桃叶提取物的抑菌活性

刘丽萍++朱金瑶

摘要：以大肠杆菌、金黄色葡萄球菌和枯草芽孢杆菌为供试菌，通过滤纸片法比较不同溶剂和干燥方法对桃叶提取物抑菌作用的影响。结果表明，不同干燥方法获得的桃叶提取物对3种供试菌都具有较好的抑菌效果，以先晒后阴法对大肠杆菌的抑菌效果最好，抑菌圈直径最大可达19.3 mm；供试菌的抑菌效果随着菌悬液浓度的降低逐渐增大，对大肠杆菌最显著；不同溶剂的提取物对3种供试菌都有抑制作用，但抑菌效果不同，3种供试菌最佳的提取溶剂都为60%的乙醇。

关键词：桃叶；提取物；抑菌作用

中图分类号：TS201.3 文献标识码：A 文章编号：0439-8114（2016）21-5543-02

DOI：10.14088/j.cnki.issn0439-8114.2016.21.025

Study on Antimicrobial Effect of Extracts From Peach Leaf

LIU Li-ping， ZHU Jin-yao

（College of Life Science and Technology， Longdong University， Qingyang 745000， Gansu， China）

Abstract：In order to investigate antimicrobial effect of peach leaf， active components of peach leaf were extracted by different solvents. With Escherichia coli，Staphylococcus aureus， Bacillus subtilis as test samples，the influences of different solvent and drying method on antimicrobial effect were studied by using filter paper method. The results showed that，extracts of peach leaf by different drying method all had good inhibitory effect to 3 test bacteria，but the best drying method for 3 bacteria were different，the inhibition diameter of Escherichia coli was 19.3 mm. The antimicrobial effect was gradually increased with the decrease of suspension concentration，and Escherichia coli had the most significant effect. Extracts of different solvent all had inhibitory influence on 3 test bacteria but the antimicrobial effect was different，and the optimal extraction solvent was 60% ethanol.

Key words： peach leaf； extracts； antimicrobial effect

桃葉系蔷薇科植物桃的叶子，桃树在我国广泛种植，是一种来源广泛的天然可再生资源。桃叶主要成分是糖甙、柚皮素、奎a宁酸、番茄红素、鞣质和扁桃叶酸酰胺及少量腈甙[1-3]。桃叶具有抗过敏、抗菌、消炎、止痛、通便的作用[4-6]，所含的有效成分在现代食品、医药行业具有广泛的用途。目前对桃叶的报道主要集中在桃叶有效成分分析、杀灭阴道滴虫、杀蚊活性等方面[7-10]，抑菌研究方面还没有相关的报道。本研究以食品中的常见污染菌大肠杆菌、金黄色葡萄球菌和枯草芽孢杆菌为供试菌，采用桃叶提取物对其进行抑菌活性试验，以期为纯天然的食品防腐保鲜剂与植物源医药提供参考。

1 材料与方法

1.1 材料

桃叶采自陇东学院附近多年生桃树。菌种为大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌。

1.2 方法

1.2.1 桃叶的干燥 为降低桃叶的含水量，便于保存和提取，将采集的新鲜桃树叶采用40 ℃热风干燥、阴干、先晒后阴和晒干4种干燥方法处理桃叶，粉碎后置于烧杯中备用。

1.2.2 桃叶提取物的制备

1）不同干燥方法提取物制备。分别称取4份质量为10 g经阴干、晒干、先晒后阴和40 ℃热风烘干的桃叶于烧杯中，以60%乙醇为溶剂，液料比为 10∶1、在80 ℃条件下浸提1.5 h，浸提液用多层纱布过滤，滤液即为浸提液，浓缩干燥后备用。

2）不同溶剂提取物制备。取40 ℃烘干的桃叶10 g，取石油醚、乙酸乙酯、丙酮、60%乙醇、95%乙醇和蒸馏水6种不同极性的溶剂在液料比10∶1、温度80 ℃下分别浸提桃叶粉1.5 h，收集滤液，浓缩干燥后备用。在测定抑菌活性前将6种提取物用无菌水溶解，配成质量浓度为10 g/L的溶液，备用。

1.2.3 抑菌活性测定 供试菌株悬浮液的制备：将供试菌接种于固体肉汤培养基上，37 ℃培养24 h，用接种针挑取菌块加入到无菌生理盐水中，调节菌悬液浓度。将供试菌浓度设定为1×105～6×105、1×106～6×106、1×107～6×107 cfu/mL 3个梯度。

抑菌试验：采用滤纸片法，用打孔器将滤纸片打成直径为8 mm的圆片，滤纸片经高压灭菌后，在桃叶提取物溶液及空白对照的生理盐水中浸泡30 min，沥去多余的试液，用无菌镊子将滤纸片置于涂好菌液的培养基上。每皿4片，细菌经37 ℃培养24 h后，量取抑菌圈直径，作为桃叶抑菌活性指标。

2 结果与分析

2.1 桃叶不同干燥方法对提取液抑菌活性的影响

桃叶分别经过阴干、晒干、先晒后阴及烘干4种方法干燥粉碎，采用60%乙醇浸提有效成分，控制供试菌浓度为1×106～6×106 cfu/mL，并以细菌为指示菌测定抑菌活性，结果见表1。从表1可知，4种干燥方法获得的桃叶提取物对枯草芽孢杆菌、大肠杆菌和金黄色葡萄球菌均具有较好的抑制作用，且不同干燥方法桃叶提取物的抑菌作用不同。对金黄色葡萄球菌，采用烘干法桃叶提取物的抑菌效果最好，对其他两种菌则采用先晒后阴法桃叶提取物的抑菌效果最好。

2.2 不同浓度菌悬液对桃叶抑菌活性的影响

将桃叶烘干后，用60%乙醇浸提有效成分，以细菌为指示菌测定抑菌活性，考察不同浓度菌悬液对抑菌活性的影響，分别将供试菌的菌悬液浓度控制在1×105～6×105、1×106～6×106、1×107～6×107 cfu/mL，结果如表2所示。从表2可知，随着菌悬液浓度的降低，大肠杆菌、金黄色葡萄球菌和枯草芽孢杆菌的抑菌圈直径逐渐增大，抑菌效果逐渐增强，当菌悬液浓度降低到1×105～6×105时，抑菌圈直径达23.3 mm，抑菌效果最好。对金黄色葡萄球菌和枯草芽孢杆菌，随着菌悬液浓度的降低，抑菌圈直径有一定程度的变化，但变化很小。

2.3 不同溶剂对桃叶抑菌活性的影响

为了考察不同溶剂对桃叶抑菌活性的影响，采用烘干桃叶法获得不同溶剂的提取液，控制菌悬液浓度为1×106～6×106测定抑菌效果，结果见表3。由表3可知，不同溶剂获得的提取物对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌和枯草芽孢杆菌都有抑制效果，60%乙醇、90%乙醇和蒸馏水提取物对3种供试菌的抑菌效果最好，石油醚和丙酮提取物的抑菌效果最差。不同溶剂的提取物对大肠杆菌的抑菌效果较为显著，对金黄色葡萄球菌次之，对枯草芽孢杆菌的抑菌效果较差，说明不同溶剂桃叶提取物对革兰氏阴性菌的抑菌效果比阳性菌好。桃叶不同溶剂提取物对同一种菌的抑菌效果也有较大差别，但最佳的提取溶剂均为60%乙醇。

3 小结与讨论

本研究通过对桃叶提取物进行抑菌活性试验，发现桃叶的各种溶剂提取物在一定程度上具有抑制细菌生长的作用，特别是60%乙醇提取物抑菌效果显著，说明桃叶中含有抑菌活性化合物。试验结果表明，桃叶提取物对食品常见的有害菌有抑菌作用，可进一步将提取物中的抑菌活性成分分离出来，对用于食品防腐保鲜与植物源药物研究具有一定意义。

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