腹腔镜阑尾切除术对免疫功能影响分析

周爱华

（武汉大学基础医学院，湖北 武汉 430071）

腹腔镜阑尾切除术对免疫功能影响分析

周爱华

（武汉大学基础医学院，湖北 武汉 430071）

目的探讨分析腹腔镜阑尾切除术对免疫功能影响。方法随机选取2015年8月～2016年5月期间在我市中心医院接受诊治的阑尾疾病患者100例作为本次的研究对象，100例阑尾疾病患者中，50例患者行开腹阑尾切除术，将此分为甲组，50例患者行腹腔镜阑尾切除术，将此分为乙组，对两组患者的腹腔的巨噬细胞产生TNFɑ生物学活性和中性粒细胞吞噬功能以及腹腔T细胞亚群CD4+/CD8

+的比值进行检测。结果两组T淋巴细胞亚群CD4+/CD8

+比值没有明显差异，甲组为0.53，乙组为0.57，差异无统计学意义（P＞0.05）。甲组中性粒细胞化学发光峰值为98，乙组为102。甲组L929细胞0D570值为0.183，乙组为0.152。结论开腹阑尾切除术相对腹腔镜阑尾切除术来说对腹腔局部免疫特别是细胞免疫有明显的抑制效应，腹腔镜阑尾切除术对腹腔局部免疫没有明显的抑制作用，开腹阑尾切除术对巨噬细胞功能有明显的影响。

腹腔镜阑尾切除术；免疫功能；影响分析

据相关研究证明，现腹腔镜手术相比开腹手术具有显著的优点，对全身创伤损伤相对来说较小，不过手术对人体的创伤损伤小会不会对机体的免疫功能影响同样小呢，在当前还没有达成一致的结论[1]。

1 资料与方法

1.1 一般资料

乙组患者当中，男28例，女22例，年龄范围区间为20～65岁，平均年龄值为（41.1±1.2）岁。采用CO2气腹，压力12～14 mmHg。甲组患者当中，男27例，女23例，年龄范围区间为24～64岁，平均年龄值为（42.3±0.9）岁。两组手术时间为40～50 min不等，平均手术时间为40分钟。两组患者在一般资料比较，差异无统计学意义（P＞0.05）。

1.2 方法

1.2.1 中性粒细胞吞噬功能测定

对于中性粒细胞吞噬功能的检测，本研究研采用发光剂―鲁米诺法进行检测。培养箱温度为37℃，5%CO2，中性粒细胞悬液混匀置此培养箱当中，取悬液需在60 min以后，最后可取剂量为0.1 mL的悬液，测定管中分别置入鲁米诺和血浆活化酵母多糖。测定出化学光峰值，采用LKB 1 250发光仪进行为数3次的测定，单位为V/mv。吞噬功能受损的观察指标为峰值降低。

1.2.2 TNF-α生物学活性检测

L929细胞用胰酶消化处理，之后对细胞浓度调整至2×105/mL。于96 孔培养板每孔接种细胞悬液，每孔为100 µL，培养箱温度为37℃，5%CO，进行为时4 h的培养后，使细胞贴壁。将100μl 4倍稀释的上清液加入至每孔当中，在此过程中置入阴性，目的是方便对照。培养箱温度为37℃，5%CO，进行为时24小时的孵育后，将50µL MTT将入每孔当中继续培养4小时，将上清弃去，同时将150µL DMSO加入每孔当中， 酶标自动分析仪读取OD值（波长为570 nm）。倘若OD值越，以此说明TNF-α生物学活性越低，同时L929 细胞生长抑制程度就越轻。

1.2.3 T淋巴细胞亚群检测

采用由美国BD公司生产的CD4 FITC/CD8PE抗体。将10 µL标记抗体加入至各100 µL样本当中，进行为时20 min的室温暗处反应后， 加入由美国BD公司生产的剂量为2mL的1×FACS溶血素，进行为时10 min的室温暗处反应。1000 g离心10分钟，将上清弃去，加入剂量为2 mL的PBS，同上所述1000 g离心10 min，将上清弃去，加多聚甲醛固定（500 µL 1%），分析采用流式细胞仪进行分析，此操作需在24 h之内完成。分别记录CD4+胞数与CD4

+/CD8+比值以及CD8

+细胞数。

1.4 统计学方法

采用SPSS 19.0统计学软件对数据处理，计量资料以“±s”表示，采用t检验；计数资料以例（n），百分数（%）表示，采用x2检验；以P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结 果

2.1 巨噬细胞 TNF- α活性比较

应用L929细胞法对巨噬细胞TNF-α活性进行测定。两组OD值差异明显，甲组为0.183，乙组为0.152，甲组高于乙组，差异有统计学意义（P＜0.05）。

2.2 两组中性粒细胞吞噬功能比较

两组患者应用化学发光法测定其中性粒细胞吞噬功能，经过测定后，甲组98为其平均发光峰值，乙组为102，平均发光峰值两组差异明显，甲组低于乙组，差异有统计学意义（P＜0.05）。

2.3 淋巴细胞亚群比较

两组T淋巴细胞亚群CD4+/CD8

+比值没有明显差异，甲组为0.53，乙组为0.57，差异无统计学意义（P＞0.05）。

3 讨 论

对于手术的一般创伤可以一定程度改变机体的免疫功能，手术损伤的大小和所需时间与免疫功能所发生改变的改变程度两者之间呈正比的关系。单核- 巨噬细胞、粒细胞、T 淋巴细胞构成机体的细胞免疫。防御感染的主要屏障主要是由中性粒细胞的吞噬功能发挥着巨大作用。

[1] 温泽霖.急诊腹腔镜阑尾切除术对2型糖尿病患者胰腺内分泌功能的影响[D].重庆医科大学,2015.

[2] 刘 玲,阮雅文.腹式与腹腔镜全子宫切除术对患者机体免疫功能影响的临床对比研究[J].新疆医科大学学报,2011,12:1379-1383.

[3] 陈 勇,王胜义,查 健.腹腔镜下阑尾炎切除术对小儿细胞免疫功能的影响[J].吉林医学,2009,23:2934-2936.

R656.8

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ISSN.2095-8242.2017.049.9544.01

本文编辑：李 豆