复方甘草片薄层色谱及近红外一致性快速检验

郭海平，崔小丽，姚宝林，张 磊

（承德市食品药品检验检测中心，河北 承德 067000）

复方甘草片系祛痰镇咳药，为复方制剂。主要是由甘草浸膏粉、阿片粉或罂粟果提取物粉等组成。质量标准收载于《中国药典》2015年版二部[1]。在检验中发现有不合格样品，即检不出吗啡。药典收载的吗啡TLC法，提取步骤繁琐，不适用于快速检验。为能在监督现场快速筛查药品质量，开展了吗啡TLC快速鉴别及近红外一致性模型。为保障百姓用药安全和切身利益，快速筛查出假劣药品，从技术层面提供科学依据。

1 薄层色谱的建立[2]

1.1 仪器与试药

XS105型电子天平；吗啡（C17H19NO3）对照品（中检院，批号171201-201123，供含量测定用，含量97.1%）；乙酸乙酯、甲醇、氨水为分析纯；复方甘草片共计20批次。甘草浸膏粉、阿片粉、樟脑、八角茴香油、苯甲酸钠均由生产企业提供。

1.2 方法与结果

1.2.1 对照品溶液制备

取吗啡对照品，加甲醇制成每1 mL含0.5 mg的溶液，作为对照品溶液。

1.2.2 供试品溶液制备

取本品2片，研细，加甲醇2 mL，置热水浴中超声处理10分钟，静置，取上清液，作为快检方法供试品溶液。（药典方法：取本品2片，研细，加水7 mL混匀，加10%无水碳酸钠）。

1.2.3 样品测定及结果

分别上述溶液各10 μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以乙酸乙酯-甲醇-氨水（8:5:0.5）为展开剂，展开，取出，晾干，喷以碘化铋钾试液。结果：供试品溶液均检出吗啡斑点，所显斑点颜色和位置与对照品溶液的斑点相同[3]，阴性对照无干扰，见图1。说明该方法专属性强，比药典方法更简便快捷、经济环保，可用于复方甘草片中吗啡快速筛查。

图1 复方甘草片TLC图谱

（硅胶G薄层板：青岛海洋化工厂批号：141227）

1、药典方法供试品2、快检方法供试品3、吗啡对照4、阴性对照

2 近红外一致性检验模型的建立

近红外一致性检验模型，是目前药品快检的先进技术手段。近红外光谱具有吸收系数较低、无损、快速、无污染的特点，可直接测定样品，不需处理，借助软件的支持，实现近红外光谱建模。检验中将样品光谱导入模型，通过光谱分析达到快筛药品真伪的目的。

2.1 仪器与试药

Matrix-F型近红外光谱仪；复方甘草片19批次（其中3批不合格）

2.2 一致性检验模型的建立

2.2.1 光谱的采集

取复方甘草16批（4个厂家），每批样随机取6片，用仪器光纤探头在1000～4200 cm间对样品进行扫描，分辨率为4 cm，扫描次数为32次，取得平均光谱，见图2。

2.2.2 方法模型的建立

使用OPUS5.0软件建立一致性检验方法。首先调入参考光谱，选择预处理方法为一阶导数化＋矢量归一化，平滑点数17个。选择8778～7313 cm、7043～5485 cm、5343～4126 cm谱段，设置CI值为5。结果，复方甘草片最大一致性指数CI值＜3.2。

2.3 样品的测定

取经实验室检验合格样品13批次及不合格样品3批次，分别进行光谱录入。用所建一致性模型进行检验。结果，合格样品通过检验，不合格样品未通过检验。

2.4 结果

复方甘草片近红外一致性检验模型可以方便、快速判断药品的质量，为靶向性抽

样提供了有力支撑。下一步继续丰富一致性检验数据库，使所建模型更完善，更实用。

图2 复方甘草片近红外光谱

3 讨 论

3.1 薄层色谱提取溶剂选择

根据吗啡的性质，用水、甲醇提取，结果甲醇提取完全，干扰小。吗啡在70～80℃中溶解度高[3]，故选用在热水浴中提取。

3.2 展开剂的选择

经过不同展开剂比较，确定以乙酸乙酯-甲醇-氨水（8：5：0.5）为展开剂。同时进行适用性试验考察，结果色谱分离效果好，满足快检需求。

3.3 点样量的选择

对5～15μl进行考察，确定点样量为10μl，斑点适中，分离效果好。

3.4 近红外光谱图

近红外光谱图可能会因为仪器条件的不同而稍有差异，对于基线偏移，可通过矢量归一化或一阶导数化来消除；对于基线旋转，可采用一阶导数化结合矢量归一化处理来消除或使用二阶导数化。平滑点数以13或17为宜。谱段为9000～7500 cm－1、6900～5600 cm－1和5000～4250 cm－1，这三个谱段反映了CH和NH的合频和倍频吸收，信息量比较丰富[4]。

综上所述，复方甘草片近红外一致性检验的建立，几乎无成本，实现绿色检验，大幅提高监督靶向率，与薄层色谱方法结合，形成了复方甘草片的快检体系。为快检车的流动作业，提供了方便、及时、准确的手段，且经济和社会效益明显。

[1] 国家药典委员会.中华人民共和国药典[M].二部.北京:化学工业出版社,2015:796-797.

[2] 国家药典委员会.中华人民共和国药典[M].四部通则.北京:化学工业出版社,2015:0502.

[3] 国家药典委员会.中华人民共和国药典[M].一部.北京:化学工业出版社,2015:208-209.

[4] 张学博,尹利辉.近红外光谱一致性检验方法用于快速判断药品质量的研究[J].药物分析杂志,2011,31(3):603-608.