不同厂家银杏叶分散片中总黄酮醇苷溶出度的研究

钱璟 郑成

不同厂家银杏叶分散片中总黄酮醇苷溶出度的研究

钱璟 郑成

目的建立银杏叶分散片的总黄酮醇苷溶出度测定方法, 并测定比较不同厂家的银杏叶分散片的溶出度。方法采用桨法, 以0.1 mol/L盐酸溶液为溶出介质, 转速为100转/min, 经30 min取样,离心取上清液, 依照紫外可见分光光度测定法(UV)在265 nm的波长处测定吸光度, 采用自身对照法计算溶出度。结果滤膜对银杏叶分散片有部分吸附, 故采用离心取上清液测定；辅料基本无干扰；溶液稳定性良好。5个厂家9批银杏叶分散片样品30 min平均溶出度均达到80.0%, 且均一性良好；B厂样品溶出相对偏慢, 与其他厂样品溶出行为存在差异, 且批间差异较大。结论紫外可见分光光度测定法用于银杏叶分散片的溶出度测定快速、简便, 且具有区分力。对不同厂家银杏叶分散片的溶出度考察表明B厂制剂工艺欠稳定, 产品质量可控性有待进一步提高, 应关注工艺过程的中间控制。

银杏叶分散片；溶出度；紫外分光光度法

银杏叶分散片以银杏叶提取物为原料, 其主要活性成分为黄酮醇苷和萜类内酯。经查询国家食品药品监督管理局网站药品基础数据库, 银杏叶分散片目前有13个批准文号, 12家生产企业, 执行标准分别为国家食品药品监督管理局颁标准或试行标准。目前, 对于中药片剂仍主要以崩解时限作为其溶出速度控制的指标, 中国药典2015年版中银杏叶片标准也仅限于测定崩解时限［1］。但该检验项目仅能反映药物是否崩解, 不能准确反映药物的溶出量。作者根据国家药品标准提高要求收集了6家企业的银杏叶分散片及其注册标准,参考相关文献［2］, 采用UV-自身对照法统一总黄酮醇苷溶出度的测定方法并进行了方法学验证。

1 仪器与药品

1. 1 仪器天津大学ZRS-8B智能型药物溶出仪；岛津UV2700紫外-可见分光光度计。

1. 2 药品本次共收集到广东、江苏、北京、海南、湖北、辽宁6个厂家的15批银杏叶分散片, 其中A厂3批批号：20090101、20090601、20090801；B厂3批批号：081211、090712、100202；C厂3批批号：20080901、20080902、20090906；D厂3批批号：100101、100102、100301；E厂2批批号：100407、100408；F厂1批批号：20091201。水为纯化水；盐酸为分析纯。

2 方法与结果

2. 1 对照溶液的制备取本品10片, 研细, 精密称取适量(相当于0.5片平均片重), 置于500 ml量瓶中, 加溶出介质(0.1 mol/L盐酸)适量, 振摇使银杏叶提取物充分溶出(必要时可超声数分钟), 加溶出介质(0.1 mol/L盐酸)至刻度, 摇匀, 离心,取上清液作为对照溶液。

2. 2 供试品溶液的制备取供试品照溶出度测定法(中国药典2010年版二部附录XC第二法), 以0.1 mol/L盐酸溶液900 ml为溶出介质, 转速为100转/min, 在30 min时取样, 离心, 取上清液作为供试品溶液。

2. 3 总黄酮测定条件选择取对照溶液, 照紫外-可见分光光度测定法(中国药典2010年版一部附录VC), 在200～400 nm处扫描, 得最大吸收波长为264.5 nm, 故将检测波长定为265 nm。供试品溶液取样量为1片至900 ml 0.1 mol/L盐酸溶液中, 吸光度约为0.6～1.3, 考虑到采用自身对照法, 直接与对照溶液比较计算溶出率, 故可采用过滤后取续滤液或离心后取上清液, 直接测定即可。

2. 4 滤膜吸附试验取溶出介质制备的银杏叶分散片对照溶液(E厂, 批号为100408)分别用两个厂家(天津津腾、迪科马公司)生产的直径为25 mm、孔径为0.45 μm的水性滤膜过滤后, 取滤液2 ml, 照溶出度UV法测定, 结果显示两个厂家的滤膜对银杏叶分散片均有部分吸附, 吸光度降低约10%, 故本法采用离心取上清液测定。

2. 5 辅料的影响经调研, 各银杏叶分散片生产厂家所用辅料及用量均有差别, 片重最大为0.5 g/片, 故将所有用于银杏叶分散片的辅料(交联聚乙烯吡咯烷酮、氯化钠、羧甲基淀粉钠、微粉硅胶、乳糖、硬脂酸镁、微晶纤维素、羟丙纤维素钠、硫酸钙、磷酸氢钙、阿斯巴甜), 分别按0.5 g/片制成空白制剂, 按“2.2”项下方法制备空白辅料溶液进行测定。结果表明, 大多数辅料均无吸收, 辅料对溶出度测定基本无干扰。

2. 6 溶液稳定性取供试品溶液(E厂, 批号为100408), 分别于0、1、3、6、12、16、24 h进行分析, 结果吸光度的相对标准偏差(RSD)为2.0%, 显示供试品溶液在24 h内基本稳定。

2. 7 溶出度均一性试验取6家企业的银杏叶分散片各一批(A厂批号20090101；B厂批号081211；C厂批号200800901；D厂批号100101；E厂批号100408；F厂批号20091201), 依“2.2”项下操作, 分别在3、5、10、20、30、45 min时取样, 制备供试品溶液, 并即时补充37℃的溶出介质等量；另按“2.1”项下方法制备对照溶液。在265 nm波长处测定吸收度, 计算每片在各时间点的累积溶出量及批内溶出结果的RSD值, 结果6批样品在上述各时间点的批内溶出RSD在0.5%～3.7%, 溶出均一性良好。

2. 8 溶出曲线取“2.7”项下A、B、C、D厂的样品各1批,照“2.7”项下测定结果, 绘制溶出曲线图谱。见图1。

图1 银杏叶分散片溶出曲线图

2. 9 溶出度测定取本品, 照“2.1”、“2.2”项下方法制备供试品溶液及对照溶液, 照紫外-可见分光光度测定法(中国药典2010年版一部附录VA)试验, 在265 nm波长处分别测定吸光度, 按下式计算每片的溶出量。溶出量=(供试品吸光度÷平均片重)/(对照吸光度÷对照样品称样量)×1.8×100%。

取5家生产企业的银杏叶分散片进行测定, A厂批号20090601和20090801、B厂批号090712和100202、C厂批号20080902和20090906、D厂100102和100103、E厂批号100407, 结果上述样品溶出度分别为：A厂99.3%和99.3%、B厂100.9%和80.0%、C厂98.1%和98.7%、D厂98.7%和99.4%、E厂98.8%。除B厂一批样品测定结果为80.0%, 其余样品30 min平均及每片溶出量均＞80.0%, 故规定溶出度的限度为80.0%。

3 讨论

3. 1 溶出度检测是评价制剂处方、生产工艺和生物利用度的重要指标, 中药制剂由于其成分及样品处理复杂, 建立有效、可控的溶出度测定方法较为困难, 很多中药制剂仍采用崩解时限检查衡量其溶出情况, 但事实上崩解时限与溶出度并不具有相关性［3-5］, 因此探讨建立中药制剂中活性成份体外溶出度的测定方法, 对处方、工艺筛选和控制产品质量具有科学意义。本文在综合各银杏叶分散片标准的基础上, 建立了以0.1 mol/L盐酸为溶出介质、总黄酮醇苷含量为测定指标的溶出度检查方法, 并且考虑各标准中均已有总黄酮醇苷的高效液相色谱法(HPLC)含量测定, 作为溶出度检查, 旨在考查制剂的体外溶出行为, 因此采用较科学简便的UV法来测定吸收度。

3. 2 中药制剂的含量限度大多采用最低限度表示, 为了避免因含量偏高使溶出度测定结果偏高而合格的情况, 本文在处理数据时采用自身对照法, 以消除含量过高引起的正误差,准确反映样品的真实溶出度［6-8］。

3. 3 制剂的原辅料、处方及生产工艺对其溶出行为有很大影响, 即使是同一制剂, 不同生产厂家或同一生产厂家的不同批号产品间, 其溶出度都可能存在差异, 从而造成临床疗效的差异。本文根据“2.8”中不同厂家的溶出曲线对比可见, A、C厂样品溶出较快, 5 min溶出达到90%以上, 相对而言B厂样品溶出明显偏慢, 与其他厂样品溶出行为存在差异,由此可见本文溶出度测定方法对不同溶出行为的样品具备一定的区分能力；在“2.9”样品测定中B厂两批样品的溶出度差异提示其批间一致性欠佳, 制剂工艺欠稳定, 产品质量可控性有待进一步提高, 应关注工艺过程的中间控制。

［1］ 国家药典委员会. 中国药典(2015年版一部). 北京: 中国医药科技出版社, 2015:1491-1492.

［2］ 莫志江, 危华玲. 银杏叶片的体外溶出度研究. 中国现代应用药学杂志, 2003, 20(2):137-139.

［3］ 余琛, 张慧, 洪有采, 等. 银杏叶片的溶出度试验. 中国医药工业杂志, 1998, 29(1):27

［4］ 宋英. 银杏叶片的质量研究与制备工艺改进. 复旦大学, 2011.

［5］ 陶红, 张韬, 单义. RP-HPLC测定不同厂家银杏叶片剂中总黄酮醇苷溶出度. 中成药, 2009, 31(8):1226-1229.

［6］ 向阳, 黄志军, 熊富良, 等. 银杏叶分散片的溶出度研究. 药物分析杂志, 2010, 30(8):1428-1431.

［7］ 齐惠珍, 周霞瑾, 田培虹. 银杏叶分散片中总黄酮醇苷的含量测定. 河北医药, 2015(20):3178-3180.

［8］ 陈颖, 周青红, 全向阳. HPLC-UV法测定银杏叶分散片总黄酮醇苷溶出度. 中国标准化, 2006(11):70-73.

Study on dissolution of total flavonoid glycoside in ginkgo biloba leaves dispersible tablets from different manufactures

QIAN Jing, ZHENG Cheng. Zhejiang Province Drug Cosmetics Review Center, Hangzhou 310000, China

ObjectiveTo establish a dissolution test method for the total flavonoid glycoside in ginkgo biloba leaves dispersible tablets and compare the dissolution of ginkgo biloba leaves dispersible tablets from different manufactures.MethodsThe paddle method is applied in dissolution medium of 0.1 mol/L hydrochloric solution, with revolving speed as 100 r/min, and after 30 min, centrifugal clear liquid after centrifugation was sampled. Absorbance was determined at the wavelength of 265 nm according to ultraviolet-visible spectrophotometry (UV) method, and self-contrasted method was used to calculate the dissolution.ResultsMembrane had partial adsorption of ginkgo biloba leaves dispersible tablets, so determination was made on centrifugal clear liquid after centrifugation. Supplementary material was basically not interfered and the solution stability was good. The average 30-min dissolution of ginkgo biloba leaves dispersible tablets in 9 batches of 5 factories was 80.0%, and its uniformity was good. B factory had relatively slow sample dissolution, and there was differences in sample dissolution behavior compating with other factories, and it had large differences between batches.ConclusionUltraviolet-visible spectrophotometry method applying for determining dissolution of ginkgo biloba leaves dispersible tablets is simple, rapid and discriminating. Dissolution investigation of ginkgo biloba leaves dispersible tablets from different manufacturers shows that B factory preparation process is unstable. Product quality controllability remains to be further improved, and more attention should be payed to middle control of craft process.

Ginkgo biloba leaves dispersible tablets; Dissolution; Ultraviolet spectrophotometry

10.14164/j.cnki.cn11-5581/r.2017.08.097

2017-03-16］

310000 浙江省药品化妆品审评中心