中药红芪药材的鉴定及有效成分多糖的提取工艺

李峥嵘

（河南省驻马店市中医院药剂科驻马店463000）

中药红芪药材的鉴定及有效成分多糖的提取工艺

李峥嵘

（河南省驻马店市中医院药剂科驻马店463000）

目的：探讨中药红芪药材的鉴定方法及红芪有效成分多糖的提炼工艺。方法：通过红芪的外形、切片及粉末显微等三种方式鉴定红芪的特征，比较水提醇沉法与碱浸提法提取多糖含量与得率。结果：（1）红芪外表呈红褐色，皮质坚韧，纹理清晰，味微甜，咀嚼无豆腥气味；（2）水提醇沉法最佳提取工艺条件为：温度80℃，固液比例1∶12，反复沉淀提取两次，1 h/次；（3）水提醇沉法提取的红芪多糖含量与得率明显高于0.3 mol/L、0.5 mol/L碱浸提法（P＜0.05）。结论：通过外形、切片及粉末显微观察可掌握红芪特点，红芪水提醇沉法提取红芪多糖有效性高于碱浸提法，在今后的提取工艺中，可注重对综合性多指标提取工艺的深入研究。

红芪；多糖；鉴定；提取

红芪为豆科植物多序岩黄芪的干燥根，是常见的中医药材。味甘，性微温，归肺、脾经，具有补气升阳、固表止汗、利水消肿、排毒敛疮之功效，《神农本草经》中有红芪药用的相关记载[1]。红芪含有多糖、生物碱、黄酮、氨基酸等物质，且多糖为红芪中最主要的活性成分，是一种杂多糖，具有抗氧化、抗癌、提高机体免疫力等作用[2]。本研究对红芪的鉴定与红芪多糖的提取工艺进行探讨，对扩展中医药材价值提供一定的参考依据。现报道如下：

1 材料

1.1 实验材料产自甘肃武山的红芪。

1.2 实验器材水合氯醛，甘油乙醇，无水乙醇，0.3 mol/L、0.5 mol/L碱溶液，冰醋酸，pH试纸，电子显微镜，苯酚，离心机，天平，旋转蒸发仪。

2 方法

2.1 红芪鉴定方法通过药材的外形、组织切片及粉末显微等方式进行鉴定。（1）观察红芪外观颜色、分支形态、纹路及气味、味道，判断是否为红芪，必要时可掰断药材判断粉性。（2）组织切片鉴定方法：首先，将红芪放入烧杯中煮沸30 min左右，沥干切片，切片厚度为0.3～0.5 mm；其次，在红芪切片上滴加2～4滴水合氯醛，继续加热至切片边缘呈现小泡；随后添加甘油乙醇，待镜下能清楚观察红芪切面的变化即可。（3）组织粉末化鉴定：将红芪研磨成细粉，在显微镜下滴加一滴清水搅拌后添加2～4滴水合氯醛，观察红芪细胞结构。

2.2 红芪多糖提取工艺（1）红芪多糖水提醇沉法：粉碎红芪后置入烧杯，加入95%乙醇并充分搅拌后水浴锅加热，1 h后抽滤，晾干药渣并过筛，将过渣提取物浓缩加乙醇沉淀，沉淀物经两次溶解后加乙醇真空沉淀干燥，最后提取多糖。采用单因素与正交实验计算红芪中多糖含量与得率。（2）红芪多糖碱浸提法：将红芪药材粉碎后用95%乙醇脱脂，晾晒过筛，加入0.3 mol/L、0.5 mol/L碱溶液（固液比1∶12），经水浴锅加热至80℃后浸提2次，1 h后抽滤，将提取液用冰醋酸浓缩后加入70%乙醇溶液中，经溶解沉淀后，二次洗涤沉淀，真空沉淀干燥后，采用紫外线分光光度计算红芪多糖含量。

3 结果

3.1 药材性状鉴别结果红芪外表呈红褐色，皮质坚韧，纹理清晰，味微甜，咀嚼无豆腥气味；红芪形状呈长条圆柱形，分支少，上粗下细，断面具有纤维性和粉质性。

3.2 药材组织显微结果（1）显微镜下片状红芪木栓层左右细胞整齐排列，细胞呈长方形或纺锤形；切面形成层细胞成环排列，细胞较扁平；木质层导管细胞呈圆形或椭圆；木薄层细胞以圆形或多角形紧密排列；木射线细胞呈长方形；韧皮薄壁及射线细胞单个排列，呈圆形或椭圆。（2）经显微镜下红芪粉末化可见，红芪纤维多数长120μm，细胞壁较厚且观察到不规则裂隙纹路，导管分子长度在70～200μm，均同向并列排列。此外，可见以单粒状大小不一的淀粉粒分散开来，直径在1～15μm，呈卵圆形或椭圆。

3.3 红芪多糖提取工艺结果采用水提醇沉法提取的多糖，以单因素与正交实验及苯酚-硫酸法测定出红芪多糖的含量与得率。发现水提醇沉法工艺提取的最优条件为：温度80℃，固液比例1∶12，反复沉淀提取2次，1 h/次，乙醇沉淀浓度70%左右。此条件下提取的红芪多糖含量高达64.5%，得率可达3.84%。采用碱浸提法提取多糖结果显示，碱溶液浓度越大，多糖含量越高，0.5 mol/L碱溶液提取红芪多糖含量可达46.3%，得率为2.1%。0.3 mol/L碱溶液提取下的多糖含量为45.1%，得率为1.2%。可知碱浸提法提取的多糖含量与得率均低于水提醇沉法（P＜0.05）。

4 讨论

中医药材作为我国几千年来的传世瑰宝，在现代医学不断发展的今天，运用现代科学技术将中医药材从生物学、分子学角度阐述药理作用，有利于中医在国际医学领域的竞争力与接受度。早在《金匮要略》中有关红芪的记载为：主治气虚风湿，关节浮肿等症[3]。红芪能有效改善由心脾气虚引起的气短、眩晕、浮肿等症状。特别是对于气虚体弱的女性，长期服用具有排毒养颜、补气抗衰的功效。随着红芪药用价值的不断提高，红芪的栽培与多糖提取逐渐受到重视。通过中药药材常见鉴定方式，观察红芪外观形态和显微下切片及粉末形态可知红芪具有味甘、性微温、外观呈红褐色、纹理清晰、皮质坚韧等特征。与《药典》中关于红芪的特征性状基本一致[4～5]。

多糖是红芪中最主要的活性物质。在红芪多糖药物相关研究中提到，多糖具有抗氧化、调节免疫功能，改善心脑血管疾病的辅助作用[6]。多糖的提取方法诸多，常见的有水提法、酸碱提法、酶解生物法。不同提取方式的优势体现在不同种类的多糖提取中。水提醇沉法是提取多糖的传统方法，通过水浴浸提，反复过滤沉淀，加入95%乙醇后沉淀析出多糖，经真空干燥后可粗提取。该研究中水提醇沉法提取多糖含量64.5%与0.3 mol/L、0.5 mol/L碱浸提法提取多糖含量45.1%、46.3%比较，水提醇沉法提取的红芪多糖含量更高，且水提醇沉法操作简单、准确性高、重复性好。碱浸提法中碱性溶液通过破坏细胞壁，溶解细胞膜释放多糖达到提取目的。但碱浸提法是在多糖酶法基础上提取多糖的方式，酶解温度、时间、酶添加量都会对提取效果造成影响，加酶量与提取效果呈现曲线关系。张玲等[7～8]研究提到，当加酶量在0.4%时多糖提取量最大。随着酶量的增加，酶与红芪中纤维素分子接触更大，溶出的多糖不断增加，使得底物减少，在多余酶无法产生反应下，多糖的得率有所降低。此外，多糖中糖苷键被过多的酶分解，含量随之下降。

综上所述，采用水提醇沉法提取红芪多糖比碱浸提法提取效果更好，多糖得率更高（P＜0.05）。随着酶提法的不断完善以及其他提取工艺的挖掘，红芪多糖可望有更为高效的提取工艺。

[1]袁毅君,王廷璞,李蕊,等.甘肃道地药材红芪的质量控制研究进展[J].天水师范学院学报,2010,30(5):43-46

[2]柳小亚,李继平,陈心悦,等.HPLC同时测定红芪中8个活性成分的含量及聚类分析[J].药学学报,2016,51(5):786-791

[3]强正泽,李成义,王明伟,等.不同月份红芪微量元素特征研究[J].中国中医药信息杂志,2016,23(9):90-95

[4]叶迎,包强,王瑞海,等.甘肃黄芪和红芪中总皂苷含量测定对比研究[J].环球中医药,2016,9(10):1197-1203

[5]李成义,王燕,强正泽,等.红芪与黄芪中两个异黄酮类成分含量的比较研究[J].中国现代中药,2014,16(7):534-537

[6]牛江涛,曹瑞,张泽国,等.红芪多糖的提取分离及药理作用研究进展[J].中国药房,2017,28(1):130-133

[7]张玲,李朋玲,华永丽,等.黄芪和红芪的红外光谱法结合化学计量学方法鉴别[J].时珍国医国药,2015,26(7):1657-1659

[8]张平,黄聪琳,张明童,等.红芪药材性状及鉴别研究[J].中国中医药信息杂志,2015,22(11):82-85

R284.2

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10.13638/j.issn.1671-4040.2017.08.103

2017-07-01）