三阴性乳腺癌中p53和Ki67的表达情况及临床意义

蒋丽 张建平

·论著·

三阴性乳腺癌中p53和Ki67的表达情况及临床意义

蒋丽 张建平

目的 研究三阴性乳腺癌中p53和Ki67的表达情况及临床意义。方法 选择接受治疗的经病理确诊为浸润性乳腺癌患者102例，随机分为2组，其中三阴性乳腺癌51例(观察组)，非三阴性乳腺癌51例(对照组)，比较2组患者p53和Ki67的阳性表达情况，分析三阴性乳腺癌p53和Ki67表达与年龄、组织学分级、脉管浸润、肿瘤直径以及淋巴结转移之间的关系，同时研究p53和Ki67表达与乳腺癌生存率之间的相关性。结果 观察组患者的p53和Ki67的阳性表达率高于对照组患者，差异有统计学意义(P<0.05)。观察组的p53表达与组织学分级、脉管浸润、肿瘤直径、淋巴结转移有密切联系(P<0.05)，Ki67表达与组织学分级有密切联系(P<0.05)。102例浸润性乳腺癌患者中，p53表达阳性的生存率低于p53表达阴性者，且Ki67表达阳性的生存率低于Ki67表达阴性者，差异有统计学意义(P<0.05)。三阴性乳腺癌中p53和Ki67为阳性患者的生存率低于阴性表达者，差异有统计学意义(P<0.05)。结论 三阴性乳腺癌中p53和Ki67的阳性表达率较高，p53和Ki67的表达情况对肿瘤增殖能力、肿瘤恶性程度以及预后有着重要意义。

三阴性乳腺癌；p53；Ki67；治疗结果

三阴性乳腺癌是乳腺癌的类型之一，占乳腺癌所有病例的20%左右，主要是指患者孕激素受体(PR)、雌激素受体(ER)和人类表皮生长因子受体2(HER-2) 均呈现出阴性[1]。三阴性乳腺癌具有组织学分级高、恶性程度较高、容易转移以及预后差的特点，因而患者的复发率高、生存率低，是临床上十分棘手的疾病。现阶段，临床上对三阴性乳腺癌仍缺乏有效的治疗方案，有研究发现三阴性乳腺癌与p53、Ki67表达状况之间存在密切的联系，通过了解p53和Ki67的表达有利于评估患者的肿瘤增殖能力、肿瘤恶性程度以及预后情况，具有十分重要的临床意义[2]。本文主要研究三阴性乳腺癌中p53和Ki67的表达情况及临床意义。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选择2013年5月至2015年5月在江苏省潭阳市人民医院接受治疗的乳腺癌患者102例，均经病理确诊为浸润性乳腺癌。随机分成2组，每组51例。对照组:年龄31～56岁，平均年龄(41.6±5.9)岁；月经情况：绝经前期41例，绝经后期10例；肿瘤大小：低于2 cm 13例，2～5 cm 15例，超过5 cm 23例；病理类型：浸润性导管癌40例，浸润性微乳头状癌7例，浸润性小叶癌4例。观察组：年龄33～58岁，平均年龄(41.9±5.2)岁；月经情况：绝经前期40例，绝经后期11例；肿瘤大小：低于2 cm 15例，2～5 cm 14例，超过5 cm 22例；病理类型：浸润性导管癌38例，浸润性微乳头状癌8例，浸润性小叶癌5例。2组患者年龄、月经情况、肿瘤大小、病理类型比较，差异无统计学意义(P>0.05)，具有可比性。见表1。

1.2 纳入与排除标准

1.2.1 纳入标准：女性患者；乳腺癌的组织病理学分级G2～G3；无精神疾病，认知功能正常者；签署知情同意书且积极配合者。

1.2.2 排除标准：精神障碍者；不配合研究者；严重脏器功能异常者。

1.3 方法 接受新辅助化疗的乳腺癌患者于化疗前通过粗针穿刺的方式收集癌组织标本，而未接受新辅助化疗的乳腺癌患者则是在手术过程中收集癌组织标本。将标本放置在10%甲醛中固定，通过免疫组织化学二步法展开测定。病理标准常规处理，片厚切成3μm，脱蜡水化，置于枸橼酸中煮沸8min，然后保温10min左右，待其冷却后滴加鼠抗人Ki67单克隆抗体和鼠抗人p53单克隆抗体(均由上海宾智生物科技有限公司生产提供)，置于温度控制在5℃的湿盒内过夜，第2天应用磷酸缓冲液水洗，然后放置生物素标记的二抗，并且在室温下孵育20min，室温下通过二氨基联苯胺(DAB)显色10min，再次使用磷酸缓冲液冲洗，最后苏木精复染并封片。测定过程中均包含阳性对照，将辣根酶标记链霉卵白素作为阴性对照组。细胞核着浅黄色、棕黄色以及棕褐色颗粒可判定为p53和Ki67阳性表达。同时根据阳性细胞的比例计算p53和Ki67的表达程度，其中p53阳性细胞比例0～25%为阴性，0～10%为“-”，10%～25%为“+”，p53阳性细胞比例>25%则为阴性，26%～50%为“++”，而>50%则为“+++”；Ki67阳性细胞的比例>14%属于高表达，判定为阳性，而Ki67阳性细胞的比例≤14%则属于低表达，判定为阴性。见图1、2。

图1 乳腺癌患者P53的阳性表达(HE×400)

图2 乳腺癌患者Ki-67的阳性表达(HE×400)

1.4 观察指标 比较2组患者p53和Ki67的阳性表达情况；分析三阴性乳腺癌p53和Ki67表达与年龄、组织学分级、脉管浸润、肿瘤直径以及淋巴结转移之间的关系；同时研究p53和Ki67表达与乳腺癌生存率之间的相关性，随访时间为3年。

2 结果

2.1 p53和Ki67的阳性表达率比较 观察组p53和Ki67的阳性表达率高于对照组，差异有统计学意义(P<0.05)。见表2。

2.2p53和Ki67表达与相关因素的关系 三阴性乳腺癌患者的p53表达与组织学分级、脉管浸润、肿瘤直径、淋巴结转移有密切联系(P<0.05)，Ki67表达与组织学分级有密切联系(P<0.05)。见表3。

表2 p53和Ki67的阳性表达率比较 n=51,例(%)

表3 p53和Ki67表达与相关因素的关系 例(%)

3 讨论

三阴性乳腺癌的发病率相对较低，约占乳腺癌的15%～25%[3]。由于三阴性乳腺癌PR、ER和HER-2均为阴性的特点[4]，使得患者无法接受针对HER-2 阳性的靶向治疗和激素受体PR、ER的内分泌治疗[5]，目前临床上缺乏标准的治疗措施，因而医学界给予高度的重视。有研究认为p53、Ki67高表达是三阴性乳腺癌特点之一，与患者病情的发展、预后存在密切联系[3]，但是临床上相关的报道并不多见。

有研究发现乳腺癌患者发生p53基因突变的风险十分高，约为60%左右，然而发生p53突变的乳腺癌肿瘤组织具有侵袭性强、易转移、预后差的特点，且容易对化疗药物形成耐药[6]。调查发现乳腺癌p53表达为阳性患者的生存率受到严重影响，p53的表达情况是评估患者预后的重要指标[7]。本研究结果显示三阴性乳腺癌患者的p53的阳性表达率高于非三阴性乳腺癌患者，且三阴性乳腺癌患者的p53表达与组织学分级、脉管浸润、肿瘤直径、淋巴结转移有密切联系(P<0.05)，一方面提示三阴性乳腺癌的病情更为严重，同时说明p53 可能与三阴性乳腺癌转移率高、易复发、预后差存在关联[8]。

Ki67抗原属于核抗原，影响细胞的有丝分裂。Ki67的表达能够体现出肿瘤的增殖能力，与肿瘤的进展、转移存在密切联系，对于乳腺癌患者病情的评估、诊治方面具有重要意义[9]。本次研究结果显示三阴性乳腺癌患者的Ki67的阳性表达率高于非三阴性乳腺癌患者，且三阴性乳腺癌患者的p53表达与组织学分级有密切联系(P<0.05)，这说明三阴性乳腺癌患者的Ki67表达高，同时Ki67的表达受到组织学分级的影响，充分说明三阴性乳腺癌的细胞分化差、细胞增殖程度相对较高[10]，肿瘤细胞的转移和侵袭能力更强；Ki67的高表达是三阴性乳腺癌发生与发展的重要因素，也是诱导肿瘤细胞增殖、转移的关键因素，能够有效评估三阴性乳腺癌的恶性程度[11]。

本研究结果显示102例浸润性乳腺癌患者中，p53、Ki67表达阳性患者的生存率低于p53、Ki67表达阴性性患者，且51例三阴性乳腺癌中p53和Ki67为阳性患者的生存率更低，进一步验证了三阴性乳腺癌的病情更加危重，且p53和Ki67的表达情况直接影响患者的预后。因而临床上需要重视对乳腺癌患者p53和Ki67表达情况的检测，尤其是三阴性乳腺癌患者，从而准确掌握患者的病情、制定针对性的治疗方案[12]。

1 田慧玲，周凤华，郑洁，等.Ki-67、AR及FRA在三阴性乳腺癌中的表达及意义.现代肿瘤医学，2014，22:830-833.

2 管小青，郑向欣，顾书成，等.三阴性乳腺癌组织中Ki67、p53的表达及临床意义.现代肿瘤医学，2015，23:786-791.

3 师卫华，张艳.三阴性乳腺癌临床病理特征及多种相关蛋白表达的意义.宁夏医科大学学报，2015，37:181-184.

4 闫顺朝，焦昕，李悦，等.p53 突变型乳腺癌中Ki67表达水平的临床意义.现代肿瘤医学，2014，22:310-313.

5 王齐敏，于香莉，吕丽，等.靶向治疗药物的分子靶点蛋白在三阴性乳腺癌中的表达及临床意义.肿瘤学杂志，2014，20:710-714.

6 李志华，雷秋模，熊建萍.乳腺癌组织p53表达与新辅助化疗疗效相关性Meta分析.中华肿瘤防治杂志，2015，22:221-226.

7GongP，WangY，LiuG，etal.NewinsightintoKi67expressionattheinvasivefrontinbreastcancer.PLoSOne，2013，8:e54912.

8 徐婷，何奇，吴克瑾，等.三阴性乳腺癌中p53 和Ki67 表达的相关研究.上海交通大学学报(医学版)，2013，33:833-837.

9 宋魏，于庆凯.三阴乳腺癌组织中Ki67、KAI-1、c-kit的表达及临床病理意义.中国卫生标准管理，2016，7:182-183.

10 李锁严，李占勇，李蕾，等.PARP-1和p53在三阴性乳腺癌中表达的相关性及临床意义.现代肿瘤医学，2014，22:70-74.

11KongB，LvZD，WangY，etal.Down-regulationofBRMS1byDNAhypermethylationanditsassociationwithmetastaticprogressionintriple-negativebreastcancer.Internationaljournalofclinicalandexperimentalpathology，2015，8:11076-11083.

12 程维刚，刘九洲，靳梦琳，等.三阴性乳腺癌中p53蛋白产物的表达及其临床意义.中华实验外科杂志，2016，33:939-941.

Expression and clinical significance of p53 and Ki67 in triple negative breast cancer

JIANGLi*,ZHANGJianping.

*DepartmentofPathology,People’sHospitalofLiyangCity,Jiangsu,Liyang213300,China

Objective To investigate the expression and clinical significance of p53 and Ki67 in patients with triple negative breast cancer.Methods One hundred and two patients with infiltrating breast carcinoma who were diagnosed by pathological examination in our hospital were randomly divided into two groups,in which 51 patients with triple negative breast cancer were in observation group,however, the other 51 patients with non-triple negative breast cancer were in control group.The expression levels of p53 and Ki67 were detected and compared between two groups.Moreover the correlation between the expressions of p53,Ki67 and patient’s age,histological grading,vascular invasion,tumor diameter and lymph node metastasis was analyzed,at the same time, the correlation between the expressions of p53,Ki67 and patient’s survival rate was analyzed.Results The positive expression rates of p53 and Ki67 in observation group were significantly higher than those in control group (P<0.05).Theexpressionofp53inobservationgroupwascloselycorrelatedtohistologicalgrading,vascularinvasion,tumordiameterandlymphnodemetastasis(P<0.05),andtheexpressionofKi67wascloselyrelatedwithhistologicalgrading(P<0.05).Among102patientswithinfiltratingbreastcarcinoma,thesurvivalrateinpatientswithpositiveexpressionofp53wasobviouslylowerthanthatofpatientswithnegativeexpressionofp53,moreover,thesurvivalrateinpatientswithpositiveexpressionofki67wassignificantlylowerthanthatofpatientswithnegativeexpressionofKi67 (P<0.05).Amongthepatientswithtriplenegativebreastcancer,thesurvivalrateinpatientswithpositiveexpressionofp53andki67wassignificantlylowerthanthatofpatientswithnegativeexpressionofp53andKi67 (P<0.05). Conclusion The positive expression rates of p53 and Ki67 are higher in patients with triple negative breast cancer,and the expressions of p53 and Ki67 play an important role in the ability of tumor proliferation,malignant degree of tumor and patient’s prognosis.

triple negative breast cancer; p53; Ki67;treatment outcome

10.3969/j.issn.1002-7386.2017.08.012

项目来源：上海市卫生局青年科研项目(编号:2011144)

213300 江苏省溧阳市人民医院病理科(蒋丽)；复旦大学附属华山医院(张建平)

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A

1002-7386(2017)08-1165-04

2016-11-11)