趋化因子受体CCR3、CCR5在过敏性紫癜患儿中的表达及复方甘草酸苷对其的影响

张小霞+吴俭+任妹

摘要：目的 测定趋化因子CCR3、CCR5的变化，探讨过敏性紫癜的发病机制以及复方甘草酸苷治疗过敏性紫癜（HSP）的疗效。方法 分为HSP患儿对照组、治疗组和健康儿童组3组，流式细胞仪检测紫癜组治疗前后及健康组趋化因子受体CCR3、CCR5水平。结果 紫癜组与健康组比较，CCR3明显升高，CCR5明显下降，比较存在极大差异（P<0.05）。治疗前后比较，治疗后CCR3降低，CCR5升高，比较有统计学意义（P<0.05），治疗组差异大于对照组。结论 HSP存在Th1/Th2失衡，复方甘草酸苷治疗HSP疗效确切，可能通过某途徑改变Th1/Th2，从而发挥作用。

关键词：过敏性紫癜；趋化因子受体CCR3、CCR5；复方甘草酸苷

过敏性紫癜（anaphlactoid purpumra）是以小血管炎为主要病变的系统性血管炎，其确切的发病机制尚不明，迄今尚无特效疗法。多数学者认为与T细胞免疫功能紊乱有关，尤以Th1/Th2失衡为多[1-2]。近几年已有报道，复方甘草酸苷对治疗HSP有一定的疗效。本文通过复方甘草酸苷治疗HSP，并检测健康儿童及HSP患儿治疗前后的趋化因子受体CCR3、CCR5的水平，来探讨复方甘草酸苷对HSP治疗的效果，证实Th1/Th2失衡是HSP发病机制之一。

1 资料与方法

1.1一般资料 研究对象为2016年5月～2016年10月我院收治的HSP患儿40例，年龄4～12岁，随机分为治疗组和对照组，每组各20例，两组在年龄、性别、病情严重程度等方面无统计学意义。入选标准：①符合第7版《儿科学》HSP诊断标准[3]；②出血时间、凝血时间及血小板计数均为正常；③治疗前均无免疫抑制剂应用；④无自身免疫性疾病；⑤无严重感染；⑥对所用药物成分既往无过敏史；⑦首次发病；⑧排除紫癜性肾炎或肾型。另将同期门诊体检的健康儿童排除有哮喘、鼻炎等过敏性疾病病史并且近1个月无感染史，尿常规正常者的10例作为正常儿童组，各组患儿的年龄、性别无统计学意义（P>0.05）。

1.2方法 紫癜组患儿均常规治疗，包括卧床休息，避免可疑过敏原，清除感染，钙剂、维生素C、西咪替丁静滴等。治疗组在常规治疗基础上静滴复方甘草酸苷1～2 mg/kg/d，1次/d，最大量为2 mg/kg/d，治疗7～10 d，平均治疗8.5 d。

1.3趋化因子受体CCR3、CCR5的测定 分别采集所选健康儿童和HSP患儿入院当天及出院前一天的血液（试剂均购自深圳晶美生物工程有限公司上海分公司）清晨抽取静脉血2ml，用肝素抗凝后立即送检，4个试管中各加入100 ul全血，均加入抗人CD4单克隆抗体（美国Phar Minger 公司出品）20 ul；之后分别加入抗人FITC-CCR3 单克隆抗体、同型阴性对照鼠IgG2a、抗人FITC-CCR5 单克隆抗体、同型阴性对照鼠IgG2b各20 ul（均为美国R&D System公司出品）。室温避光孵育20 min，每管加入溶血剂（Caltag公司）100 ul，室温避光孵育15 min。加入1 ml蒸馏水室温避光放置15 min，待溶血完全后离心（1500 r/min，5 min）；弃去上清，用PBS液混匀后上机检测（美国B.B公司的FACSCalibur流式细胞仪）。

1.4统计学方法 计量资料用均数±标准差（x±s）表示。用SPSS10.0 软件分析，差异比较用t检验，P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

紫癜组与健康组比较，CCR3明显升高，CCR5明显下降，比较存在极大差异（P<0.05）。治疗前后比较，治疗后CCR3降低，CCR5升高，比较有统计学意义（P<0.05），其中治疗组差异大于对照组，见表1。

3 讨论

CCR是近年来提出的新概念，是趋化因子或称趋化蛋白的受体，与趋化因子（一种具有趋化作用的细胞因子，在调控免疫细胞定向迁移中有着重要作用）结合后能激活各类白细胞，促进它们游走、聚集引起炎症反应。T细胞在特定组织中浸润，发挥特异性免疫效应的一个重要原因在于T细胞其表面趋化因子受体的表达。趋化因子受体与相应的趋化因子结合后介导Th细胞在不同的组织中迁移浸润，也是调节Thl/Th2优势性反应的重要因素。不同的趋化因子受体差异性地表达于Th1和Th2细胞表面，CCR5、CCR3分别特定性表达于Th1、Th2细胞[4]。本文研究显示紫癜组趋化因子受体CCR3、CCR5水平与健康组比较存在极大差异（P<0.05），证明其存在着Thl/Th2失衡，与相关文献报道一致。

复方甘草酸苷是由0.2%甘草酸苷、0.1%半胱氨酸和2%的甘氨酸配制的复方制剂，具有较强的抗炎、抗病毒、免疫调节及对肝细胞膜的直接保护作用，其中甘草酸苷具有较强的稳定细胞膜、抑制肥大细胞、释放组织胺抑制局部反应、抑制花生四烯酸诱导的皮肤炎性反应等作用。同时还具有活化T细胞诱发干扰素Y，活化NK细胞增强胸腺外周血T细胞的分泌功能，发挥其免疫调节作用[5]。过敏性紫癜是一种由免疫复合物介导的系统性小血管炎，而复方甘草酸苷的抗炎、抗过敏、调节免疫作用直接针对本病。治疗后CCR3、CCR5水平与治疗前相比有明显差异（P<0.05），治疗组差异大于对照组，说明复方甘草酸苷治疗HSP疗效确切，可能通过某种途径改变Th1/Th2，从而发挥作用。

参考文献：

[1]刘文东，于凌翔，薛爱红，李红.过敏性紫癜血清TNF-α、IL-4和IL一6的变化及临床意义.中国儿童保健杂志，2011，19（1）：77-79.

[2]Kawasaki V.The pathogenesis and treatment of pediatric Henoch-Schonlein purpura nephritis[J].C1inical and experimental nephrology，2011，15（5）：648-657.

[3]沈晓明，王卫平，儿科学[M].7版.北京：人民卫生出版社，2008：182-184.

[4]Loetscher P，UguccioniM，Bordoli L，et al.CCR5 is characteristic of Thl lymphocytes[J]Nature，1998，391（6665）：344-345.

[5]蔺莉莉.复方甘草酸苷治疗儿童过敏性紫癜临床疗效观察.内蒙古医学杂志，2009，22（10）：1182-1183.

编辑/肖慧