海林格:致力成为动物疫苗黏膜免疫领导者——记2017海大论道暨第一届动物黏膜免疫与疫苗设计论坛

海林格:致力成为动物疫苗黏膜免疫领导者
——记2017海大论道暨第一届动物黏膜免疫与疫苗设计论坛

本刊编辑/薛惠莉

为推动动物黏膜免疫系统理论体系的行业认知与了解，推广黏膜免疫疫苗设计的研发和临床应用，3月20-22日，四川海林格生物制药有限公司（以下简称“海林格”）在广州召开了“2017海大论道——第1届动物黏膜免疫与疫苗设计技术论坛”。海林格公司特别邀请了国内黏膜免疫顶级专家、国内首个黏膜免疫疫苗申报团队、各省生猪现代产业技术体系疾病控制研究室岗位科学家以及国内著名养殖企业的总经理/技术总监组成了超重量级的实践型专家团队主讲本次论坛各类技术专题报告；以“汇聚全球黏膜免疫前沿智慧，引领中国动物疫病防控创新”为主题，与会嘉宾围绕当前主要疫病防控和动物黏膜免疫疫苗的研究进展情况进行了阐述分析，并就动物疫苗的研究与生产提出了精彩见解与对策。

什么是黏膜免疫？

传统的肌肉注射免疫大家都知道，那到底什么是黏膜免疫？黏膜免疫基础理论研究证明，动物黏膜免疫系统是指机体与外界相接触的腔道黏膜表面的免疫系统，主要由呼吸道、消化道、泌尿生殖道黏膜及某些外分泌腺（如唾液腺、泪腺及乳腺等）黏膜相关的淋巴组织所组成的免疫系统，是机体抵抗病原微生物入侵的第一道屏障。已知的黏膜部位免疫细胞（如M细胞、树突状细胞）和免疫分子（如SIgA)的数量均超过全身免疫系统，黏膜免疫系统在防御动物传染病的发生中发挥着不可替代的重要作用，且又具有相对独立性。

图1 会议现场

目前，动物黏膜免疫系统理论体系的认知和黏膜免疫（疫苗设计和黏膜免疫佐剂研制）的实践还没有受到行业的研究开发和临床应用的重视。海林格公司近年来致力于共同黏膜免疫系统疫苗设计研究和临床应用实践，取得了超出预期的临床效果。

滴鼻免疫流感活疫苗已得到认可

南京农业大学博士生导师杨倩教授深入浅出地为与会者做 “动物共同黏膜免疫理论体系与疫苗设计技术”的报告。关于鼻腔免疫及其疫苗设计，杨教授提到由于鼻腔后部黏膜下分布有丰富的毛细血管和大量黏膜相关的淋巴组织，鼻腔免疫具有抗原诱导免疫反应阈值低、抗原用量少，不受消化酶的影响、不引起免疫耐受等优点，鼻腔免疫诱导免疫反应能力保持较长时间。2010年美国启动流感疫苗工程，通过滴鼻免疫活的流感疫苗已得到认可，鼻腔免疫预防猪的猪繁殖与呼吸综合征、猪支原体肺炎和猪流感等病已有研究。同样，鼻腔免疫存在着挑战，鼻腔上皮纤毛的摆动和上皮黏液可分别影响抗原的滞留和吸收；抗原进入鼻腔后只能在黏膜表面做短暂的停留；假复层纤毛柱状上皮细胞间的紧密连接产生的物理屏障；多数抗原单独进行鼻腔免疫时免疫原性较弱等特点，所以要有相应的设计原则。首先要解决疫苗抗原在鼻腔黏膜表面黏附和滞留问题，黏膜疫苗需要黏附在黏膜上，黏附的时间越长发挥的效果就越好，然后增强抗原的免疫原性，促进M细胞、树突状细胞有效摄取抗原，解决抗原跨上皮吸收的困难。

因黏膜免疫较难计算抗原量和确定免疫反应，缺乏标准化试验和临床评价标准。尽快建立黏膜免疫评价标准，靶向M细胞和树突状细胞（针对黏膜组织）针对感染选择接种的途径，黏膜疫苗设计上需要考虑动物和各种病原的不同安全性、稳定性（在胃肠道），成本是制约免疫增强剂在畜牧生产中应用的关键，寻找低成本、易制备、高效且安全的兽用疫苗免疫增强剂。

杨教授表示根据黏膜免疫特点，如何增加抗原的递呈是核心问题，但可通过免疫增强佐剂等方式解决；而口服免疫疫苗则需要克服消化酶的降解，而且需要二次免疫才能达到预期效果。鼻腔免疫则需要克服纤毛的摆动，想办法延长疫苗抗原在其的停留时间。

4款猪用疫苗产品组合已上市

海林格公司总经理赵金旺分享了海林格公司对动物黏膜免疫的理解、疫苗产品方案和研发方向，展现了海林格公司在动物黏膜免疫领域特色发展道路上的蓝图。

海林格公司针对当前养猪业最常见的7大疫病：猪瘟、猪伪狂犬病、猪圆环病毒病、猪流行性腹泻病毒病、猪蓝耳病、猪支原体肺炎和口蹄疫，海林格公司目前推出4款猪用疫苗产品组合。

“海联安”，即猪瘟活疫苗、猪伪狂犬病活疫苗组合产品。为解决猪瘟超前免疫临床上实际操作不易落实，以及避免仔猪肌注猪瘟活疫苗病毒、猪伪狂犬病活疫苗病毒（早期免疫接种）等受到母源抗体干扰的情况，海大集团畜牧兽医研究院在成功研制出猪流行性腹泻病毒灭活疫苗黏膜免疫佐剂的基础上，又成功研制出针对猪瘟活疫苗、猪伪狂犬病活疫苗专用黏膜免疫佐剂。依据专有的黏膜免疫（佐剂）技术，在仔猪出生1～3日龄，鼻腔喷鼻黏膜免疫猪瘟活疫苗、猪伪狂犬病活疫苗组合产品，因不受母源抗体的干扰或影响，取得了理想的猪瘟、猪伪狂犬病活疫苗的临床免疫效果。

针对猪圆环病毒病防控存在的注射与应激问题、保护时间短（免疫100日龄左右仍有发病）等问题，海林格推出“海圆安”产品，即猪圆环病毒2型疫苗，采用原创佐剂生物油活性物质聚合缓释技术，使疫苗具有不怕冷、不怕热，好抽易打，无应激，除僵猪等显著效果。

即将上市的黏膜免疫“海泻安”，即猪传染性胃肠炎、猪流行性腹泻病毒二联灭活疫苗，据了解，该产品拥有2项猪流行性腹泻核心国家发明专利技术。另外，海林格预计2017-2019年上市销售的疫苗产品还有，副猪嗜血杆菌三价灭活疫苗和猪支原体肺炎灭活疫苗。

此次会议还邀请到中国动物卫生与流行病学中心家畜病监测室负责人李晓成研究员，海大集团畜牧兽医研究院院长王贵平博士，河南省生猪产业技术体系首席科学家郭成留研究员，中国兽医协会动物诊疗分会副会长、猪病组组长白挨泉教授，广东温氏食品集团股份有限公司养猪事业部生产技术部副总经理王连想博士，云南智康源农牧科技有限公司董事长彭克高研究员，云南农业大学副教授、硕士生导师、中国病理生理学会动物病理生理学专业委员会秘书长严玉霖博士，江西省畜禽育种中心主任、江西农大动科院王亚鸣副教授，海大集团益豚猪业事业部兽医总监、海大集团湖南益豚猪业公司副总经理陈果亮博士等知名专家，其中，李晓成研究员作了《2017年我国猪病流行态势分析》的报告，王贵平院长作《猪流行性腹泻病原分离鉴定及黏膜免疫疫苗的研究》的报告。

王院长的报告分析了当前猪流行性腹泻病毒（PEDV）流行趋势：由北向南逐渐加强。目前流行的特点：产房出现跳跃式爆发，没有明显季节性。据统计，消化道感染的发病率在感染性疾病中居第二位，在感染过程中，肠道黏膜的免疫屏障被破坏，造成临床各种症状，因此，研究肠道黏膜的免疫屏障至关重要，在肠道黏膜免疫中起重要作用的是分泌型SIgA。

图2 会议合影

据王院长介绍，海大研究院从2010年-2016年间在广东猪场临床分离到52株PEDV毒株，经过筛选培育出毒力较强、免疫原性最好的流行株，通过不断改进培养方法，病毒滴度及生长速度都得到很大提高，并突破了病毒培养从平面到悬浮培养的关键技术研究，为规模化生产奠定基础。

克服PEDV的培养难题后，海大研究院对免疫剂型、佐剂和免疫途径也进行了深入研究。目前腹泻疫苗主要以肌肉注射、后海穴注射为主，效果并不很理想，因此海大研究院在黏膜免疫途径方面做了大胆尝试，通过口服免疫的胶囊、混悬液、包裹颗粒等，最终选定喷鼻免疫方式。据他介绍，PEDV的靶细胞是肠上皮细胞，而形成有效的免疫反应应该是阻断病毒进入肠道上皮细胞，取决于在消化道表面的SIgA。而仔猪SIgA来源则依赖母乳中SIgA含量的高低。根据胃肠道——乳房免疫轴理论，通过胃肠道或呼吸道免疫，可诱导相关免疫细胞分化并迁移到乳腺中定居，合成大量SIgA 释放到乳汁中。

由于喷鼻免疫的腹泻疫苗还没有先例，海大研究院还同步研发了具有强烈细胞膜亲和作用，抵御鼻黏膜分泌物破坏、能协助突破黏膜屏障，提高抗原递呈细胞识别病毒和亚单位抗原的新型黏膜免疫佐剂。

论坛活动期间，海林格公司组织与会专家学者、大型养殖客户莅临海林格公司的研发承接机构——海大集团研究院进行了参观考察，嘉宾再次见证了海大集团雄厚的科研实力。

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四川海林格生物制药有限公司是广东海大集团股份有限公司的控股子公司，前身是国营企业四川省兽医生物药品厂，是一家具有50多年历史，专业从事兽医生物制品研发、生产、销售和服务于一体的高科技企业，2015年5月由广东海大集团股份有限公司控股重组后更名为“四川海林格生物制药有限公司”。