气相色谱法对苹果和土壤中克菌丹残留量的测定

葛谦++苟春林++赵丹青++陈翔

摘要：建立苹果和土壤中克菌丹农药的气相色谱检测方法。采用乙腈作为提取溶剂，经弗罗里硅柱净化后，通过气相色谱-电子俘获检测器（GC-ECD）测定，面积外标法定量。结果表明，方法检出限为9.0×10-3 mg/L，平均回收率为92%～105%，相对标准偏差为1.8%～5.8%。该方法灵敏度高、稳定性好、操作简便，完全能够满足苹果和土壤中克菌丹残留量的检测要求。

关键词：气相色谱；克菌丹；苹果；农药残留

中图分类号：TQ457.2+5 文献标识码：A 文章编号：0439-8114（2017）03-0548-03

DOI：10.14088/j.cnki.issn0439-8114.2017.03.040

Determination of Captan Residues in Apple and Soil by GC

GE Qian， GOU Chun-lin， ZHAO Dan-qing， CHEN Xiang

（Ningxia Research Institute of Quality Standards and Testing Technology of Agricultural Products， Yinchuan 750002， China）

Abstract： The method for determination of captan residues in apple and soil was established by gas chromatography. Apple and soil samples were extracted with acetonitrile solution and cleaned up by Florisil-phase extraction column（SPE），then the extracted solution was determined by gas chromatography-electron capture detector （GC-ECD） and quantified with area external standard method. The results showed that， the detection limit of the method was 9.0×10-3 mg/L，the average recovery was 92%～105%，the relative standard deviation was between 1.8%～5.8%. The method was sensitive，stable and simple，could completely meet requirements for the detection of captan residues in apple and soil.

Key words： gas chromatography； captan； apple； pesticide residue

克菌丹又叫開普顿，属于传统多位点有机硫类杀菌剂，以保护作用为主，兼有一定的治疗作用。克菌丹杀菌谱广，应用方式比较多样，可用于叶面喷雾防治多种高、低等真菌性病害，马铃薯、花生拌种，也可用于土壤处理（冲施、灌根、拌土撒施等），防治多种作物根部病害。在中性或酸性条件下稳定，在高温和磁性条件下易水解。测定克菌丹的分析方法主要有薄层色谱法[1]、液相色谱法[2]、气相色谱法[3-5]和气质联用法[6]。

研究在已报道文献方法的基础上，利用乙腈提取克菌丹，经弗罗里硅层析柱净化，用气相色谱仪-电子捕获检测器检测分析，外标法定量，建立了一种操作简单、快速、高效的克菌丹残留检测分析方法。

1 材料与方法

1.1 试剂与仪器

1.1.1 仪器设备 Agilent 6890N型气相色谱仪，配ECD检测器；T18basic型高速匀浆机；PL202-A型电子天平；R-15型旋转蒸发器；TD-40L型离心机；DHG-9240A型电热鼓风干燥箱。

1.1.2 仪器和试剂 氯化钠（分析纯，将氯化钠于140 ℃烘箱中烘烤4 h），乙腈（色谱纯），正己烷（色谱纯），丙酮（色谱纯），弗罗里硅柱（Agilent，500 mg），无水硫酸镁，去离子水，克菌丹标准品（德国Dr.Ehrenstorfer公司，纯度98.5%）。

1.2 方法

1.2.1 试验样品的制备 苹果：用四分法将苹果样品分为4等份，取对角线样品切成小丁，低温保存（-20 ℃）。土壤：将样品中杂草、碎石挑出，将其混匀后，低温保存（-20 ℃）。

1.2.2 样品分析 苹果：称取苹果样品10.00 g于50 mL离心管中，加入20 mL乙腈，振荡提取1 h，加入5 g氯化钠，振荡摇匀1 min，3 000 r/min离心5 min，取上清液5.0 mL经旋转蒸发仪浓缩近干，加入3.0 mL丙酮-正己烷（1∶9）振荡摇匀，待净化。

用丙酮-正己烷（1∶9）5 mL预淋洗弗罗里硅柱层析柱，将待净化液转入柱中，用12 mL丙酮-正己烷（1∶9）分4次洗脱并收集，于旋转蒸发仪上35 ℃水浴，蒸发至干，用2.5 mL正己烷定容，待测。土壤：同苹果检测前处理方法。

1.2.3 色谱条件 色谱柱：DB-35MS色谱柱（30 m×0.25 mm，0.25 μm）；模式：不分流；载气：N2；加热器：290 ℃；压力：27.41 psi；总流量：101 mL/min；流量：3.2 mL/min；平均线速度：59 cm/s；柱箱温度：60～280 ℃；尾吹气流量：N2，60 mL/min；进样量：1.0 μL。

2 结果与分析

2.1 标准色谱图的制作

按照“1.2.3”的仪器条件，用丙酮对克菌丹配成0.05～15.0 mg/L标准系列工作液，经面积外标法定量后，其标准系列色谱见图1。该方法峰形较好无拖尾，不同浓度峰形清晰可见，说明该仪器方法切实可行。

2.2 标准曲线的制作

将1 000 mg/L的克菌丹标准样品用丙酮稀释配得0.05、0.20、0.50、1.00、5.00、8.00、15.0 mg/L系列标准溶液，在“1.2.3”的色谱条件下对克菌丹标准系列工作液进行测定，以克菌丹标准溶液作为横坐标x（质量浓度），峰面积作为纵坐标y，作标准曲线，所得曲线方程为y=769 851x-22 379，r2=0.998 2（n=7），由此可知，该仪器条件下克菌丹标准溶液质量浓度与相对应的色谱峰面积能够呈现出很好的线性关系。

2.3 回收率和精密度

以0.1、5.0、15.0 mg/L 3个质量浓度为添加水平，每个水平重复5次，在空白土壤和苹果样品中添加相应浓度克菌丹标准溶液，室温静置30 min后，按照“1.2.3”的方法检测土壤和苹果中克菌丹残留量。从表1可以看出，土壤和苹果中，克菌丹3个质量浓度的添加回收率為92%～105%，相对标准偏差为1.8%～5.8%，检出限为9.0×10-3 mg/L。回收率较高、精密度较好，均符合农药残留检测要求。

2.4 样品测定

采用上述方法，检测土壤和苹果样品中克菌丹的农药残留量，结果见表2及图2、图3。苹果中克菌丹农药残留为0.13～0.25 mg/L，土壤中克菌丹农药残留为0.31～0.44 mg/L，根据规定苹果上克菌丹的最大残留限量值为15.0 mg/kg（GB 2763-2014食品中农药最大残留限量），所测样品均未超出最大限量值，且在标准曲线范围内，说明该方法切实可行。

3 结论

采用乙腈作为提取溶剂，通过弗罗里硅柱净化样品，建立了苹果和土壤中克菌丹残留检测方法。以0.1、5.0、15.0 mg/L 3个质量浓度为添加水平对该方法的回收率、精密度进行了试验验证。结果表明，该方法高效、稳定、快捷，且重现性和准确性均表现较好，符合相关农药残留分析的要求[7，8]，具有可行性。根据《GB 2763-2012》，克菌丹在苹果中最大残留限量为15.0 mg/L，本方法完全满足苹果中克菌丹残留量检测要求，是目前克菌丹残留量测定中分析植物性样品较为简单、便捷的方法。

参考文献：

[1] WANG S J，YU Y B，TAN P G，et al.Simultaneous determination of captan and folpet pesticide residues in apples by solid-phase extraction and high performance liquid chromatography[J].Chinese Journal of Chromatography，2007，25（2）：226-229.

[2] 王淑菊，于彦彬，谭培功，等.固相萃取-高效液相色谱法同时测定苹果中残留的克菌丹和灭菌丹[J].色谱，2007（2）：226-229.

[3] 樊苑牧，俞雪钧，谢东华，等.气相色谱法测定水果蔬菜中克菌丹残留[J].中国卫生检验杂志，2006（1）：28-30.

[4] 日本厚生劳动省.食品中残留农药兽药饲料添加剂检测方法[M].北京：中国标准出版社，2006.

[5] ZHANG F J，HOU D K，HE J，et al. Statistical analysis of regularity of pesticide residues in vegetables produced in inner mongoli[J].Agricultural Science & Technology，2013（10）：1471-1475，1516.

[6] 周艳明，关 丽，牛 森，等.气相色谱法测定蔬菜中克菌丹、灭菌丹、敌菌丹残留量的研究[J].食品科学，2009（12）：187-189.

[7] 杨秀娟，陈福如，张联顺.防治贮存期甘薯黑斑病的药剂筛选[J].植物保护，2000，26（5）：38-39.

[8] 李友顺，范腾飞，马 超，等.80%克菌丹分散粒剂高效液相色谱分析[J].农药，2010（3）：184-185.