呼吸道过敏患儿与特异性IgG抗体表达水平的相关研究*

陈辉，高昆，许芳明，张乾，章学英，王岭，刘春梅，姜玮，陈建萍

（上海市徐汇区大华医院1.儿科，2.检验科，上海 200240）

呼吸道过敏患儿与特异性IgG抗体表达水平的相关研究*

陈辉1，高昆2，许芳明1，张乾1，章学英1，王岭1，刘春梅1，姜玮1，陈建萍1

（上海市徐汇区大华医院1.儿科，2.检验科，上海 200240）

目的 探讨食物特异性IgG的表达水平与非IgE介导的呼吸道过敏的关系，以及特异性IgG定量检测能否作为食物引起呼吸道过敏反应的诊断指标之一。方法选取2013年12月-2015年12月在该院儿科哮喘门诊诊治的非IgE介导呼吸道过敏的患儿，共78例，健康对照组27例。在饮食回避后对入组患儿进行疗效判断，其标准为症状消失或明显改善，症状评分为3分；症状有所改善为2分；症状无改善或加重为1分视为无效。然后，对特异性IgG的表达水平与临床症状评分之间的关系进行分析，并通过ROC曲线评估特异性IgG的诊断价值。结果过敏组患儿的临床症状得分以及特异性IgG的表达水平，与对照组比较，均升高，差异有统计学意义（P＜0.05）。入组患儿的临床症状得分与特异性IgG水平呈正相关；且特异性IgG的诊断准确性较高，ROC曲线下面积为0.713。结论特异性IgG抗体水平的测定在非IgE介导儿童食物引起呼吸道过敏诊断中有一定的参考价值，可在临床上推广使用。

特异性IgG；非IgE介导；过敏性疾病；诊断

近十年来，由食物引起呼吸道过敏的患儿明显增加[1-2]，其发病机制可分为IgE介导、非IgE介导以及IgE与非IgE混合介导[3-4]。IgE介导的呼吸道过敏研究最为多见，属于经典的Ⅰ型变态反应，多引起急性病变；血清食物特异性IgE检测、皮肤针刺实验等可用于诊断IgE介导的呼吸道过敏[5-6]。而非IgE介导的呼吸道过敏可涉及到IgG、IgA及细胞介导的多种免疫学机制，目前对其研究知之甚少，此类过敏反应常引起亚急性或慢性病变，皮肤点刺实验以及特异性IgE检测对该疾病的诊断均有一定的限制性[7]。临床上，双盲安慰剂对照的食物激发试验是诊断非IgE介导呼吸道过敏的“金标准”[8]，但因有一定的风险而受到医院条件与操作人员水平的限制，给临床诊断带来了一定的困难。有研究表明，辅助性T细胞与非IgE介导的食物引起呼吸道过敏有关，而辅助性T细胞产生的细胞因子，可以促进食物特异性IgG的表达[9-10]，且特异性IgG简便易测，所以IgG有望可以成为非IgE介导儿童食物引起呼吸道过敏诊断指标之一。因此，此次研究的目的是探究IgG的表达水平与非IgE介导食物引起呼吸道过敏的关系以及IgG检测结果阳性能否作为食物引起呼吸道过敏反应的诊断指标之一。

1 资料与方法

1.1 一般资料

收集2013年12月-2015年12月78例在上海市徐汇区大华医院儿科哮喘门诊诊治的非IgE介导呼吸道过敏性疾病患儿相关资料作为过敏组。男46例（58.97%），女32例（41.03%）；年龄2～7岁。并同时收集27例儿科普通门诊无过敏症状的同龄体检儿童资料作为对照组，男18例（66.67%），女9例（33.33%）。

1.2 过敏组患儿入选标准

总IgE正常范围，特异性IgE阴性，愿意参加此次研究者。入组患儿符合伦理学要求，哮喘与鼻炎诊断符合诊疗指南，鼻窦炎诊断均有副鼻窦CT检查证实。

1.3 过敏组患儿排除标准

总IgE超过正常值或正常范围同时伴有特异性IgE阳性；不愿意参加此次研究者；近期患影响免疫功能的疾病者。

1.4 特异性IgG定量检测

在患儿饮食回避前、后采用酶联免疫方法（ELISA）检测血清特异性IgG水平。酶标仪系美国伯腾公司的Elx808，检测试剂盒由美国BIOMERRICA公司生产，可同时检测14种常见食物的IgG抗体，包括牛肉、鳕鱼、鸡肉、玉米、大米、蟹、蛋黄/蛋清、蘑菇、牛奶、猪肉、虾、大豆、西红柿和小麦。使用BD公司有促凝胶真空采血管采集患儿静脉血2～3ml，分离血清。按照ELISA试剂盒检测血清中IgG抗体，450 nm处比色，根据每孔吸光度及标准曲线计算IgG抗体水平（u/ml）。

1.5 观察指标

食物特异性IgG抗体检测判断标准：根据试剂盒说明将IgG抗体水平分为4级：检测值＞200 u/ml为高度敏感（+++），100～200 u/ml为中度敏感（++），50～100 u/ml为轻度敏感（+），＜50 u/m l为阴性。

1.6 食物回避干预治疗

对过敏组患儿进行食物的回避治疗，根据IgG抗体定量检测水平高低，中度与高度及以上敏感者分别回避3～6个月；即对敏感食物种类较少者，直接禁食此类食物6个月；如果较多，则禁食++和+++阳性食物3个月以上；+食物建议每周进食1次，交替食用。所有过敏组患儿均按《指南》配合药物治疗。

疗效判断标准：调整饮食3～6个月后，症状消失或明显改善，症状评分为3分；症状有所改善为2分；症状无改善或加重为1分视为无效。总有效率=症状消失或明显改善+症状有所改善。

1.7 统计学方法

采用SPSS17.0软件进行统计学分析，临床症状得分、特异性IgG水平等正态分布资料采用均数±标准差（±s）的形式表示，两组间的比较采用t检验。计数资料采用例（%）的形式表示。临床症状评分与特异性IgG水平的关系采用相关性分析，并利用ROC曲线对IgG的诊断价值进行评估。P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 过敏组患儿一般情况

过敏组患儿均为喘息急性发作或慢性持续的患儿；均伴有轻重不等的鼻塞、鼻腔流黏性分泌物或清晨喉中痰的症状（100%）；34例患儿行副鼻窦CT检查，示有副鼻窦炎或腺样体增生的改变者30例（88.24%）；13例患儿有中耳炎病史；45例患儿伴有皮肤湿疹表现（57.69%），75例患儿有湿疹病史（96.15%）。71例一、二级直系亲属存在家族过敏史。

2.2 过敏组患儿治疗前IgG检测结果

通过对过敏组患儿治疗前的IgG水平分析发现，绝大多数患者IgG水平在50 u/ml以上，其中IgG水平在（150～200）u/ml之间的患者最多，共11例。过敏组治疗前患儿IgG呈正态性分布，含量为（303.02±133.72）u/ml。除此之外，通过对14种常见食物IgG抗体的检测发现，对牛奶和鸡蛋过敏患者最多，其百分比均为22%（见表1）。

2.3 对照组儿童和过敏组患儿治疗前IgG水平比较

对照组绝大多数儿童IgG水平＜200 u/ml。14种常见食物IgG抗体检测，发现与过敏组患儿相同，对照组儿童对牛奶和鸡蛋最敏感（见表2）。对照组儿童IgG呈正态分布，含量为（196.72±139.67）u/ml。将对照组和过敏组治疗前两组IgG水平进行比较，发现治疗前患儿的IgG水平过敏组＞对照组，差异有统计学意义（t=3.520，P=0.001）。

2.4 过敏组患儿食物回避干预治疗后IgG检测结果

根据IgG抗体定量检测水平高低，对过敏组患儿进行食物回避治疗，治疗后临床症状均明显缓解。通过对过敏组患儿治疗后的IgG水平分析发现，43.6%的患儿IgG水平在150 u/ml以下，其中IgG水平在（175～200）u/ml之间的患者比例最高，共12例（15.4%）。另外，14种常见食物IgG抗体检测，发现也是牛奶和鸡蛋过敏最多，其百分比分别为21%和22%（见表3）。过敏组患儿治疗后的IgG呈正态分布，含量为（166.47±77.78）u/ml。与治疗前相比，过敏组患儿治疗后IgG水平降低，差异有统计学意义（t=7.796，P=0.000）。Person相关分析发现，治疗前后IgG的变化量与临床疗效呈正相关（r=0.581，P=0.000）（见图1）。

2.5 ROC曲线分析

为了进一步了解特异性IgG在该过敏反应中的诊断价值，绘制ROC曲线对患者特异性IgG水平进行分析，结果发现曲线下面积为0.713，表明特异性IgG对过敏反应具有一定的诊断价值。见图2。

表1 过敏组患儿治疗前食物过敏所占比例

表2 对照组儿童食物过敏所占比例

表3 过敏组患儿治疗后食物过敏所占比例

图1 IgG变化量与疗效评分散点图

图2 特异性IgG表达水平的ROC曲线

3 讨论

近年来，非IgE介导儿童食物引起呼吸道过敏的病例逐年增多，有研究表明绝大多数牛奶引起的呼吸道过敏都属于非IgE介导的呼吸道过敏反应[11]。并且该过敏对儿童的健康影响极大，易导致误诊误治。为了能尽早给该疾病做出正确的诊断，本研究的主要目的是找出一个方便、快捷、有效的指标，即IgG，来探索它是否可以成为诊断非IgE介导儿童食物引起呼吸道过敏的有效指标，便于该疾病在临床上早发现早治疗。

非IgE介导食物引起呼吸道过敏的患儿呼吸道的主要表现为打喷嚏、咳嗽、憋气、气促等不良反应[12]，此次研究中对这些不良反应进行评分，发现过敏组的患儿高于对照组。长期出现这些不良情况会导致儿童营养不良、消瘦、贫血、生长迟缓等，严重影响患儿正常的学习生活，需要密切关注。本次研究中过敏组患儿特异性IgG的含量高于对照组，且在饮食回避后随着临床症状改善IgG水平有下降，这提示IgG可能参与了该呼吸道过敏的进程。有研究表明，非IgE介导食物引起呼吸道过敏的患儿呼吸系统会出现大量的肥大细胞浸润，而肥大细胞表面存在IgG受体，特异性IgG与肥大细胞表面受体结合后可以激活肥大细胞，导致炎症的发生[13]。

为了进一步的研究特异性IgG的表达水平与非IgE介导儿童食物引起呼吸道过敏的关系，对过敏组患儿饮食回避前后特异性IgG的表达水平的差值与患儿的临床疗效之间的关系进行分析，结果发现特异性IgG的含量差值与临床疗效得分呈正相关，这就表明过敏组患儿在饮食回避前后特异性IgG水平降低的越多，临床疗效就越好。经查阅文献发现，一些食物蛋白进入机体后，由于不能被机体分解为氨基酸、单糖等物质，而不能被机体完全消化利用，使一些食物蛋白等大分子物质直接进入肠道，被免疫系统当做异物识别，从而激活免疫系统，产生特异性IgG[14]。此外，还有研究表明非IgE介导食物引起呼吸道过敏的患儿呼吸系统黏膜都有一定的破损，从而导致异常的抗原摄取，导致IgG表达升高，发生过敏反应[15]。

在本研究中还通过ROC曲线对IgG在该过敏反应中的诊断价值进行了探索，发现曲线下面积为0.713，说明IgG具有一定的诊断准确度。辅助性T细胞在非IgE介导的儿童食物引起呼吸道过敏中发挥了重要作用，而IgG的产生与辅助性T细胞之间也存在一定的关系，在该过敏反应中辅助性T细胞表达升高，而辅助性T细胞产生的细胞因子，例如γ-干扰素（IFN-γ）、白细胞介素-4（IL-4）等，可以促进食物特异性IgG的表达，使该过敏患儿体内的IgG表达升高，这些都表明特异性IgG水平与过敏反应的关系密切，使特异性IgG具有一定的诊断准确度。

综上所述，非IgE介导儿童食物引起呼吸道过敏患儿体内的特异性IgG水平高于正常儿童。特异性IgG的ROC曲线下面积为0.713，具有一定的诊断价值。由于本次的样本量有限，还有待更大样本量的进一步研究，以便于在临床上更好的推广使用，使非IgE介导的儿童食物引起呼吸道过敏较早地得到确诊，避免误诊误治。

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（张蕾 编辑）

Relation between expression of food-specific IgG and respiratory allergic diseases in children*

HuiChen1,Kun Gao2,Fang-ming Xu1,Qian Zhang1,Xue-ying Zhang1, LingWang1,Chun-mei Liu1,Wei Jiang1,Jian-ping Chen1
(1.Department of Pediatrics,2.Clinical Laboratory,Dahua Hospital of Xuhui District of Shanghai,Shanghai200240,China)

ObjectiveToexplore the correlation between the levelof food-specific IgGand the severity of respiratory allergies caused by food,and whether the positive expression of specific IgG can be used as a diagnostic indicator of food-induced respiratory allergies or not.MethodsA total of 78 subjects,who were diagnosed with non-IgE-mediated respiratory allergies in the Department of Pediatrics Dahua Hospital of XuhuiDistrict from December 2013 to December 2015,were enrolled into study group.The control group included 27 healthy children.The patients were evaluated for efficacy after dietexclusion.Evaluation criteriawere as follows∶symptom scorewas 3 pointswhen the symptoms disappeared or significantly improved;2 points when the symptoms were improved;1 points when the symptoms were not improved or even worsened which was considered invalid.Then,the relationships between the expression level of specific IgG and the scores of clinical symptoms were analyzed,and the diagnostic value of specific IgG was evaluated by ROC curve.ResultsCompared with the control group,the scores of clinical symptoms and the expression level of specific IgG were significantly increased(P＜0.05).The scores of clinical symptoms and the expression level of specific IgG was positively correlated(r=0.488,P=0.000)in the allergic children.And the diagnostic accuracy of specific IgG was high.The area under the ROC curve was 0.713.ConclusionsDetermination of food-specific IgG level has certain value in diagnosis of non-IgE-mediated food-induced respiratory allergies inchildren,and isworth popularizing in clinical practice to preventmisdiagnosis.

specific IgG;respiratory allergy;non-IgE-mediated;diagnosis

R 562

A

10.3969/j.issn.1005-8982.2017.07.012

1005-8982（2017）07-0054-04

2016-09-03

上海市卫计委基金资助项目（No：20134250）

陈建萍，E-mail：chenjp623@126.com，Tel：13918124561