盖丽娜, 傅占江, 代晓朋
(白求恩医务士官学校 医学技术系, 河北 石家庄 050081)
寄生虫教学标本的保存与管理
盖丽娜, 傅占江, 代晓朋
(白求恩医务士官学校 医学技术系, 河北 石家庄 050081)
介绍了各类寄生虫标本的采集、制作和保存的规范方法,列举了几种常用的标本固定液的制作方法,通过探讨几种常见寄生虫不同发育期和不同寄生部位固定与保存的方法,使得寄生虫标本能够形态完整并得以长期保存,有效解决了寄生虫标本缺乏的问题,提升了寄生虫标本的保护与利用水平,使现有标本得到妥善保管,保证教学使用.
寄生虫; 标本; 保存
人体寄生虫学检验是医学检验专业的专业课程之一,也是医学的重要基础课程之一.按照素质教育的要求,强化医学实验课的实践活动将成为培养学生创造能力的重要渠道.因此,如何为寄生虫实验课提供保存完好的寄生虫标本,是实验课成功的重要影响因素.
近年来,随着社会的发展,人们的生活水平不断提高,普遍的卫生条件得到了大幅改善,预防和治疗寄生虫病知识也得到广泛宣传普及,人体寄生虫感染率的不断下降,一部分寄生虫感染性疾病病例已很少出现甚至消失,导致了人体寄生虫学实验教学标本采集越来越困难,造成了寄生虫教学标本的缺乏,给人体寄生虫实验教学带来了许多困难[1].因此,如何更有效地对这些现存的珍贵标本进行妥善保存和管理,使其最大限度的发挥作用,应用于实验教学和临床研究,已经成为当前急待解决的课题.本文主要从寄生虫标本的分类、保存及管理三个方面进行探讨,以期能够使现有的寄生虫标本得到妥善保管,保证教学使用.
寄生虫标本依其制作方法不同可以分为三大类:玻片标本、浸制标本和干制标本[2].玻片标本是指经过一定处理的寄生虫的整体或局部的标本,如蠕虫的虫卵、幼虫和成虫或虫体某一部分、原虫、节肢动物的幼虫及成虫,是为了便于生物显微镜观察而制作的标本;浸制标本是指利用药剂浸渍液的化学性质,处理和保存标本,防止标本发生物理、化学性质的变化,一般较大的蠕虫、蠕虫的中间宿主及被虫体寄生的病变器官或组织等可用此法保存,用肉眼即可观察;干制标本即经过防腐处理并干燥后的标本,如节肢动物成虫、蠕虫的中间宿主等,可直接肉眼观察,有时需用解剖显微镜、放大镜观察.
收集到寄生虫标本后需按照常规寄生虫标本的固定及保存方法及时进行处理.一般寄生虫标本的首要处理步骤就是固定处理,固定处理能够在不损伤和改变虫体的前提下使虫体迅速死亡,保持虫体原有的形态结构,并且虫体内的物质最终会凝固成不溶物,防止其自溶和腐烂,使得标本的内部结构完整并易于着色.通常选用甲醛溶液及酒精作为标本固定保存液.
玻片标本可以用于保存蠕虫的虫卵、幼虫及成虫、节肢动物的幼虫及成虫、原虫的各发育阶段标本.制备玻片标本一般需先对标本进行固定然后封片.不同寄生虫的各发育阶段应选用不同的固定及封片方法.
虫卵可选用10%甲醛溶液固定,在处理极易分化发育的虫卵(如钩虫卵、感染期蛔虫卵等)时,须加热标本(约70 ℃)以杀死虫卵[3].虫卵标本的常用保存方法是甘油明胶封片法,做法是:将甘油明胶水浴加热溶化,然后用吸管吸取一小滴已固定的虫卵悬液,滴在洁净的载玻片上;用细玻璃棒蘸取已溶化的甘油明胶一滴,滴加在载玻片的虫卵上,用玻璃棒将虫卵悬液与甘油明胶两者快速调匀,立即覆盖以圆形盖玻片;待稍干后,用树胶封边保存.
对蠕虫的幼虫(如钩虫的钩蚴、血吸虫的尾蚴等)固定时,使用5%甲醛或75%乙醇,方法是:先将固定液加热至50 ℃,再与幼虫液混合,加热后的固定液可使虫体伸展,便于鉴定,在上述固定液中滴加数滴甘油可使虫体略透明,便于观察.蠕虫的成虫如不需染色(如各种线虫及吸虫)则使用单一的固定液,如5%~10%甲醛溶液或70%酒精,如做染色标本(如绦虫的孕节)则选用几种固定剂配制成的混合液.标本封片方法:首先在洁净的载玻片上滴加适量树胶,然后取出保存液中的标本,用吸水纸吸去标本上多余的液体后,立即放入载玻片上的树胶内,调整好虫体的姿态,排出气泡,覆盖洁净的盖玻片.
浸制标本是寄生虫标本收藏和科普知识展览展示的常用形式. 制作浸渍标本时要按照寄生虫虫体的大小选择尺寸合适的标本瓶,再在瓶底垫一些脱脂棉,取玻璃板或玻璃圆柱作为固定大体标本的底板,从保存液中取出完整的寄生虫虫体,在玻璃板或玻璃圆柱上摆好虫体的姿势和位置,取已融化的动物明胶将虫体粘贴牢固;然后将玻璃板或玻璃圆柱放入标本瓶中,再缓缓倒入保存液(通常为75%酒精或5%福尔马林);最后盖上标本瓶的盖塞,用石蜡密封.
被虫体寄生的组织器官以及吸虫的中间宿主水生植物等都可以直接放入标本瓶,然后加保存液,盖上盖塞,石蜡密封即可.
吸虫的中间宿主虾蟹类,首先用清水洗去粘附的污物,用5%~10%的酒精麻醉,使其组织松弛自然死亡后再固定,或在10%的福尔马林中杀死、固定;然后将标本置于浸制液中保存,浸渍液为80%酒精与10%甘油的混合液或15%福尔马林与10%甘油的混合液[4].
吸虫的中间宿主螺类需先将其软体部分用解剖针取出,而后洗净空壳内外部分、阴干;最后按照螺类体积大小放入不同的容器(玻璃指管、纸盒等)中,同时放入标签标明[5].
节肢动物昆虫类可以用昆虫针固定昆虫,然后将昆虫针的一端插入合适大小的软木块,另一端用软木塞固定,再在标本外小心扣上粗玻璃试管,使之与软木塞密封组合在一起.
不同种类寄生虫标本特性有差别,在日常标本维护中应进行分类管理.
玻片标本由于盖玻片及载玻片都很薄、易碎,使用时应轻拿轻放,每次使用完后要用清洁的布蘸取少量酒精擦拭干净,并按标签或编号平放在标本盒中避光保存.在实验中指导学生正确使用显微镜,严格按照实验规程操作,尽量防止标本损坏.对已破损的玻片标本要及时修复或更换,重新封片,以便再次使用.
浸制标本是为了保持动植物体固有的形态和色泽防腐液浸泡制成的.在浸制标本的管理中,要注意标签要贴牢,要保持标签的洁净干燥和保存标本瓶体的干净整洁,标本要放在标本柜中避光保存.如发现保存液变质或挥发减少应及时更换或添加[6].
干制标本管理过程中,要注意标本保形和保色.在日常管理中应有专人负责,定期检查,防潮、防虫、防光.例如在标本盒及标本柜中放入樟脑精或樟脑粉等;标本柜的柜门应严密,可在柜中放入干燥剂用来除湿;标本室要挂窗帘,平时不用时应关闭窗帘,防止光照使标本变色.
寄生虫标本的收集、制作、保存以及管理过程中的每一环节都很重要.为了保证寄生虫标本的质量,要制定严格的实验室标本管理制度,利用多种方法与手段将标本的损耗降到最低,保证标本的质量,才能使寄生虫标本在教学工作中发挥其应有的作用.随着寄生虫标本管理方法及制度的进一步完善,这些标本将会更好地服务于教学和科研,同时对于控制寄生虫病传播以及治疗和预防等方面也将会发挥更大的社会效益.
[1] 言敢威,曾庆仁,舒衡平.实验教学标本来源的现况及其措施[J].基础医学教育,2002,4(3):240-242.
[2] 秦啸峰,潘晋,陈茜文,等.浅谈人体寄生虫学实验标本的保存[J].继续医学教育,2012,11(26):1-3.
[3] 徐静.常见寄生虫标本的固定与保存[J].中外医疗,2008,27(12):108.
[4] 郑伟.水生经济种类生物标本的制作与保存[J].中国渔业经济,2009,6(27):138-142.
[5] 张仪,周晓农,刘和香.医学软体动物标本制作技术的探讨[J].中国寄生虫学与寄生虫病杂志,2006,(24):54-61.
[6] 姜良树.生物标本的保养和维护[J].生物学通报,2001,7(36):35.
PreservationandManagementofParasiticSpecimensforTeaching
GAI Lina, FU Zhanjiang, DAI Xiaopeng
(Department of Medical Technology, Bethune Medical NCO School, Shijiazhuang 050081, China)
This article introduces the methods of collecting, producing and preserving all kinds of parasitic specimens. And several commonly used methods of making specimen fixatives are listed. By discussing the methods of fixing and preserving several common parasites at different developmental stages and different parasitic sites, this paper draws a conclusion that the parasite specimens can be preserved in shape and long-term preservation, so it effectively solves the problem of lack of parasite specimens and further enhances the protection of parasite specimens and the level of utilization, which enables the existing specimens to be properly kept for teaching.
parasites; specimen; preservation
2017-08-08
盖丽娜,硕士,助教,研究方向:寄生虫学与生物化学检验.E-mail:45638630@qq.com
R38
A
1009-1734(2017)10-0109-03
[责任编辑邵圣文]