肠道微生态制剂对结直肠癌患者术后免疫功能及并发症的影响

李东正++周建农

[摘要] 目的 探討肠道微生态制剂对结直肠癌患者术后免疫功能及并发症的影响。 方法 采用随机数字表法将江苏省肿瘤医院普通外科2015年6月～2016年4月手术治疗的80例结直肠癌患者分为观察组和对照组，每组40例。对照组术前给予常规肠道准备，观察组术前给予微生态制剂，比较两组手术前后菌群的变化、炎症因子、免疫功能及并发症。 结果 观察组术后7 d的致病菌少于对照组，益生菌多于对照组，差异有统计学意义（P < 0.05）。观察组术后7 d的C反应蛋白、肿瘤坏死因子α、白细胞介素6水平均低于对照组，CD4+高于对照组，差异有统计学意义（P < 0.05）。观察组术后伤口感染、全身炎症反应综合征、肺部感染、吻合口感染发生率均低于对照组，两组术后感染总发生率比较，差异有统计学意义（P < 0.05）。 结论 肠道微生态制剂可减少结直肠癌患者术后菌群失衡，改善患者术后炎性状态和免疫功能，减少术后感染性并发症的发生。

[关键词] 肠道微生态制剂；结直肠癌手术；术后免疫力；并发症

[中图分类号] R735.35 [文献标识码] A [文章编号] 1673-7210（2016）12（b）-0106-05

Effect of intestinal Micro Ecological Preparations on immune function and complications in patients with colorectal cancer after operation

LI Dongzheng ZHOU Jiannong▲

Department of General Surgery， Jiangsu Cancer Hospital， Jiangsu Province， Nanjing 210000， China

[Abstract] Objective To investigate the effect of intestinal Micro Ecological Preparations on immune function and complications in patients with colorectal cancer after operation. Methods 80 cases of colorectal cancer operation in Department of General Surgery of Jiangsu Cancer Hospital during the June 2015 to April 2016 were randomly divided into the observation group and the control group according to the random number table. Before the surgery， the control group was given routine bowel preparation， and the observation group was given intestinal Micro Ecological Preparation. Changes of intestinal flora， inflammatory factors， immune function and complications in the two groups were compared. Results The pathogenic bacteria in the observation group was less than that in the control group， and the probiotics in the observation group was more than that in the control group， the difference was statistically significant （P < 0.05）. The level of C reactive protein， tumor necrosis factor α， interleukin 6 after 7 d of the operation in the observation group were lower than those in the control group， and CD4+ in the observation group was higher than that in the control group， the difference was statistically significant （P < 0.05）. The incidence of postoperative wound infection， SIRS， pulmonary infection in the observation group were lower than those in the control group， and the incidence of complications in the two groups had statistically significant difference （P < 0.05）. Conclusion Intestinal Micro Ecological Preparation can reduce the postoperative intestinal flora imbalance， and improve postoperative inflammatory state and immune function. It can reduce the incidence of postoperative infectious complications of patients with colorectal cancer.

[Key words] Intestinal Micro Ecological Preparation； Colorectal cancer surgery； Postoperative Immunity； Complications

结直肠癌是仅次于胃癌的消化道恶性肿瘤[1]，严重危害人类的健康。手术是治疗结直肠癌的首选治疗方法。但手术会造成患者肠道内明显的菌群失衡[2]，这主要是由于结直肠癌的术前肠道准备导致肠黏膜缺血、缺氧，破坏了肠道正常的形态，使肠黏膜受损。同时抗生素的使用非选择性地杀灭革兰阴性杆菌和厌氧菌，加之手术刺激等形成高分解代谢，加速了营养物质的消耗，进一步加重了肠黏膜屏障受损[3]。这种菌群失衡在一定程度上会使细菌發生移动，造成炎症反应，还可导致机体体液免疫、细胞免疫以及非特异性免疫功能下降[4]。因此对于结直肠癌手术患者及时给予肠道菌群调整是十分必要的。微生态制剂是一种生理性活菌制剂，可改善手术患者的免疫功能、提高营养状态、维持和保护肠黏膜屏障功能，在控制术后感染发生方面具有一定优势[5]。本研究以结直肠癌患者为研究对象，分析肠道微生态制剂对患者术后免疫功能及并发症的影响，为日后围术期的处理提供参考依据。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选取于江苏省肿瘤医院普通外科2015年6月～2016年4月接受手术治疗的80例结直肠癌患者为研究对象，纳入标准：①参照2015年版原卫生部制定的《结直肠癌诊疗规范》[6]，符合结直肠癌诊断标准者；②年龄<75岁者；③经盆腔CT、结肠镜及病理学诊断确诊，肠镜显示结肠或直肠单个肿瘤者；④均自愿参与研究，并经医院伦理委员会同意；⑤术前1个月未使用过导泻药、微生态活菌剂、抗生素者；⑥活检病理检查证实为腺癌者；⑦肝肾功能正常者。排除标准：①其他重要器官严重疾病者；②神经系统、血液系统、消化系统疾病者等；③自身免疫性疾病者；④术前有肠梗阻，不能耐受手术者；⑤一般状况差，严重营养不良者；⑥肠道炎症、穿孔等表现，既往有胃肠手术史者；⑦术前使用糖皮质激素者；⑧腹腔或盆腔CT或B超提示肿瘤有远处转移者；⑨有结直肠手术或放化疗史者。采用随机数字表法将所有患者分为观察组（40例）和对照组（40例），两组患者在年龄、性别、病变位置、Dukes分期、病理类型等一般资料方面比较，差异无统计学意义（均P > 0.05）。见表1。该研究经我院伦理委员会批准。

1.2 方法

两组手术方式基本一致，给予腹腔镜根治术或开腹根治术治疗。

对照组术前给予传统肠道准备，术前3 d口服0.8 g维生素K（昆山双鹤药业有限责任公司，批号：130604），0.4 g甲硝唑（亚宝药业集团股份有限公司，批号：140209），1 g卡那霉素（昆明赛诺制药有限公司，批号：13102202），3次/d。术前2～3 d指导患者进食半流质饮食，术前1 d全流质饮食。术前晚口服30 mL蓖麻油，进行肠道清洁。麻醉诱导期静脉推注2 g舒巴坦+头孢哌酮。术后1 d将胃管拔除，给予早期肠内营养。

观察组于术前5 d口服肠道微生态制剂，2.0 g双歧杆菌乳杆菌三联活菌片（内蒙古双奇药业股份有限公司，批号：150610），3次/d，不服用抗生素，其他处理措施同对照组。术后1 d拔除胃管进行早期肠内营养时继续服用2.0 g双歧杆菌乳杆菌三联活菌片，3次/d，连续7 d。

1.3 观察指标

1.3.1 菌群检测 两组患者于术前3 d、术后7 d收集新鲜大便500 mg（粪便中段），将样本置于无菌密封装置内，保存于-4℃冰箱中备检。检测指标包括致病菌（大肠埃希菌、肠球菌、葡萄球菌、消化链球菌、类杆菌）和益生菌（乳酸杆菌、双歧杆菌、酵母菌）[5]。检测时将以上菌群置于含有4.5 mL标本稀释液中的小瓶中，置旋涡混合器，以300 r/min震荡1 min左右充分混匀。接种完毕后选择性培养基平板上行细菌培养，37℃培养24 h后观察结果并计数，分析肠道细菌比例。

1.3.2 血液样本的采集 清晨取空腹肘静脉血4 mL，混匀后4℃，2500 r/min离心10 min，取血清分装，做好标记，-80℃条件保存，测定当日于37℃水浴中迅速复融。

1.3.3 炎症指标的检测 取上层血清用于炎症指标的检测，指标包括肿瘤坏死因子α（TNF-α）、白细胞介素6（IL-6）、C反应蛋白（CRP）。采用免疫比浊法测定CRP，使用CRP试剂盒（复星长征公司，批号：AR 0146）；采用双抗体夹心酶标免疫法（ELISA）检测TNFα、IL-6，使用TNFα试剂盒（武汉博士德公司，批号：2401149511）和IL-6试剂盒（武汉博士德公司，批号：1331145511）。

1.3.4 免疫功能指标的检测 取上层血清用于免疫功能检测。指标包括CD4+和CD8+，采用美国B.D流式细胞仪检测。以上血液检验均由医院检验科工作人员进行测定，统一质控标准，所有检测试剂均在有效期内，按照《全国临床检验操作规程》[7]，严格按照说明书的操作标准进行。

1.3.5 并发症发生情况 统计两组患者术后感染性并发症的发生情况，包括伤口感染、全身炎症反应综合征（SIRS）、肺部感染、腹腔感染、吻合口感染。其中SIRS的判定标准为[8]：心率>90次/min；体温>38℃或 <36℃；呼吸频率20次/min或过度通气，动脉血二氧化碳分压（PaCO2）<32 mmHg；外周白细胞计数>12.0×109/L或<4.0×109/L或未成熟粒细胞比例>10%。符合以上两项或两项以上即可诊断为SIRS。

1.4 统计学处理

采用SPSS 13.0统计软件对数据进行分析，计量资料以均数±标准差（x±s）表示，符合正态分布的组间比较采用t检验，手术前后肠道菌群计数差别比较采用配对样本t检验，两组肠道菌群计数差别比较采用独立样本t检验，不符合正态分布的采用秩和检验，计数资料用百分率（%）表示，采用χ2检验，以P < 0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 两组患者手术前后菌群比例变化的比较

两组患者术前3 d的肠道菌群情况比较，差异无统计学意义（P > 0.05）。观察组术后7 d的致病菌比例显著下降，益生菌比例显著上升，与术前相比，差异有统计学意义（P < 0.05）。对照组术后7 d的致病菌葡萄球菌比例上升，益生菌双歧杆菌和乳酸杆菌比例下降，与术前相比，差异有统计学意义（P < 0.05）。观察组术后7 d的菌群与对照组相比，差异有统计学意义（P < 0.05）。见表2。

2.2两组患者手术前后炎症因子水平的比较

两组患者术前炎症因子水平比较，差异无统计学意义（P > 0.05）。两组患者术后7 d的炎癥因子水平升高，与术前相比，差异有统计学意义（P < 0.05）。观察组术后7 d的CRP、TNF-α、IL-6水平均低于对照组，差异有统计学意义（P < 0.05）。见表3。

2.3 两组患者手术前后免疫功能指标的比较

两组患者术前免疫功能指标比较，差异无统计学意义（P > 0.05）。两组术后7 d的CD4+、CD8+较术前3 d有下降趋势。观察组术后7 d的CD4+高于对照组，差异有统计学意义（P < 0.05）。两组术后7 d的CD8+、CD4+/CD8+比较，差异无统计学意义（P > 0.05）。见表4。

2.4 两组患者术后并发症发生率的比较

观察组术后伤口感染、SIRS、肺部感染、吻合口感染发生率均低于对照组，两组术后感染总发生率比较，差异有统计学意义（P < 0.05）。见表5。

3 讨论

结直肠癌是比较常见的消化系统恶性肿瘤，发病率占恶性肿瘤的第3位，死亡率的第5位。近年来，我国结直肠癌的发病率有逐渐升高的趋势。对于有条件接受手术治疗的患者，尽早手术治疗，切除病灶，是延长患者生存期，改善预后的关键。有研究发现，结直肠癌患者在术前就伴有肠道微生态、代谢模式的改变以及细胞免疫功能的下降，而手术会对肠道造成严重的创伤，加剧肠道屏障的破坏，使细菌发生移位和产生内毒素血症[9-10]。内毒素血症可刺激肝巨噬细胞，提高血液中炎性因子的浓度，包括IL-6、IL-2、TNF等，造成全身炎症反应，严重者可发生器官功能不全，同时也增加术后感染并发症的发生[11]。这种状态不仅不利于患者术后的康复，而且也增加了肿瘤复发的机会。结直肠癌术后发生肠道菌群失调除却疾病自身的原因，可能还与术前口服肠道抗生素、非选择性地杀灭厌氧菌、革兰阴性杆菌以及抑制双歧杆菌的生长有关[12]。近年来，微生态免疫营养制剂在结直肠癌患者中逐渐应用起来。有研究报道[13]，微生态制剂可降低结直肠癌患者术后炎症反应，抑制感染和减少并发症发生。

本研究结果表明，与术前肠道常规准备的对照组相比，采用微生态制剂后，患者术后7 d的致病菌比例显著下降，益生菌比例显著上升，差异有统计学意义，与以往研究结果基本一致[14-15]。结直肠癌患者围术期口服微生态制剂，可通过补充双歧杆菌以及乳酸杆菌的分布数量，构成肠道的生物屏障，而且菌膜产生亲脂分子抑制致病菌和条件致病菌对肠上皮黏附和定植，使肠道菌群重新恢复动态平衡[16-17]。本研究结果还证实，微生态制剂除了有效纠正肠道菌群失调以外，还能显著降低结直肠癌术后7 d的CRP、TNF-α、IL-6水平，降低炎症反应带给患者的伤害。近来还有研究报道[18-19]，益生菌的补充能够激活吞噬细胞的活性，刺激T淋巴细胞及B淋巴细胞的成熟，诱导产生代谢素，活化免疫细胞，促进机体免疫球蛋白的产生，从而提高机体的免疫力。本研究结果显示，与术前常规肠道相比，采用微生态制剂后，患者术后7 d的CD4+高于对照组，差异有统计学意义。另有研究报道[20]，结肠癌术后采用微生态制剂，能够提高患者的免疫力，改善营养状况，促进胃肠功能的恢复。微生态制剂中的乳酸菌能够游离脂肪酸、氨、过氧化氢和细菌素，产生有机酸，这些物质能够刺激脾中NK细胞活性，促使Th1细菌增殖，造成IgE抗体增加，有效抗菌[21]，加之乳酸菌本身可抑制病原菌在体内的复制，可有效对抗感染，减少术后感染相关并发症的发生，改善内毒素休克状态下肠道黏膜功能损害[22]。本研究结果还显示，与术前常规肠道相比，采用微生态制剂后，患者伤口感染、SIRS、肺部感染等并发症的发生率低，差异有统计学意义。

综上所述，肠道微生态制剂能够减少结直肠癌患者术后菌群失衡，改善患者的术后炎性状态和免疫功能，降低术后感染性并发症的发生，值得推广。

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（收稿日期：2016-09-05 本文编辑：王红双）