意大利牛舌草化学成分及药理作用研究进展

何媛媛 王金凤 郭丽娜 王昭懿 林瑞超

·综述·

意大利牛舌草化学成分及药理作用研究进展

何媛媛 王金凤 郭丽娜 王昭懿 林瑞超

意大利牛舌草为紫草科牛舌草属多年生草本植物的地上部分，具有生湿生热、调节异常黑胆质等功效，用于心悸、失眠、神志不安、头痛、反应迟钝、大便秘结。现代药理学研究表明其具有抗肿瘤、抗氧化、抗病毒、抗菌、中枢神经系统作用、内分泌作用等生物活性。意大利牛舌草化学成分包括甾体、挥发油、生物碱、鞣质、油脂、三萜、黄酮和多酚类化合物。本文通过查阅近期国内外相关文献，从化学成分和药理作用两方面对意大利牛舌草进行文献综述，以期为该属植物的进一步研究提供参考。

意大利牛舌草； 化学成分； 药理作用； 活性； 研究进展

意大利牛舌草(AnchusaitalicaRetz.)是紫草科牛舌草属多年生草本植物，主要分布于地中海和热带地区[1-2]，具有生湿生热、调节异常黑胆质、生湿补脑、祛寒补心、爽心悦志、润燥消炎、止咳平喘等功效。临床上主要用于治疗干寒性或黑胆质性疾病，如平性脑虚、心悸、抑郁症、干性脑膜炎、高血压、肺炎及结核疾病、寒性咳嗽、感冒、气喘等[3]。此外，意大利牛舌草作为民间用药，还具有利尿、兴奋、镇痛、发汗、麻醉、抗炎等生物活性，用于治疗胆汁病、哮喘、抗关节炎、抗风湿、发烧、咽喉疼痛、胸痛、腹泻、失眠等疾病[4-8]。意大利牛舌草收载于《中华人民共和国卫生部药品标准》维药分册，维文名为高孜万，是维吾尔医许多经典复方制剂中必不可少的主药，如异常黑胆质成熟剂、艾菲提蒙汤等，同时也是维吾尔医常用的心脑血管疾病首选药材之一。本文对意大利牛舌草的化学成分和药理作用进行概述。

1 化学成分研究

意大利牛舌草的化学成分主要包括挥发油、油脂、三萜、黄酮等类型化合物，其中油脂中富含维生素E(0.72%)，果仁中含有生物碱和鞣质，花中含有花青素，叶子和茎中含有甲基肌醇[4]。

1.1 挥发油类成分

M.Kazemi从意大利牛舌草水提物中得到34种挥发油成分，见表1。主要成分是邻苯二甲酸二异丁酯(14.6%)，邻苯二甲酸二丁酯(9.0%)和6，10，14-三甲基-2-十五烷酮(8.1%)[9]。其主要挥发油成分结构如图1所示。

1.2 脂肪酸类成分

意大利牛舌草叶子中总油脂的含量为0.93/100 g,主要是脂肪酸(16.59%)，单一不饱和脂肪酸(3.15%)和多不饱和脂肪酸(4.85%)，主要成分是癸酸(0.07%)(1)、十一酸(0.01%)(2)、月桂酸(0.07%)(3)、十三烷酸(0.01%)(4)、肉豆蔻酸(0.35%)(5)、肉豆蔻油酸(0.16%)(6)、十五烷酸(0.12%)(7)、棕榈酸(10.45%)(8)、棕榈油酸(0.14%)(9)、十七烷酸(0.22%)(10)、硬脂酸(1.67%)(11)、油酸(2.20%)(11)、亚油酸(12.16%)(12)、γ-亚麻酸(1.46%)(13)、α-亚麻酸(64.74%)(14)、花生酸(1.64%)(15)、二十碳烯酸(0.17%)(16)、顺式-8，11，14-廿碳三烯酸酸(17)、顺式-11，14，17-廿碳三烯酸酸(18)、二十一烷酸(0.21%)(19)、二十二烷酸(0.72%)(20)和神经酸(0.40%)(21)[10]。化合物结构1-21如图2所示。Conforti等[11]表明意大利牛舌草中亚油酸的含量占2.57%，亚麻酸的含量占5.02%。

表1 意大利牛舌草地上部分挥发油成分及其百分含量

图1 意大利牛舌草挥发油成分结构示意图

图2 化合物1-21的结构示意图

1.3 三萜类成分

Kuruüzüm等[12]从意大利牛舌草甲醇提取物中分离出4个新型三萜类化合物，命名为oleanazuroside 1(22)、oleanazuroside 2(23)、ursolazuroside 1(24)、ursolazuroside 2(25)，和1个已知的三萜类化合物quercilicosid A(26)。常文[13]从意大利牛舌草乙醇提取物乙酸乙酯萃取部位中分离得到苦莓苷(quercilicosid A)(26)，其在Alexander的研究中显示出nigaichigoside的抗菌活性[14],并且具有对抗风湿疾病和顺铂诱发的肾毒性等作用[15-16],但其具体作用机理有待进一步研究。化合物结构22-26如图3所示。

1.4 黄酮类成分

近年来从意大利牛舌草中分离得到的黄酮类化合物较少，多为已知化合物。Kuruüzüm等[12]从意大利牛舌草甲醇提取物中分离出四个黄酮类化合物，分别是山奈酚-3-(β-葡萄糖苷)(=黄芪甙;27)、槲皮素3-(β-葡萄糖苷)(=异槲皮苷;28)、槲皮素3-(α-鼠李糖-(1～6)-β-葡萄糖苷)(=芦丁;29)、山奈酚3-(α-鼠李糖-(1～6)-β-葡萄糖苷)(30)。化合物结构27-30如图4所示。常文等[17]也从意大利牛舌草60%醇提取物的乙酸乙酯部位分离鉴定出芦丁，并建立用于测定意大利牛舌草芦丁含量的HPLC方法。

图3 化合物22-26的结构示意图

图4 化合物27-30的结构示意图

1.5 其它成分

Kuruüzüm从意大利牛舌草中分离出聚[3-(3,4-二羟苯基)]甘油酸(PDPGA)(31)[18-20]，通过体内外实验结果表明PDPGA具有显著的抗氧化、抗炎、伤口愈合和抗肿瘤作用[21]。此外还有迷迭香酸(32)和3-(3，4-二羟苯基)乳酸[12](33)，以及多糖、生物碱和皂苷类成分，但未确定是何种类型的多糖、生物碱和皂苷类成分。其水提物和甲醇提取物的总酚含量分别为12.3，16.2(等同于没食子酸毫克每克干物质)[22]。化合物结构31-33如图5所示。

2 药理作用研究

2.1 抗肿瘤作用

意大利牛舌草具有细胞毒性，其抑制乳腺癌细胞(MCF-7)，肝癌细胞(HepG2),WEHI和牛肾细胞株(MDBK)，IC50超过100 μg/mL[23]。意大利牛舌草是传统维药异常黑胆质成熟剂的组成之一，由13种植物构成，异常黑胆质成熟剂用于治疗和预防癌症。为了研究异常黑胆质成熟剂的抗癌机制，通过MTT溴化物、中性红、乳酸脱氢酶渗漏、3[H]-亮氨酸合并，将3[H]-核苷注入蛋白、DNA、RNA中，丙二醛-硫代巴比土酸(MDA)定量等方法，研究异常黑胆质成熟剂乙醇提取物在人工培养的肝癌细胞(HepG2)中的作用。其有效地抑制了肝癌细胞的生长和生存能力，增加了乳酸脱氢酶的渗漏，分别在治疗48小时和72小时后均保持在一定的浓度，具有时间依赖性(P<0.5)，同时抑制了细胞蛋白质、DNA、RNA的合成，保持在一定浓度,具有时间依赖性(P<0.5)，但培养基中的MDA没有有效的释放，在细胞中没有观察到脂质过氧化酶。结果证明异常黑胆质成熟剂乙醇提取物的细胞毒性可能与抑制肝癌细胞的生长，细胞膜结合的完整性和抑制细胞蛋白质、DNA、RNA合成有关[24]。木拉提·克扎衣别克等[25]研究异常黑胆质成熟剂中各单味药对HL-60细胞增殖的抑制作用，结果表明，意大利牛舌草的二氯甲烷提取物能抑制HL-60癌细胞的体外增殖。

2.2 抗氧化作用

Kuruüzüm-Uz等[29]从意大利牛舌草丁醇提取物中分离出两个三萜类化合物，具有很强的抗DPPH(2，2-diphenyl-1-picrylhydrazyl)自由基作用。

图5 化合物31-33的结构示意图

其DPPH清除自由基的IC50水平为84 μg/mL[11]。意大利牛舌草水提物和甲醇提取物的抗氧化活性能力分别为83.3、88.2(等同于羧酸每克干重)[18]。

谢周建等[26]对维吾尔特色药材牛舌草开展抗氧化和美白作用的研究，在样品质量浓度为0.05 g/L时，牛舌草95%乙醇提取物的乙酸乙酯萃取部位和正丁醇萃取部位对DPPH自由基清除率分别为87%，76%，高于其他部位70%以上，而接近阳性对照维生素C(vitaminC，VC)；在样品质量浓度为1.0 g/L时，对弹性蛋白酶的抑制率分别为50%，56%，接近于阳性对照熊果酸，而其他部位无活性;对酪氨酸酶抑制率分别为76%，44%，高于其他部位30%以上，且高于阳性对照VC。牛舌草的乙酸乙酯萃取部位和正丁醇萃取部位为牛舌草的高活性部位并显示出良好的抗氧化剂和美白作用，今后可作为天然抗氧化剂和美白剂加以开发利用。

2.3 中枢神经系统和内分泌作用

异常黑胆质成熟剂中含有意大利牛舌草，在诱导慢性压力电击小鼠足底的试验中发现，口服异常黑胆质成熟剂具有增强记忆力的作用。压力组老鼠记忆力的增加表现在遮暗实验延迟时间的增加和Y-迷宫实验延迟时间的减少。异常黑胆质成熟剂的治疗有效地降低了促肾上腺皮质激素、肾上腺酮、β-脑肽啡以及大脑和去甲肾上腺素的血清水平。进一步说明，异常黑胆质成熟剂通过慢性压力的翻转，能够有效地降低大脑和一元胺神经递质多巴胺、5-羟色胺、3，4-苯丙氨酸的血清水平[27]。

2.4 抗病毒作用

意大利牛舌草的水提物和乙醇提取物具有抗流感病毒能力(2.5～80 μg/mL)，通过往Madin-Darbey犬的单层肾细胞注入病毒,分别在感染一小时前和感染后加入提取物，发现具有很好的抗病毒作用，其中乙醇提取物的抗病毒作用较水提物的效果更明显。其抗病毒作用的机制可能与干扰病毒的复制和转录有关，因此意大利牛舌草可以像金刚烷胺一样用于流行性感冒的治疗[1]。

2.5 抗菌作用

Azizi等将意大利牛舌草花的提取物与醋酸锌生物合成氧化锌纳米颗粒利用退热处理观察其抗菌作用，结果表明，氧化锌纳米颗粒利用X-射线衍射分析具有晶体结构，在透射电子显微镜下呈六边形，经热处理温度为100°C和200°C时，其平均粒度分别为8 nm和14 nm,随着粒度大小的降低，光学带隙值从3.27 eV增加到3.30 eV。氧化锌纳米颗粒抗菌活性针对革兰氏阳性菌(巨大芽孢杆菌和金黄色葡萄球菌)和革兰氏阴性菌(大肠杆菌和鼠伤寒沙门氏菌)随着热处理温度的升高可降低病原体的活性。此外，肾细胞的体外细胞毒性研究表明，在浓度低于142 μg/mL没有毒性[28]。

2.6 抗炎活性

为了探索意大利牛舌草地上部分和根的不同提取物的抗炎活性，通过观察给大鼠注射角叉菜胶致使急性炎症，从意大利牛舌草地上部分的甲醇提取物的正丁醇部位中分离出迷迭香酸，迷迭香酸的抗炎活性与布洛芬相比表现出很强的剂量依赖性和抗炎活性[29]。

2.7 心血管保护作用

徐晓娜等[30]对意大利牛舌草总黄酮抗大鼠心肌缺血再灌注损伤的作用及机制进行了研究,ELISA结果表明，牛舌草总黄酮能降低心肌炎症因子IL-1β、IL-6、TNF-α的水平，增加Bcl-2、降低Bax，并上调PI3K和Akt的磷酸化水平。牛舌草总黄酮具有明显的抗心肌缺血再灌注损伤作用，其机制可能与上调PI3K/AKT信号通路而抑制细胞凋亡与炎症有关。

2.8 其它药理作用

陈奎奎等[31]对意大利牛舌草开展显微特征及薄层色谱的鉴别研究，研究结果中获得了以5-羟基-3，4，6，7-四甲氧基黄酮为对照品的薄层色谱鉴别特征。文献报道[32-33]，5-羟基-3，4，6，7-四甲氧基黄酮已从多种天然药物中分离得到，并显示出对人肺癌A549、白血病和抗结肠癌细胞株的抑制作用以及抗炎和对革兰氏阳性和阴性菌的拮抗作用。

意大利牛舌草的甲醇提取物(200 μg/mL)体外试验具有良好的抑制激素敏感性脂肪酶作用，抑制率为57.41%，抑制轮廓呈剂量依赖性，IC50水平为132.8 μg/mL[34]。意大利牛舌草的沸水提取物(5%)抑制兔子空肠平滑肌收缩的平均高度与正常收缩的高度相比达到35%[35]。从意大利牛舌草地上部分和根的不同部位提取物来观察抗溃疡的活性，给大鼠注射吲哚美辛破坏胃部后，没有抗溃疡活性[35]。

3 总结

作为新疆特色药材，多年来，研究者们在意大利牛舌草的化学成分和药理活性方面都有不同程度的研究，但对大多数化学成分仅有一些预试，尚存较大的研究空白；同时作为维吾尔医治疗心脑血管疾病的首选药材之一，其治疗机制尚未清楚，仍需揭示。鉴于此，如何应用现代科学方法提高意大利牛舌草生物利用度和扩大临床应用范围，将是意大利牛舌草的重要研究内容。

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(本文编辑： 禹佳)

Research progress of chemical components and pharmacologic effects ofAnchusaitalicaRetz.

HEYuanyuan,WANGJinfeng,GUOLina,etal.BeijingKeyLaboratoryofTraditionalChineseQualityEvaluation,SchoolofChinesePharmacy,BeijingUniversityofChineseMedicine,Beijing100102,China

Correspondingauthor：LINRuichao，E-mail：linrch307@sina.com

AnchusaitalicaRetz. belongs to the Boraginaceae, the aerial parts are the medicinal parts. It can produce wet and hot things in body, so it can be used in palpitation, insomnia, obnubilation, headache, slow response, constipation. Modern pharmacology has demonstrated that it includes anticancer, antioxidant, antiviral, central nervous system function, endocrine function and many other effects.AnchusaitalicRetz. chemical constituents including steroids, essential oil, alkaloids, tannins, oil, triterpenes, flavonoids and polyphenols. By looking up the literatures of domestic and overseas, the present review will highlight the chemical compositions and pharmacological effects ofAnchusaitalicaRetaz.. in order to give reference for its study and development.

AnchusaitalicaRetz.； Chemical components； Pharmacological effects； Activity； Research progress

国家中医药管理局公益性行业科研专项(201507004)

100102 北京中医药大学中药学院中药品质评价北京市重点实验室

何媛媛(1990- )，女，2014级在读硕士研究生。研究方向：民族药药效与化学成分研究。E-mail:heyy0806@163.com

林瑞超(1954- )，博士，研究员，博士生导师。研究方向：中药与民族药的品质评价研究。E-mail：linrch307@sina.com

R286.0

A

10.3969/j.issn.1674-1749.2017.01.039

2016-07-07)