组蛋白去乙酰化酶5在脑胶质瘤中的表达及临床分析

刘 全

广西医科大学第四附属医院，广西柳州 545005

胶质瘤是发病率最高的原发性脑肿瘤，预后不佳[1]。目前高级别胶质瘤患者1年生存率仅40%[2]。目前胶质瘤的临床治疗包括放疗、化疗和外科手术[3]。脑胶质瘤患者治疗费用高并且治疗效果差，尤其对于高级别胶质瘤，手术后常规放化疗后患者预后仍很差，目前临床研究的热点是组蛋白去乙酰化抑制剂对肿瘤抑制的作用。组蛋白去乙酰化酶 5（histone deacetylase 5，HDAC5）属于 II类，并已被证明对于调节细胞增殖、细胞周期和凋亡具有重要的作用[4-5]。有研究表明，HDAC5与髓母细胞瘤、骨肉瘤等相关[6-7]。本研究通过前期研究发现，HDAC5可促进神经胶质瘤细胞的增殖，因此HDAC5可能是胶质瘤潜在的治疗位点，但HDAC5的表达水平与临床病理、肿瘤分化及患者生存周期等临床表现的相关程度尚不明确。本研究通过观察HDAC5蛋白在不同级别的脑胶质瘤中的表达，探讨脑胶质瘤中HDAC5蛋白的表达与患者临床病理、肿瘤分化及患者生存周期的相关性，为脑胶质瘤患者的个体化治疗提供参考，并为后续选择使用组蛋白去乙酰化酶抑制剂抗肿瘤治疗研究提供新的思路。

1 资料与方法

1.1 一般资料

收集2012年1月～2015年12月确诊为脑胶质瘤并在柳州市工人医院和柳州医学高等专科学校第一附属医院进行手术治疗并留有蜡块标本的患者100例，男57例，女43例，年龄2～78岁，平均（41.3±12.5）岁，病例分型：单纯普通型29例，单纯急诊型6例，复杂疑难型56例，复杂危重型9例。按照WHO分型Ⅰ～Ⅳ级分为两组，Ⅰ～Ⅱ级属于低级别组，Ⅲ～Ⅳ属于高级别组，每组各50例。对所有患者的临床病理、肿瘤分化及患者生存周期等临床特点进行调查随访。脑胶质瘤诊断标准符合神经外科学（2012年第二版）。入选标准：（1）WHO病理分级I-IV级各型脑胶质瘤；（2）有明确的病理诊断；（3）在我院，保存有脑胶质瘤蜡块标本；（4）满足随访。本研究经医院伦理委员批准，所有患者及其家属签署知情同意书，同意参与实验。两组患者一般资料比较差异无统计学意义（P＞0.05），具有可比性。

表1 两组患者HDAC5表达比较[n（%）]

1.2 免疫组织化学法

采用免疫组织化学法检测HDAC5在脑胶质瘤中的表达，HDAC5蛋白在胶质瘤标本中的表达：按着色程度评分，0分无着色，1分浅黄色，2分棕黄色，3分褐棕色；按阳性细胞占比例评分，无阳性细胞为0分，＜10%为1分，11%～50%为2分，51%～80%为3分，＞80%为4分；二者乘积判定阳性结果，0分为阴性（-），1～4分为低度阳性（+），5～ 8 分为中度阳性（++），9 ～ 12 分为强阳性（+++）。

1.3 观察指标

脑胶质瘤临床病理、肿瘤分化按2007年WHO分级划分为Ⅰ～Ⅳ级及病理结果分低、中、高度分化。患者生存周期由第一次发现原发脑胶质瘤时开始计算，随访终止时间为2016年12月31日。

1.4 统计学处理

采用SPSS16.0软件进行统计学处理，计量资料以（x±s）表示，采用t检验，计数资料以百分比表示，采用χ2检验，P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 两组患者生存率比较

随访终止时间为2016年12月31日，低级别组2例死亡，生存率96.0%，高级别组死亡18例，生存率64%，明显低于低级别组，差异有统计学意义（χ2=16.324，P ＜ 0.05）。

2.2 两组患者HDAC5表达比较

高级别组HDAC5表达阳性率显著高于低级别组，差异有统计学意义（P＜0.05），见表1。

3 讨论

组蛋白去乙酰酶根据蛋白的同源性和结构分为I～IV类 。其中组蛋白去乙酰酶5于II类的组蛋白去乙酰化酶，它已被证明是细胞增殖的重要调节剂，控制细胞周期进程和凋亡[8]。胶质瘤是中枢神经系统最常见的原发性脑肿瘤，当前常规的临床治疗包括放射疗法、化学疗法和外科手术治疗，但其预后不良。神经胶质瘤细胞对于化疗药物的耐药性越来越成为影响治疗效果的主要因素。因此，迫切需要开发新的有效地胶质瘤治疗方法。近期，在一个基于12个中心的随机临床试验荟萃分析中，包括胶质母细胞瘤和间变性星形细胞瘤在内的高级别胶质瘤患者的1年整体生存率仅为40%，其中进行了系统的联合放疗和化疗后的患者生存率也仅为46%。而本研究中两组生存率都较高，这可能与本研究样本数较少有关，有待进一步扩大样本量进行相关性研究。

组蛋白去乙酰化酶家族在肿瘤发生、扩散和转移中扮演着关键角色。目前的研究发现多种组蛋白去乙酰化酶抑制剂具有促进细胞凋亡，抑制肿瘤细胞在动物模型中增殖的能力。因此组蛋白去乙酰化酶抑制剂有望成为新型的抗癌治疗药物。目前HDAC5在人脑胶质瘤的生物学功能鲜有研究与报道。近期，我们的一项研究发现HDAC5可通过上调Notch 1信号的表达促进神经胶质瘤细胞的增殖，但该生物学功能是否与临床病理、肿瘤分化及患者生存周期等临床表现存在相关性，尚无相关报道。Notch家族在细胞增殖、分化和凋亡中起重要作用。Notch 1蛋白与该家族的其他成员共享结构特征，例如存在由多个表皮生长因子样重复组成的胞外结构域和由多个不同域类型组成的胞内结构域[9]。许多研究表明，Notch 1在肿瘤细胞系中过度表达，包括胶质瘤[10]。RNA干扰下调Notch 1及其配体诱导胶质瘤细胞凋亡及抑制增殖。因此，Notch 1已提出了构成在脑胶质瘤治疗的一个靶点[11-12]。

终上所述，HDAC5蛋白在脑胶质瘤细胞中的表达与胶质瘤的病理级别、肿瘤分化及患者生存周期可能具有相关性，这为脑胶质瘤患者的个体化治疗提供参考，以期为后续抗肿瘤研究提供新的思路，具有较大的社会效益。本研究的局限之处在于，作为单中心研究，患者样本量较少。需要未来进行多中心、扩大样本量的研究，从而获得更准确科学的研究结果。

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