男性乳腺癌组织中p57kip2、ER、PR的表达及其意义

罗祖强，庄志泉，董为松，张 凯

男性乳腺癌组织中p57kip2、ER、PR的表达及其意义

罗祖强1，庄志泉2，董为松1，张 凯1

目的 探讨p57kip2、ER、PR在男性乳腺癌(male breast cancer, MBC)中的表达及意义。方法 采用免疫组化EliVision法检测50例MBC、20例男性乳腺导管内原位癌(ductal carcinoma in situ, DCIS)和20例男性乳腺发育(gynecomastia, GYM)组织中p57kip2、ER、PR蛋白的表达。结果 p57kip2蛋白在GYM中的表达最高，在MBC中的表达最低；MBC与DCIS、GYM中的表达相比，差异有显著性(P<0.05)；p57kip2蛋白表达在DCIS与GYM中相比，差异有显著性(P<0.05)。ER、PR蛋白在GYM中的表达最高，在MBC中的表达最低；ER、PR蛋白表达在MBC与GYM中相比，差异有显著性(P<0.05)。在MBC中，三者表达均与临床分期、组织学分级有关(P<0.05)，p57kip2蛋白表达与淋巴结转移有关(P<0.05)；p57kip2与ER呈负相关(P<0.05)，p57kip2与PR、ER与PR均呈正相关(P<0.05)。结论 男性乳腺组织从良性增生到恶性转化中p57kip2、ER、PR蛋白表达逐渐降低，甚至完全丧失；联合检测p57kip2、ER、PR有助于MBC的诊断及预后判断。

乳腺肿瘤；男性；p57kip2；ER；PR；免疫组织化学

细胞周期是由CDK-Cyclin-CKI蛋白构成的网络调控，其中周期蛋白依赖性激酶抑制因子发挥负向调控细胞周期的作用，p57kip2是其成员之一。研究显示，肿瘤中存在p57kip2对细胞周期调控的异常[1]。男性乳腺癌(male breast cancer, MBC)是一种临床较少见的恶性肿瘤，约占乳腺癌的1%，但近年来发病率逐年上升，其发病机制至今尚不明确[2]。探讨MBC的发病机制，寻找有价值的诊断指标，对MBC的早期预防、诊断及治疗显得尤为重要。文献报道[3]MBC分为激素依赖型、激素非依赖型，ER、PR是雌、孕激素发挥作用的物质基础。目前，关于p57kip2、ER、PR在MBC发生、发展中的作用尚未见相关报道。本实验采用免疫组化检测p57kip2、ER、PR蛋白在MBC、男性乳腺导管内原位癌(ductal carcinoma in situ, DCIS)和男性乳腺发育(gynecomastia, GYM)组织中的表达，探讨p57kip2、ER、PR蛋白在MBC发生、发展中的作用。

1 材料与方法

1.1 临床资料 收集温州医科大学附属第一医院病理科2005年1月～2015年12月确诊的MBC标本50例，选取的MBC组织学类型为浸润性导管癌。TNM分期：Ⅰ期13例，Ⅱ期20例，Ⅲ+Ⅳ期17例；组织学分级：Ⅰ级12例，Ⅱ级24例，Ⅲ级14例；中位年龄51岁。收集DCIS和GYM各20例，作为实验对照组。患者术前均未作放、化疗等治疗。

1.2 试剂 p57kip2、ER、PR抗体、EliVision试剂盒及其他试剂，均购自福州迈新公司。

1.3 方法 所有石蜡标本，4 μm厚连续切片，免疫组化EliVision法染色。用福州迈新公司提供的阳性切片作阳性对照，以PBS代替一抗作空白对照。

1.4 结果判断 p57kip2、ER、PR蛋白阳性定位于细胞核，呈棕褐色或棕黄色。按阳性细胞百分比分为5级：无阳性细胞为0分，≤25%为1分，26%～50%为2分，51%～75%为3分，>75%为4分。按着色强度：无阳性着色为0分，淡黄色为1分，棕黄色为2分，棕褐色为3分。将着色强度积分与数量积分相加：0～1分为(-)，2分为(+)，3～4分为()，>5分为()；其中(+)～()为阳性，(-)为阴性[4]。

1.5 统计学处理 采用SPSS 17.0软件进行统计学分析，采用行×列表χ2检验、配对四格表χ2检验及Spearman相关分析进行统计学处理，P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 p57kip2在MBC、DCIS及GYM中的表达 在MBC、DCIS、GYM中，p57kip2蛋白阳性率分别为28.00% (14/ 50)、55.00%(11/20)、90.00%(18/20)(表1，图1～3)。

2.2 ER在MBC、DCIS及GYM中的表达 在MBC、DCIS、GYM中，ER蛋白阳性率分别为74.00%(37/50)、80.00%(16/20)、100%(20/20)(表1)。

2.3 PR在MBC、DCIS及GYM中的表达 在MBC、DCIS、GYM中，PR蛋白阳性率分别为64.00%(32/50)、85.00%(17/20)、100%(20/20)(表1)。

2.4 p57kip2、ER、PR蛋白表达与MBC临床病理特征的关系 在MBC中，p57kip2、ER、PR蛋白表达随着临床分期、组织学分级的增高而逐渐降低(P<0.05)。p57kip2蛋白表达与腋窝淋巴结转移有关(P<0.05)，ER、PR蛋白表达与淋巴结转移无关(P>0.05)。p57kip2、ER、PR蛋白表达与肿块大小、年龄无关(P>0.05，表2)。

2.5 p57kip2、ER、PR蛋白在MBC组织中表达的相关性 在MBC中，p57kip2与ER呈负相关(χ2=31.855，r=-0.647，P<0.05)；p57kip2与PR(χ2=7.028，r=0.351，P<0.05)、ER与PR呈正相关(χ2=6.584，r=0.380，P<0.05)。

3 讨论

细胞周期调控是近年生命科学研究的热点之一。Matsuoka等[5]于1995年克隆出p57kip2基因，位于染色体11pl5.5上。p57kip2参与调控细胞的分化、增殖，被认为是肿瘤抑制基因[6]。Yang等[7]研究显示，p57kip2蛋白在女性乳腺癌组织中低表达，p57kip2蛋白表达与组织学分级、淋巴结转移及ER、PR蛋白表达有关，p57kip2能抑制癌细胞的生长。本实验结果显示，p57kip2蛋白在GYM中的表达最高，在MBC中的表达最低，在MBC与DCIS、GYM中相比，差异有显著性(P<0.05)；在DCIS与GYM中相比，差异有显著性(P<0.05)。在MBC中，p57kip2蛋白表达随临床分期、组织学分级的增高而逐渐降低(P<0.05)；p57kip2蛋白表达与淋巴结转移有关(P<0.05)，但与患者年龄、肿块大小无关(P>0.05)，与在女性乳腺癌中的研究相似[7]。提示在正常男性乳腺组织中p57kip2蛋白高表达，阻滞细胞周期，一旦致癌因子使p57kip2蛋白低表达时，p57kip2便丧失抑制细胞增殖的作用，导致肿瘤发生。因此，p57kip2蛋白可以作为判断男性乳腺组织恶变的重要生物学标记。

研究表明，在正常女性乳腺组织中，ER、PR蛋白表达随着雌、孕激素水平的波动而变化，ER、PR蛋白表达与女性乳腺癌的发生、发展有关；雌激素与ER蛋白结合后，可促进乳腺癌的发生、发展[8]。孕激素与PR蛋白结合后，可抑制乳腺癌的发生、发展[9]。MBC的发生可能与雌激素过多有关，如肥胖、睾丸病变等[10]。国外研究显示，MBC中ER、PR蛋白表达均高于女性乳腺癌，与组织学分级、临床分期、淋巴结转移有关[3,11]。韩硕等[12]报道，ER、PR蛋白在MBC中表达较良性病变低。本实验结果显示，ER、PR蛋白在GYM中的表达最高，在MBC中的表达最低。在MBC中，ER、PR蛋白表达随临床分期、组织学分级的增高而逐渐降低(P<0.05)，ER与PR呈正相关(P<0.05)，与文献报道[11-12]相似。提示ER、PR的协调表达是男性乳腺细胞保持合适的分裂活性所必须的前提条件，如异常低表达则可促进MBC的发生、发展。ER、PR可作为评估男性乳腺组织发生恶性转变的生物学指标，是内分泌治疗效果的预测因子。

表1 p57kip2、ER、PR蛋白在MBC、DCIS及GYM中的表达

3种组织表达总的比较，★P<0.05；与MBC比较，▲P<0.05；与DCIS比较，●P<0.05

表2 p57kip2、ER、PR蛋白在MBC组织中表达与临床病理特征的关系

3个临床分期总的比较，☆P<0.05；与临床Ⅰ期比较，△P<0.05；与临床Ⅲ+Ⅳ期比较，○P<0.05；3个组织学分级总的比较，◇P<0.05；与组织学Ⅰ级比较，▽P<0.05；与组织学Ⅲ级比较，#P<0.05；3个淋巴结分组总的比较，□P<0.05；与无淋巴结转移组比较，※P<0.05

细胞周期调控异常是肿瘤细胞增殖异常的重要原因。本实验结果显示，p57kip2蛋白在GYM中的表达最高，在MBC中的表达最低；ER、PR蛋白在GYM中的表达最高，在MBC中的表达最低；p57kip2与ER呈负相关(P<0.05)，p57kip2与PR、ER与PR呈正相关(P<0.05)。提示ER可能抑制p57kip2的表达，促进细胞增殖；或可能PR表达下降，致协同因子p57kip2的表达也下降，促进细胞增殖，导致MBC的发生、发展。

综上所述，男性乳腺组织从良性增生到恶性转化中p57kip2、ER、PR蛋白表达逐渐降低，甚至完全丧失；联合检测p57kip2、ER、PR有助于MBC的诊断及预后判断。

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时间：2017-3-16 14:23

http://kns.cnki.net/kcms/detail/34.1073.R.20170316.1423.021.html

1温州医科大学附属第一医院病理科，温州 3250002温州医科大学第一临床医学院医学影像学系，温州 325000

罗祖强，男，硕士，医师。Tel:(0577)55579792，E-mail: luozuqiang86@163.com

R 737.9

B

1001-7399(2017)03-0320-03

10.13315/j.cnki.cjcep.2017.03.021

接受日期：2017-01-13