“平衡复位正骨推拿法”对兔颈源性突发性耳聋模型血流速度及听性脑干反应的影响*

周 翔 何嘉莹 高 婷 詹 强 罗华送 徐玉欣 王 睿 田俊松

（浙江省杭州市中医院，浙江 杭州 310007）

·研究报告·

“平衡复位正骨推拿法”对兔颈源性突发性耳聋模型血流速度及听性脑干反应的影响*

周 翔 何嘉莹 高 婷 詹 强 罗华送 徐玉欣 王 睿 田俊松

（浙江省杭州市中医院，浙江 杭州 310007）

目的观察“平衡复位正骨推拿法”对兔颈源性突发性耳聋模型血流速度及听性脑干反应（ABR）的影响，探讨其治疗颈源性突发性耳聋的可能作用机制。方法将40只大耳兔随机分为空白对照组、模型组、普通手法组和正骨手法组，各10只。采用硬化剂注射法进行造模，造成颈源性突发性耳聋模型。空白对照组和模型组不予治疗，普通手法组与正骨手法组均予地塞米松0.47 mg/kg静滴，每日1次，3 d后减至0.23 mg/kg，再使用3 d停药，维生素B14.67 mg/kg、维生素B120.02 mg/kg肌注，每日1次，在此基础上普通手法组予常规手法治疗，正骨手法组予“平衡复位正骨推拿法”治疗，每日1次，连续干预14 d。结果与空白对照组比较，模型组BA、LVA、RVA、LPICA、RPICA的平均血流速度（Vm）均下降，Ⅲ、Ⅳ波PL及Ⅰ~Ⅲ波IPL均延长（P＜0.05）；与模型组比较，普通手法组及正骨手法组的BA、LVA、RVA、LPICA、RPICA的Vm均升高，Ⅲ波峰潜伏期（PL）及Ⅰ~Ⅲ波的峰间值（IPL）均缩短（P＜0.05），正骨手法组的改善优于普通手法组（P＜0.05）。结论“平衡复位正骨推拿法”能对抗血管痉挛，改善微循环及脑干听觉通路传导，促进听力恢复。

耳聋 颈源性 突发性 平衡复位正骨推拿法 平均血流速度 听性脑干反应

【Key words】Hearing loss；Cervicogenic；Sudden；Bone-setting manipulation；Mean blood flow velocity；Auditory brain stem response

突发性耳聋是指突然发生的、原因不明的感音神经性听力损失。此类患者在听力下降的同时，可伴有眩晕、恶心、呕吐等症状［1］。它是耳科常见急症之一，亦是耳鼻喉科3大难症（耳鸣、耳聋、眩晕）之首。临床发现部分突发性耳聋患者存在寰枢关节失稳，并伴有颈痛、颈僵等颈椎病表现，推测寰枢关节发生侧移会牵拉扭曲椎动脉，引起椎-基底动脉供血不足或迷路动脉管反射性痉挛，可能是导致内耳血液供应下降的原因，引起颈源性突发性耳聋［2］。近年研究发现，推拿可有效改变血液流变性，刺激肌肉从而调节血管改善微循环，提高内耳神经传导，有效调节免疫。本课题组前期临床研究发现，正骨手法能较好改善颈源性突发性耳聋患者的颈痛症状，促进听力恢复。本研究旨在观察“平衡复位正骨推拿法”对兔颈源性突发性耳聋平均血流速度及听性脑干反应的影响，探讨其部分作用机制，为“平衡复位正骨推拿法”的临床应用提供实验依据。现报告如下。

1 材料与方法

1.1 实验动物 选取健康新西兰大耳兔40只，体质量（2.62±0.30）kg，雌雄各半，购自中国科学院上海实验动物中心，由浙江中医药大学动物实验中心提供及饲养。饲养期间给予动物标准颗粒饲养及自由饮水。取10只作为空白对照组，剩余大耳兔制成椎动脉型颈椎病所致突发性耳聋动物模型。

1.2 主要药物 消痔灵注射液（吉林省集安益盛药业股份有限公司生产，产品批号：15030601，规格：10 mL∶0.4 g×5支），氯化钠注射液（天津金耀集团湖北天药药业股份有限公司生产，产品批号：15021615，规格：10 mL∶90 mg×5支），地塞米松注射液（天津药业焦作有限公司生产，产品批号：15031012，规格：2 mg∶1 mL×10支），维生素B1注射液［上海现代哈森（商丘）药业有限公司生产，产品批号：14021311，规格：2 mL∶0.1g×10支］，维生素B12注射液（天津药业焦作有限公司生产，产品批号：15030731，规格：1∶0.5 mg×10支）。

1.3 主要仪器 ZTC-1智能推拿手法参数测定系统，由上海康谊医学教学仪器设备有限公司提供；TCD-2020型超声经颅多普勒血流分析仪，由德国EME公司提供；声级计，由美国Larson Davis公司提供；MEB-2200肌电图/诱发电位仪、YE-102J耳塞式耳机，由日本NIHON KOHDEN提供。

1.4 实验方法

1.4.1 模型制作 按照文献［3］采用注射硬化剂法，制成椎动脉型颈椎病所致突发性耳聋动物模型。将消痔灵注射液10mL注射于大耳朵兔左侧第2～6颈椎横突附近软组织，深度约1～1.5 cm，并于第2、3周各重复1次。造模前及造模后进行TCD检测，然后随机选4~6只大耳兔进行病理组织检测，如左右椎动脉及基底动脉Vm下降，RI、PI增加，注射区域颈部组织出现广泛瘢痕化及挛缩，则证明造模成功。

1.4.2 分组及干预 模型制备成功的30只大耳兔随机分为模型组、普通手法组和正骨手法组，每组10只。1）空白对照组：注射氯化钠注射液10 mL，方法同模型制作，之后常规饲养，不予干预。2）模型组：造模成功后常规饲养，不予干预。3）普通手法组：造模成功后第4周给予地塞米松0.47 mg/kg静滴，每日1次，3 d后减至0.23 mg/kg，使用3 d后停药，维生素B14.67 mg/kg、维生素B120.02 mg/kg肌注，每日1次，干预14 d。同时开始运用普通手法进行治疗，指按法用拇指按压，沿耳上及耳后胆经循行的部位顺序按压，反复进行，每次3 min。点穴法以拇指尖固定在穴位上，运用腕力和指劲下压，用力强度较大，局部多选用听宫、风池及百会等穴位。穴位定位参照文献［4］制定。4）正骨手法组：造模成功后第4周给予地塞米松0.47 mg/kg静滴，每日1次，3 d后减至0.23 mg/kg，使用3 d后停药，维生素B14.67 mg/kg、维生素B120.02 mg/kg肌注，每日1次，连续干预14 d。同时开始运用配合“平衡复位正骨推拿手法”进行治疗。①放松手法：双手在大耳兔颈后外侧作四指揉法5 min；②正骨手法：术者左手托大耳兔枕部，右手托下颌部，将大耳兔头仰位、向右仰旋重复活动2～3下，当右转达最大限度时，术者右手加有限度的右转“闪动力”，如法向左方重做1次，复位时，多有“咯嘚”响声，约3 min；③强壮手法：提拿双颈肩部斜方肌、冈上肌，约3 min；④痛区手法：按摩额头，分五条线指揉兔头部，点穴取风池、天门（风府）、听宫等穴，约7 min。穴位定位参照文献［4］制定。推拿手法均按操作要求，包括手法方向、强度、频率的控制。由专人在推拿手法参数测定系统上培训，反复练习后，再在实验大耳兔上操作。以上治疗时间均为每日1次，连续干预14 d。

1.5 经颅多普勒（TCD）检测 治疗干预结束后24 h采用TCD-2020型超声经颅多普勒血流分析仪测定双侧椎动脉（LVA、RVA）、基底动脉（BA）以及双侧小脑后下动脉（LPICA、RPICA）的平均血流速度（Vm）。

1.6 听性脑干反应（ABR）测定 空白对照组、模型组于治疗干预结束后24 h检测，普通手法组、正骨手法组于终止治疗后24 h检测。测定大耳兔50 Hz高刺激率左侧ABR的Ⅰ波，Ⅲ波、Ⅳ波峰潜伏期（PL）和Ⅰ~Ⅲ波，Ⅲ~Ⅳ波，Ⅰ~Ⅳ波的峰间值（IPL）。重复测量3次，取平均值。

1.7 统计学处理 应用SPSS21.0统计软件处理。统计数据描述以（s）表示；数据统计采用单因素方差分析。组间析因分析，方差齐性时用LSD检验，方差不齐时用Dunnett-T3检验。P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结 果

2.1 各组兔椎-基底动脉及小脑后下动脉Vm的比较见表1。与空白对照组比较，模型组BA、LVA、RVA、LPICA、RPICA的Vm均下降，差异有统计学意义（P＜0.05）；与模型组比较，普通手法组及正骨手法组的BA、LVA、RVA、LPICA、RPICA的Vm均升高，差异有统计学意义（P＜0.05）；与普通手法组比较，正骨手法组的BA、LVA、RVA、LPICA、RPICA的Vm均升高，差异有统计学意义（P＜0.05）；提示普通手法与平衡复位正骨手法均能提高兔颈源性突发性耳聋模型BA、LVA、RVA、LPICA、RPICA的Vm，平衡复位正骨手法的疗效优于普通手法。

表1 各组兔椎-基底动脉及小脑后下动脉Vm比较（cm/s，s）

表1 各组兔椎-基底动脉及小脑后下动脉Vm比较（cm/s，s）

与空白对照组比较，*P＜0.05；与模型组比较，△P＜0.05；与普通手法组比较，▲P＜0.05。下同。

组别 n BA LVA RVA LPICA RPICA空白对照组 10模型组 10普通手法组 10 24.87±2.31 23.75±2.28 23.92±2.47 15.32±3.17*14.41±2.73*15.04±3.01*19.21±2.19△17.36±2.57△18.74±1.93△24.23±1.88 24.89±2.32 15.45±2.43*15.81±2.64*18.31±2.72△18.94±3.27△正骨手法组 1023.56±2.44△▲21.88±2.76△▲22.82±2.51△▲22.59±3.06△▲23.31±3.36△▲

2.2 各组兔ABR检测指标的比较 见表2。与空白对照组比较，模型组Ⅲ、Ⅳ波PL及Ⅰ~Ⅲ波IPL较空白对照组延长，差异有统计学意义（P＜0.05）；与模型组比较，普通手法组及正骨手法组的Ⅲ、Ⅳ波PL及Ⅰ~Ⅲ波IPL均缩短，差异有统计学意义（P＜0.05）；与普通手法组比较，正骨手法组的Ⅲ、Ⅳ波PL及Ⅰ~Ⅲ波IPL缩短更明显，差异有统计学意义（P＜0.05）；提示普通手法与平衡复位正骨手法均能改善兔颈源性突发性耳聋模型ABR检测指标，促进听觉功能恢复，平衡复位正骨手法的疗效优于普通手法。

表2 各组兔ABR检测指标比较（ms，s）

表2 各组兔ABR检测指标比较（ms，s）

PL IPL组别 nⅠ波 Ⅲ波 Ⅳ波 Ⅰ~Ⅲ波 Ⅲ~Ⅳ波 Ⅰ~Ⅳ波空白对照组 10 1.51±0.18 2.94±0.22 3.83±0.24 1.43±0.12 0.88±0.26 2.33±0.28模型组 10普通手法组 10 1.54±0.23 3.23±0.18*4.14±0.27*1.52±0.22 3.09±0.24△4.01±0.23△1.68±0.21*1.57±0.22△0.93±0.15 2.40±0.25 0.91±0.27 2.36±0.21正骨手法组 101.51±0.19 2.97±0.21△▲3.89±0.18△▲1.47±0.18△▲0.90±0.25 2.34±0.19

3 讨 论

突发性耳聋，可归属于中医“暴聋”的范畴。其病机是外邪侵袭，气滞血瘀，闭阻耳窍，或气虚不能行血，耳窍失养所致，而气血瘀阻是耳聋发病的重要病机。故治疗当以疏通经络，活血通窍为大法。《医心方》云“清旦初起，以两手叉两耳，极上下之，二七之，令人耳不聋”，说明运用推拿治疗耳聋的方法古代早有记载。推拿具有疏经通络、行气活血、扶正祛邪、调和阴阳等作用，是防病治病的重要手段。临床研究表明，推拿联合西药或电针能缓解突发性耳聋的临床症状、体征，改善椎-基底动脉血流速度及血液流变学指标［4-5］。《针灸大成·治证总要》曰“耳聋气闭，听宫、听会、翳风”，指出采用经络腧穴治疗本病早有证实。临床报道指出，针刺或电针耳门、听宫、听会、翳风、风池等穴对突发性耳聋有较好的治疗作用［6-8］。而本次正骨手法中选择的听宫能够疏通耳络、活血通窍，风池、风府散风熄风、通关开窍，诸穴合用有活血通络、开窍启闭的功效，能加强“平衡复位正骨推拿法”的临床疗效。

现代医学认为突发性耳聋发生可能与病毒感染、变态反应、内耳微循环障碍等因素有关，以内耳血液循环障碍为多数研究者认可，并成为治疗和研究重点。使用改善循环和提高耳蜗供氧量的药物能促进患者听力恢复，从侧面证明循环障碍可能是突发性耳聋的重要发病机制。颈椎作为活动量最大脊柱节段的极易劳损，随年龄增长及损伤积累可发生颈椎退变与解剖位置改变，包括突出的椎间盘、钩椎关节或椎体骨刺，及椎体半脱位或上关节突滑脱等，都可压迫椎动脉或刺激周围交感神经丛，使椎动脉痉挛，造成椎-基底动脉供血不足，迷路动脉管反射痉挛，导致内耳血液循环急、慢性障碍，引起突发性耳聋。正骨手法能够纠正 “骨错缝”，恢复脊柱的内外力学失衡，调整由于力学失衡导致的颈椎关节移位，解除其对周围神经血管组织的卡压及刺激，并能缓解肌肉的痉挛状态，促进局部血液循环，有助于炎症水肿的吸收和消除［9］。

内耳的主要血液供应来自内听动脉，无侧支循环，对血流动力的变化极为敏感。当各种原因导致椎－基底动脉、小脑后下动脉血流速度减低及血管痉挛时，内耳局部组织缺血、缺氧、水肿、酸碱代谢紊乱，使内耳神经末梢感受器受损导致突发性耳聋［5，10］。冯宁娜等研究指出，突发性耳聋患者的BA、VA、PICA的平均血流速度明显高于正常健康人［11］。本次研究结果表明，与模型组比较，普通手法组及正骨手法组的BA、LVA、RVA、LPICA、RPICA的Vm均升高，差异有统计学意义（P＜0.05）；与普通手法组比较，正骨手法组的BA、LVA、RVA、LPICA、RPICA的Vm均升高，差异有统计学意义（P＜0.05）。说明普通手法和正骨手法均能提高血流速度，改善供血，纠正内耳局部组织的缺血、缺氧等状态，促进听力恢复，且正骨手法的效果优于普通手法。

ABR是一种理想的电生理检查手段，正常ABR由Ⅰ～Ⅴ波组成，根据Ⅰ～Ⅴ波PL、IPL改变，可对突发性耳聋患者的听神经功能状况提供直接的定位诊断，此作用为常规检查及头颅CT、MRI等检查所不能代替［12］。此外，钟乃川等［13］首次提出高刺激ABR可敏感地发现椎基底动脉系缺血所致的损害，目前广泛应用于椎基底动脉短暂缺血性眩晕患者的检查与诊断，对内耳微循环障碍是一个敏感指标［14］。艾毛毛等研究指出，在突聋患者中有60%患者表为高刺激ABR的异常：包括V波潜伏期延长，Ⅰ~Ⅴ波间期延长［15］。与模型组比较，普通手法组及正骨手法组的Ⅲ、Ⅳ波PL及Ⅰ~Ⅲ波IPL均缩短（P＜0.05），正骨手法组的改善优于普通手法组（P＜0.05）。说明普通手法和正骨手法均能高脑干血氧供应，改善神经元代谢、恢复突触效能，同时改变内耳缺氧状态，从而使脑干听觉通路传导修复，且正骨手法的效果优于普通手法。

综上所述，“平衡复位正骨推拿手法”能对抗血管痉挛，改善微循环及脑干听觉通路传导，促进听力恢复，在治疗颈源性突发性耳聋中能发挥积极的治疗作用。

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Effect of Bone-Setting manipulation on Blood Flow Velocity and Auditory Brainstem Responses of Cervicogenic Sudden Hearing Loss Model Rabbits

ZHOU Xiang，HE Jiaying，GAO Ting，et al.Hangzhou Hospital of Traditional Chinese Medicine，Zhejiang，Hangzhou 310007，China.

Objective：To observe the effect of bone-setting manipulation on blood flow velocity and auditory brainstem responses of cervicogenic sudden hearing loss model rabbits and explore its possible mechanism.Methods：40 big ear rabbits were randomly and equally divided into the control group，the model group，common massage group，bone-setting manipulation group，with ten rabbits in each.Cervicogenic sudden hearing loss model was duplicated by injecting sclerosing agent.Rabbits in the control group and the model group received no treatment，while rabbits in common massage group and bone-setting manipulation group were treated with dexamethasone intravenous drip of 0.47mg/kg once a day，3 days later，decreased to 0.23 mg/kg once a day，3 days again，and with vitamin B1 and vitamin B12 intramuscular injection of 4.67 mg/kg and 0.02 mg/kg once a day，based on which，the common massage group was treated with conventional massage and the bone-setting manipulation group was treated with bone-setting manipulation continuously for 14 days.The mean blood flow velocity（Vm）of bilateral vertebral artery，basilar artery，and bilateral posterior inferior cerebellar artery were detected by transcranial Doppler（TCD）.The peak latency（PL）ofⅠ，ⅢandⅣwave and the interpeak latency（IPL）ofⅠ~Ⅲ，Ⅲ~Ⅳ，Ⅰ~Ⅳ wave on the left were detected at 50 Hz high stimulation.Results：Compared with the control group，the mean blood flow velocity（Vm）of BA，LVA，RVA，LPICA and RPICA in the model group was decreased significantly；the peak latency ofⅢ，Ⅳwave and the interpeak latency ofⅠ~Ⅲwave in the model group were extended significantly（P＜0.05）；compared with the model group，the mean blood flow velocity（Vm）of BA，LVA，RVA，LPICA and RPICA in the common massage group and bone-setting manipulation increased significantly；the peak latency ofⅢ，Ⅳwave and the interpeak latencyⅠ~Ⅲwave in the model group were shortened significantly（P＜0.05）.Conclusion：The bone-setting manipulation can resist vascular spasm and improve microcirculation and the conduction of the brainstem cochlear path，which is order to promote hearing recovery.

R244.1

A

1004-745X（2017）03-0412-04

10.3969/j.issn.1004-745X.2017.03.011

2016-08-09）

杭州市科技发展计划项目（20150733Q55）