院60例病毒性脑炎患儿及30例排除颅内感染的偏头痛患儿。

90例患儿中男性患儿46例，女性患儿44例，年龄在2岁9个月至14岁3个月之间，平均年龄(7.18±3.03)岁，患儿入院治疗距离发病时间为2～9天，平均为(5.11±1.56)天。

1.2病例分组

将90例头痛患儿分为重症病毒性脑炎患儿组(30例)、轻症病毒性脑炎患儿组(30例)及排除颅内感染偏头痛患儿组(30例)。三组患儿性别、年龄等无统计学差异(P>0.05)，均具有可比性。

60例病毒性脑炎患儿根据临床表现和脑电图诊断结果分为重症病毒性脑炎患儿组和轻症病毒性脑炎患儿组，其中发热患儿21例(35%)，呕吐患儿13例(21.7%)，头痛患儿16例(26.7%)，惊厥患儿6例(10%)，精神差或嗜睡患儿3例(5%)，昏迷患儿1例(1.7%)。诊断标准参照《儿科学》(第8版)病毒性脑炎的诊断标准[3]。重症病毒性脑炎诊断标准如下：①持续高热不退；②持续惊厥或频繁抽搐；③表现有昏迷、烦躁等意识障碍；④有精神异常行为、肢体瘫痪等大脑皮质受损的表现；⑤脑干颅神经或皮质下神经损害；⑥有持续或者严重的脑疝、颅内压升高。重症组患儿的脑脊液结果均符合以上标准的三个条件。无以上表现者为轻症组患儿。本次研究所有患儿家属均同意且签署知情同意书，并符合医院伦理委员会规定。

1.3 研究方法

入院当天或入院后第二天清晨抽取患儿外周静脉血2mL并离心，取其血清置于-20℃的冰箱保存，用于常规的生化检测和LDH检测。LDH检测应用全自动生化仪进行； CK-BB测定采用免疫抑制法进行，并应用美国ALD公司生产、上海丰翔生物科技有限公司提供的CK-BB酶联免疫试剂盒，应用Autobio 实验酶标仪对CK-BB的OD值进行检测；NSE测定采用双抗体夹心酶标免疫技术，应用罗氏公司提供的Cobas e411化学发光检测仪及试剂进行。测定步骤均严格按试剂盒说明书。

1.4 统计学方法

2 结果

2.1血清中各因子水平

在各患儿的血清中，检测到各患儿NSE、CK-BB及LDH水平，重症病毒性脑炎、轻症病毒性脑炎及排除颅内感染有偏头痛的患儿之间比较有统计学差异(P<0.01)。

分组例数(n)NSE(ng/mL)CK-BB(U/L)LDH(U/L)重症病脑患儿3012.92±2.0010.41±3.35382.86±111.78轻症病脑患儿309.66±2.067.89±1.57375.31±96.70偏头痛患儿304.55±1.143.62±0.79234.88±35.25F168.62073.82227.076P<0.01<0.01<0.01

2.2 脑脊液中各因子水平

在各患儿脑脊液中检测的NSE、CK-BB及LDH水平，重症病毒性脑炎、轻症病毒性脑炎及排除颅内感染有偏头痛的患儿之间比较有统计学差异(P<0.01)。

Table 2 Comparison of levels of each factor in cerebrospinal ±S)

3 讨论

3.1病毒性脑炎诊断现状

病毒性脑炎是由多种病毒引起的脑实质与脑膜的炎症，在儿科临床上较为常见，儿童发生病毒性脑炎的高发年龄是2～5 岁，具有较高的发病率且近年来呈逐年上升的趋势，主要侵犯患儿大脑、小脑、脑干、脊髓及脑膜等，其病理改变主要为脑组织出现水肿、软化或坏死，目前已引起临床的广泛关注[4]。新生儿应注意单纯疱疹病毒、巨细胞病毒及肠道病毒，婴儿及儿童应注意疱疹病毒及肠道病毒感染[5]。

临床上关于儿童病毒性脑炎的诊断主要依赖于相关的脑损伤症状和脑膜刺激征症状、体征来判断，脑电图检查是一种无创伤性检查，对患儿疾病的发展状况、治疗效果、预后情况等都能进行很好的评估，脑脊液和生化异常为其金标准。

儿童由于发育不健全，机体的免疫力低下，容易受到病毒攻击，导致疾病发生。病毒入侵体内后，继而侵入到神经中枢，直接导致脑组织的损伤[6]。病毒性脑炎的早期症状通常表现为非典型性，临床的误诊率和漏诊率均比较高，轻者会导致神经功能损伤等后遗症，重者会威胁患者的生命安全直接导致死亡。因此及时、早期、有效的诊断方法对于病毒性脑炎患者有非常重要的临床意义。

3.2 神经元特异性烯醇化酶在病毒性脑炎诊断中的意义

NSE属于神经元特异性血清标记物，是糖酵解途径的关键酶，在糖酵解途径的过程中能够催化磷酸烯醇式丙酮酸和2-磷酸甘油酸的互相转化。血清NSE水平的变化能够反映神经元细胞的损伤状况[7]。

NSE在诊断颅脑损伤及反应颅脑损伤的严重程度中有着重要的临床意义，其原因是因为颅脑损伤时神经髓鞘崩解和神经元坏死会导致胞质中的NSE通过受损的血-脑屏障进入患者血液中，造成血清中NSE升高。NSE作为大脑神经元特异性损伤的重要标志物，能够较为敏感和特异地反应出大脑的损伤及大脑损伤的严重程度。

脑脊液NSE作为病毒性脑炎的早期临床诊断指标之一，对于辨别病毒性脑炎重症型和轻症型的发病程度有着重要意义。颅脑损伤愈严重，血-脑屏障受损的程度愈高，神经元所释放到血液中的NSE愈多，血清中NSE的含量也愈高[8]。

3.3 肌酸激酶在病毒性脑炎中的诊断意义

肌酸激酶是与肌肉收缩、细胞内能量转运、三磷酸腺苷的再生有直接关系的一种重要激酶，肌酸激酶的主要功能是催化ATP与肌酸之间高能磷酸键的可逆性转移，为机体的运输系统和肌肉收缩提供能量来源，肌酸激酶有三种，CK-MB为心肌型，CK-MM为骨骼型，CK-BB为脑型，通常存在于动物的心脏、骨骼肌以及脑组织中，健康人血清中的肌酸激酶主要以骨骼型肌酸激酶为主，大约占人体肌酸激酶总量的95%，心肌型肌酸激酶很少，一般占人体肌酸激酶总量的5%，脑型肌酸激酶在健康人血清中含量极少，甚至检测不到。CK-BB存在于大脑的脑神经元细胞和星形胶质细胞中，是神经元损伤的一种敏感性标志物，对于判断大脑神经元的损伤有着比较高的特异性，CK-BB在各种神经系统疾病时升高的程度与脑损伤程度以及预后之间也存在着密切的关联性。正常情况下，CK-BB在人体血液中的浓度非常微小，脑脊液中CK-BB的含量也非常低，当脑部组织出现病变导致脑细胞水肿、受伤时，CK-BB会释放进入脑脊液，造成脑脊液中CK-BB浓度升高。

3.4 乳酸脱氢酶在病毒性脑炎中的诊断意义

LDH是糖无氧酵解与糖异生的重要同工酶之一，存住于机体多种组织器官，脑脊液是血清含量的10%。 LDH不仅能够催化左旋乳酸和丙酮酸之间的氧化还原反应，还可以催化相关的α-酮酸，当发生颅内感染时，脑组织发生炎性水肿，导致颅内压升高，造成脑组织病变部位发生缺血，糖酵解反应加强，直接导致乳酸酶活性升高，因此，脑脊液中乳酸脱氢酶变化最为显著，对于不明类型的脑膜炎患儿进行脑脊液LDH检测能够起到一定的鉴别诊断作用[9]。

本次研究结果显示病毒性脑炎患儿脑脊液和血清中NSE、CK-BB变化可作为诊断病毒性脑炎及评估病情轻重的临床指标，但LDH在多种疾病中表达，作为检测病毒性脑炎严重程度指标的敏感性较差。因此为了提升病毒性脑炎患儿诊断的正确率，应当联合其他的实验指标进行诊断。对于病毒性脑炎患儿脑脊液和血清中NSE、CK-BB及LDH进行联合检测，可以对临床诊断有较好的指导意义，值得临床进一步实践和推广。

[1]Kneen R,Michael B D,Menson E,etal.Management of suspected viral encephalitis in children - association of British Neurologists and British Paediatric Allergy, Immunology and Infection Group national guidelines[J].J Infect,2012,64(5):449-477.

[2]Britton P N,Eastwood K,Paterson B,etal.Consensus guidelines for the investigation and management of encephalitis in adults and children in Australia and New Zealand[J].Intern Med J,2015,45(5):563-576.

[3]王卫平.儿科学[M]．8版，北京：人民卫生出版社，2013：406.

[4]胡金蒙，曹学全，张丽军，等．小儿病毒性脑炎34例脑电图分析[J]．中国妇幼健康研究，2014，25(1)：131-132．

[5]Lipkin W I,Hornig M.Diagnostics and discovery in viral central nervous system infections[J].Brain Pathol,2015,25(5):600-604．

[6]徐艳梅.儿童病毒性脑炎112例的临床分析[J].中国妇幼健康研究,2016,27(8):950-952.

[7]蒋海燕,刘利军,何海英,等.脑白质损伤早产儿血清S100B蛋白、神经元特异性烯醇化酶及肌酸激酶脑型同工酶的变化[J].临床儿科杂志,2013,31(3):221-224.

[8]Böhmer A E,Oses J P,Schmidt A P,etal.Neuron-specific enolase, S100B, and glial fibrillary acidic protein levels as outcome predictors in patients with severe traumatic brain injury[J]. Neurosurgery, 2011,68(6):1624-1631.

[9]余韶卫,叶欣,区小明.脑脊液乳酸脱氢酶检测在小儿脑膜炎中的临床应用[J].国际检验医学杂志,2014,35(12):1633-1634.

[专业责任编辑： 吴红艳]

Clinical research on isozyme of NSE, CK-BB and LDH in cerebrospinal fluid and serum of children with viral encephalitis

XU Xiao-lin1, LI Chen2, SUN Yu-min1

(1.CangzhouMedicalCollege,HebeiCangzhou061001,China; 2.CangzhouCentralHospital,HebeiCangzhou061000,China)

Objective To analyze the changes of neuron specific enolase (NSE), creatine kinaes BB isozyme (CK-BB) and lactate dehydrogenase (LDH) isozyme in cerebrospinal fluid and serum of children with mild or severe viral encephalitis. Methods Retrospective analysis was conducted in 30 cases of severe viral encephalitis, 30 mild cases and 30 cases of migraine without intracranial infection admitted in Cangzhou Central Hospital from January 2010 to December 2015.Isozyme of NSE, CK-BB and LDH in cerebrospinal fluid and serum of patients was detected and means were analyzed and compared among groups using multiple factor variance analysis. Results Differences in serum NSE, CK-BB and LDH isozyme test results were statistically significant among three groups (Fvalue was 168.62, 73.82 and 27.08, respectively, allP<0.01). Differences in cerebrospinal fluid test results of isozyme of NSE, CK-BB and LDH had statistical significance (Fvalue was 291.72, 891.83 and 60.544, respectively, allP<0.01). Conclusion Changes of NSE, CK-BB and LDH in cerebrospinal fluid and serum of children with viral encephalitis could be used as clinical indexes in diagnosing viral encephalitis and evaluating severity of illness, and can be widely used in clinical application.

viral encephalitis; neuron specific enolase (NSE); creatine kinaes BB (CK-BB) isozyme; lactate dehydrogenase (LDH)

2016-02-10

沧州市科技支撑计划项目(编号：151302002)

许晓琳(1975-)，女，主治医师，主要从事儿科临床工作。

孙玉敏，副主任医师。

10.3969/j.issn.1673-5293.2017.05.037

R512.3

A

1673-5293(2017)05-0598-03