恶性血液病患者T淋巴细胞亚群检测研究

汤丽　任敏

【摘要】 目的：分析恶性血液病患者的外周血T淋巴细胞亚群变化及其检测价值。方法：选取2012年1月-2015年12月笔者所在医院收治的恶性血液疾病患者40例（A组）、良性血液病患者34例（B组）和正常人30例（C组）作为研究对象，检测和比较三组的T淋巴细胞亚群变化。结果：A组和B组的CD3+、CD4+、CD4+/CD8+较C组均明显降低，且A组明显低于B组，差异有统计学意义（P<0.05）；A组和B组的CD8+及CD16+、CD56+较C组均明显提高，且A组明显高于B组，差异有统计学意义（P<0.05）。结论：血液病患者存在不同的免疫功能失调，且以恶性血液病患者更为严重，T淋巴细胞亚群检测对于良恶性血液病的诊断鉴别、临床治疗决策与预后评估具有重要指导意义。

【关键词】 恶性血液病； 免疫功能； T淋巴细胞亚群

doi：10.14033/j.cnki.cfmr.2016.31.030 文献标识码 B 文章编号 1674-6805（2016）31-0057-02

血液病史至血液协同原发或继发性疾病，患者的临床表现主要为发热、出血及贫血等。临床根据其良恶性主要分为良性与恶性血液病两类，其中，恶性血液病主要有急性白血病（AL）、慢性白血病（CL）、多发性骨髓瘤（MM）、淋巴瘤（LM）等，严重威胁人类生命健康[1]。T淋巴细胞是机体免疫调节的重要细胞，在正常生理状态下其在体内的数量及构成比关系较为稳定，而当发生失调时可诱发多脏器系统疾病。临床研究表明，在恶性疾病的发生及发展过程中均存在不同程度的T淋巴细胞亚群失衡，但关于其在恶性血液疾病患者中的变化特征，目前尚鲜见报道[2]。本文测定分析了40例恶性血液病患者的外周血T淋巴细胞亚群变化，并与34例良性血液病、30例正常对照组進行比较，旨在评估T淋巴细胞亚群变化在恶性血液病中的意义及检测价值，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选取2012年1月-2015年12月笔者所在医院收治的恶性血液疾病患者40例（A组）、良性血液病患者34例（B组）和正常人30例（C组）。A组中，男24例，女16例；年龄41～81岁，平均（53.90±3.35）岁；疾病类型： AL5例， CL6例， MM3例， LM18例，骨髓增生异常综合症3例，骨髓纤维化2例，骨髓增殖性疾病1例，霍奇金氏病1例，淋巴管瘤1例。B组中，男17例，女13例；年龄13～77岁，平均（49.76±3.36）岁；疾病类型：贫血10例，白细胞减少9例，血小板减少7例，血细胞减少3例，过敏性紫癜5例。C组中，男15例，女15例；年龄20～82岁，平均（52.13±3.45）岁。三组年龄与性别构成比较差异无统计学意义（P>0.05）。

1.2 方法

受试者常规于清晨9∶00-10∶00采集外周静脉血2 ml，应用EDTA抗凝处理，在2 h内检查。向试管中分别加入40 μl相应的单克隆抗体，包括CD3/CD4/CD8/CD16+CD56 TEST试剂，然后吸取100 μl待测样本，加入1 ml PBS缓冲溶液，充分混匀以后，置于室温避光条件下进行孵育处理，15 min以后加入适量荣雪茹，再次混匀后置于室温避光条件下反应10 min，然后再加入2 ml PBS缓冲液进行洗涤，常规离心，留取下层溶液，再次洗涤1次，然后加入500μl PBS缓冲溶液。完成样本处理后，将其置入流式细胞仪（BD公司生产 FACSCalibur型）进行全自动分析，测定CD3+、CD4+、CD8+、CD16+CD56，并计算CD4+/CD8+。正常参考范围：CD3+为60%～80%，CD4+为35%～55%，CD8+为20%～30%，CD4+/CD8+为1.4～2.0，CD16+CD56为7%～40%。

1.3 统计学处理

采用SPSS 18.0统计学软件包对本次研究相关数据进行处理与分析，计量资料以（x±s）表示，采用t检验，计数资料以率（%）表示，采用字2检验，P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

A组和B组的CD3+、CD4+、CD4+/CD8+较C组均明显降低，且A组明显低于B组，差异有统计学意义（P<0.05）；A组和B组的CD8+及CD16+CD56较C组均明显提高，且A组明显高于B组，差异有统计学意义（P<0.05），见表1。

3 讨论

免疫功能降低是恶性疾病患者普遍存在的现象，免疫功能紊乱程度与疾病的发生、发展及临床转归均有紧密关系。临床研究表明，恶性疾病患者的免疫功能紊乱以细胞免疫功能降低为主，可能是由于恶性疾病发生及发展过程中存在多种免疫因子合成或分泌增多，导致细胞功能免疫受到抑制[3]。T淋巴细胞是细胞免疫主要群体，主要由胸腺生成，可起到免疫功能执行与免疫功能调节双重作用。其中，辅助性T细胞（Th）中主要标志性细胞为CD3+及CD4+，具有抗肿瘤作用。一旦发生Th细胞亚群比例降低，多提示免疫功能低下，导致机体抵抗肿瘤、感染的能力降低[4]。目前，临床对T淋巴细胞亚群的研究多关注传染性肝炎患者的检测，而对于恶性血液疾病的检测目前尚报道较少。

恶性血液系统疾病中，以白血病最为常见，其属于造血干细胞克隆性恶性疾病，发病过程中由于白血病细胞的分化成熟能力丧失，继而停滞在各个不同的细胞发育阶段，导致造血组织中大量白血病细胞聚集，同时还可累及其他脏器组织，影响造血功能，从而导致机体免系统功能紊乱[5]。ML在临床中也较为常见，其发生及发展均与淋巴组织免疫应答过程中，各类免疫细胞发生增殖分化有关，因此其实际上也是一种免疫系统相关性恶性肿瘤。临床研究表明，免疫系统缺陷可能在ML的发生及发展过程中起着关键性作用。MM主要是由于骨髓中浆细胞发生异常增殖，导致骨骼被破坏，继而造成单克隆免疫球蛋白产生，抑制正常多克隆免疫球蛋白的正常合成过程，继而导致贫血等症状。相关研究资料显示，MM患者存在多种免疫系统缺陷，其发生及发展与免疫细胞数量减少及免疫细胞功能障碍密切相关[6]。由此可见，免疫细胞紊乱在多种恶性血液疾病的发生及发展过程中均具有重要作用。外周血T淋巴细胞亚群能够较为客观地反应机体的细胞免疫功能状态，且不同亚群的生理功能存在较大的差异，一旦T淋巴细胞亚群数量发生异常，多提示机体存在病理生理变化[7-8]。因此，测定外周血T淋巴细胞亚群比例能够在较大程度上反映疾病状态，这对于疾病的诊断、治疗及病情评估均具有重要意义。甄祯等[9]研究表明，恶性血液病患者的CD3+、CD4+、CD4+/CD8+、CD3+CD16+CD56 T淋巴细胞比例均较正常对照组明显降低，而CD8 T淋巴细胞明显提高，其研究还发现，不同类型恶性血液疾病患者的T淋巴细胞亚群计数均与健康对照组比较差异显著，表明恶性血液病患者存在明显的细胞免疫功能失衡。本研究中，良性与恶性血液病（A组与B组）患者的CD3+、CD4+、CD4+/CD8+均较健康对照组（C组）明显降低，CD8+及CD16+CD56+均较C组明显提高，与上述报道一致，证明了血液病患者存在不同程度的细胞免疫功能紊乱。而A组与B组比较，A组的T淋巴细胞亚群紊乱更为明显，组间比较差异均有统计学意义，进一步证实恶性血液病患者的T淋巴细胞亚群紊乱较为明显，细胞免疫功能降低严重，这对疾病诊断与治疗具有重要意义。

综上所述，良、恶性血液病患者存在不同程度的细胞免疫功能降低，而恶性血液病患的免疫功能缺陷或障碍更为严重。T淋巴细胞亚群检测和分析对于良、恶性血液病的诊断鉴别、临床治疗决策与预后评估具有重要参考价值。

参考文献

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[9]甄祯，叶芳，李国霞，等.恶性血液病患者T淋巴细胞亚群的检测分析[J].中国当代医药，2014，21（9）：101-102.

（收稿日期：2016-07-28）