受血者红细胞血型不规则抗体筛选在临床输血中的价值评价

江哲， 张轩， 莫春妍

（1广州血液中心花都区血站 检验科，广东 广州 510800；2广东省中医院 检验科，广东 广州 510120；3广州血液中心 临床输血研究所，广东 广州 510095）

受血者红细胞血型不规则抗体筛选在临床输血中的价值评价

江哲1， 张轩2， 莫春妍3

（1广州血液中心花都区血站 检验科，广东 广州 510800；2广东省中医院 检验科，广东 广州 510120；3广州血液中心 临床输血研究所，广东 广州 510095）

目的 探讨受血者红细胞血型不规则抗体筛选在临床输血中的实用价值。方法 随机选取2014年1月至2015年12月期间进行手术备血或治疗性输血的1 200例患者，采用微柱凝胶法筛查其不规则抗体，并对阳性标本进行特异性鉴定，以确保临床中输血安全。结果 在所有不规则抗体中，男性患者的阳性率为5.20% （37例），女性患者的阳性率为8.20% （40例），差异有统计学意义 （P＜0.05）；怀孕患者的阳性率为19.72% （85例），非怀孕患者的阳性率为8.77% （5例），差异有统计学意义 （P＜0.05）。结论 术前受血者红细胞血型不规则抗体筛选对临床输血安全具有重要的意义，能够有效减少输血不良反应。

不规则抗体；红细胞血型；临床输血；实用价值

人类血液的不规则抗体是指除ABO血型外的其他抗体类型，主要为IgG，还有少部分的IgM［1］，一般情况下并不存在于人体内。目前IgG抗体通常可引起新生儿免疫溶血和交叉配血困难，而在保障输血安全中，抗体筛查［2］是一项比较重要的检查。相关研究［3］显示，我国因抗原抗体因素造成的溶血反应占12.6%，其中溶血性输血反应占2.56%。当前我国血型抗体的检出率为0.30%～2.00%［4］，在输血前进行抗体筛查能够发现不同血型的抗体类型。但由于患者存在输血、妊娠或疾病等情况，因此由不规则抗体引起的溶血反应仍旧经常发生。本研究探讨在临床输血中采用微柱凝胶法对受血者血型不规则抗体进行筛选的实用价值，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料随机选取2014年1月至2015年12月期间进行手术备血或治疗性输血的1 200例患者作为研究对象，同一人多次输血按照一人计。其中男性712例，女性488例；年龄1～88岁，平均年龄 （45.5±2.3）岁。男性患者中，无输血史398例，1～2次输血史157例，≥3次输血史157例。女性患者中，无输血史247例，1～2次输血史127例，≥3次输血史114例；无妊娠史57例，1～2次妊娠史212例，≥3次妊娠史219例。排除伴有严重肾脏疾病、抑郁症和神经疾病患者。

1.2 试剂与仪器①仪器：BASO细胞洗涤离心机，Dianafuge专用离心机，Diana专用孵育器。②试剂：抗人球蛋白试剂（上海血液生物医药有限公司），抗体谱细胞和筛选细胞 （长春博德公司），抗人球蛋白微柱凝胶卡 （班珀斯技贸有限公司）；所有的微柱凝胶卡和试剂均在有效使用期内。

1.3 检测方法

1.3.1 微柱凝胶实验 先将三个微柱凝胶卡标号1、2、3，再分别于对应孔内加入50 μL Serigrup Diana 1、2、3浓度为0.8%的红细胞悬浊液，随后在对应孔内分别加入25 μL受检者的血清或血浆，将三张微柱凝胶卡同时放进Diana孵育器，调定恒温37℃，持续15 min，结束后取出卡片，立即放入Dianafuge专用离心机中，1 100 r／min持续离心9 min，离心结束后放置在白色背景上，观察实验结果［3］。结果判定［5］：100%的红细胞沉淀于微管底端时用 “－”表示；100%的红细胞在微管下段1／3以内沉淀时用 “＋／－”表示；80%的红细胞在微管下段2／3以内沉淀时用 “1＋”表示；80%的红细胞在微管上端2／3以内沉淀时用 “2＋”表示；80%的红细胞在微管上端1／3以内沉淀时用 “3＋” 表示； 所有红细胞都沉淀于微管顶部时用 “4＋” 表示；dp表示双群；Hemo表示有溶血。

1.3.2 间接抗人球蛋白实验 将受检者的100 μL血清分别加入事先标记1、2、3的小试管内，再分别加入Serigrup Diana 1、2、3红细胞悬浊液各50 mL，置于恒温37℃水浴30～60 min，结束后取出卡片立即放入BASO专用离心机中，3 000 r／min持续15 s，弃掉上清液后吸干，用生理盐水洗涤离心，3 000 r／min持续 45 s，3次以上。最后一次洗涤完毕后，弃掉生理盐水，试管边缘用滤纸吸干，每个试管中再加入100 μL人球蛋白试剂，充分混合后放入BASO离心机，3 000 r／min持续15 s，结束后取出轻摇，直至试管底部出现均匀的凝集物为止。结果判定［6］：试管底部出现凝集或有溶血则为阳性反应，没有凝集和溶血则为阴性反应。

1.4 统计学方法采用SPSS 18.0统计软件，计数资料的比较采用χ2检验，P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 不同性别患者的阳性率比较在所有不规则抗体中，男性患者的阳性率为5.20% （37例），女性患者的阳性率为8.20%（40例），差异有统计学意义 （P＜0.05）。见表1。

表1 不同性别患者的阳性率比较 ［n（%）］

2.2 怀孕患者与非怀孕患者的阳性率比较怀孕患者的阳性率为19.72% （85例），非怀孕患者的阳性率为8.77% （5例），差异有统计学意义 （P＜0.05）。见表2。

表2 怀孕患者与非怀孕患者的阳性率比较 ［n（%）］

3 讨论

随着我国医疗技术的不断发展，输血科医护人员的专业知识也不断增长，临床中一般不会发生因ABO血型不符而引发的输血反应，目前输血反应一般是由不规则抗体引起的［7］。不规则抗体产生的原因为含有弱抗体的受血者输入含有相应抗原的血细胞、妊娠母子血型不符、无察觉刺激、免疫刺激等。

不规则抗体的筛查率在各研究中并不一致，可能与人群分布或样本数量有关。本研究的检出率为0.66%，其中抗－cE 60例，抗－E 61例，抗－c 10例，抗－D 35例，抗－M 16例，抗－Le 83例，抗－Fyb 6例，抗－Jka 10例。虽然在实际工作中阳性检出率较低，但一旦发现需引起高度重视，并进行严格配血，减少输血不良反应。不规则抗体主要出现在Rh系统，且以抗－D、抗－E、抗－c为主，其他少见，其抗原由强至弱的顺序为D＞E＞c＞C＞e，其中E抗原是除D外最强的抗原，本研究未做常规检测，是导致近年E抗体增加并引起溶血反应最主要的原因。Rh系统多见不规则抗体，血型抗体的频率和种类中以Rh系统最多见，是引起疑难配血、新生儿溶血、血型鉴定困难、输血不良反应的重要原因。我国人群大多是D抗原阳性，阴性占0.2%～0.5%，且D抗原致敏性极强，80%的孕妇在输血后2～5个月内会出现免疫应答，临床中需特别注意。

本研究中，在所有不规则抗体中，男性患者的阳性率为

5.20% （37例），女性患者的阳性率为8.20% （40例），差异有统计学意义 （P＜0.05）；怀孕患者的阳性率为19.72% （85例），非怀孕患者的阳性率为8.77% （5例），差异有统计学意义 （P＜0.05）；表明女性患者不规则抗体阳性率明显高于男性，有妊娠史或输血史的女性患者不规则抗体阳性率明显高于其他患者。不规则抗体阳性患者在妊娠时，异体红细胞会刺激孕妇体内的IgG进入新生儿体内，进而刺激母体产生相应抗体，提示医护人员应重视患者输血前的各项检查，尤其是妊娠史、输血史、输血不良反应等，重视该类型患者的抗体筛查实验，避免发生溶血反应，保障输血安全。临床输血科工作中筛查抗体的目的是发现不规则抗体，尽量减少患者的输血不良反应，而受血者血液内不规则抗体的存在情况受性别、妊娠史、输血史等影响，因此在筛查过程中要注意个体差异，有效避免溶血反应发生。自身免疫性溶血性贫血患者自身血清中含有大量冷凝激素和自身抗体，可使受血者红细胞发生凝集反应，从而影响筛查结果，因此在进行交叉配血和抗体筛查实验时，要鉴别不规则抗体和自身抗体，避免延误患者的血液输注。

综上所述，术前受血者红细胞血型不规则抗体筛选对临床输血安全具有重要的意义，能够有效减少输血不良反应。

[1]赵颖欣,王德辉,柴慧丽,等.血型不规则抗体筛查用于预防和降低临床无效输血的发生 [J].中国输血杂志,2015,28(1)：48-50.

[2]孙丽芳,李杰,刘瑜.不规则抗体筛查在临床安全输血中的重要性分析 [J].甘肃医药,2012,31(2)：90-91.

[3]郭长义,宋雪冬,宋任浩.5种不规则抗体筛查方法的检测阈值比较[J].临床血液学杂志,2014,27(12)：1042-1044.

[4]李笃军,王新光,陈海霞,等.输血前不规则抗体筛查对临床安全输血的意义 [J].临床血液学杂志,2015,28(1)：103-104.

[5]敖小梅.受血者不规则抗体筛查在临床安全输血中的意义 [J].当代医学,2016,22(25)：18-19.

[6]龚晨辉,饶美英,叶水文,等.血型不规则抗体检测在临床输血中的作用 [J].实验与检验医学,2012,30(6)：597-598.

[7]张晓兰,赵红,丁喜玉.不规则抗体筛选在临床输血中的应用价值[J].内蒙古医学杂志,2014,46(4)：490-491.

（责任编辑： 何华）

Evaluation on the Value of Erythrocyte Blood Group Irregular Antibody Screening of Recipients in Clinical Blood Transfusion

JIANG Zhe1,ZHANG Xuan2,MO Chunyan3(1Clinical Laboratory,Huadu District Blood Station of Guangzhou Blood Center, Guangzhou 510800,China;2Clinical Laboratory,Guangdong Provincial Hospital of Traditional Chinese Medicine,Guangzhou 510120, China;3Institute of Clinical Blood Transfusion,Guangzhou Blood Center,Guangzhou 510095,China)

ObjectiveTo explore the practical value of erythrocyte blood group irregular antibody screening of recipients in blood transfusion.Methods 1 200 cases of patients with surgical or therapeutic blood transfusion from January 2014 to December 2015 were randomly selected.The irregular antibody was screened by microcolumn gel method,and the positive samples

specific identification to ensure the safety of blood transfusion in clinical practice.Results Of all the irregular antibodies,the positive rates of male patients and female patients were respectively 5.20%(37 cases)and 8.20%(40 cases),with statistical difference(P＜0.05).The positive rates of pregnant patients and non-pregnant patients were respectively 19.72%(85 cases)and 8.77%(5 cases),with statistical difference(P＜0.05). ConclusionsErythrocyte blood group irregular antibody screening of recipients before surgery has important significance for safety of clinical blood transfusion,which can effectively reduce the adverse reactions of blood transfusion.

Irregular antibody;Erythrocyte blood group;Clinical blood transfusion;Practical value

R446.6

A

10.3969/j.issn.1674-4659.2017.05.0627

2017－01－27

2017-03-17

江哲 （1982－），湖南耒阳人，本科学历，主管技师，从事血液检验工作。