脐血检测在早发型新生儿败血症中的作用〔1〕

钟小梅，吴澄

(赣州市人民医院，江西 赣州 341000)

脐血检测在早发型新生儿败血症中的作用〔1〕

钟小梅，吴澄

(赣州市人民医院，江西 赣州 341000)

目的：探究脐血检测在早发型新生儿败血症诊断中的作用。方法：选择2014年1月—2015年5月出生、在72 h以内发病、后经过血培养证实为早发新生儿败血症患儿80 例为观察组，选择同期住院的无感染征象的新生儿80 例为对照组。观察组在入院初期用药前和恢复期分别采集空腹静脉血，检测CD4、CD8、降钙素原(PCT)以及内毒素，对照组入院时一次性采血检测上述指标。结果：入院时两组的CD4、CD8、PCT、内毒素比较，差异有统计学意义(P<0.05)；两组恢复期的CD4、CD8、PCT、内毒素与治疗前比较，差异有统计学意义(P<0.05)。对患儿的脐血和静脉血行降钙素原、内毒素、T淋巴细胞亚群检测后发现，脐血中降钙素原、内毒素、T淋巴细胞亚群明显增高，特别是降钙素原诊断价值最高。结论：脐血作为新生儿体内最早可得到的血液标本，在临床应用中显示出极大的优越性，联合应用降钙素原、内毒素、T淋巴细胞亚群等脐血炎性指标可以极大地提高新生儿败血症诊断的准确性。

早发型新生儿败血症；脐血检测；临床作用

早发型新生儿败血症(EONS)指患儿在出生后72 h以内发病，一般与母体密切相关，通常由母亲垂直传播引起，病死率极高。2002年该疾病被国际儿科败血症大会定义为一种继发性感染的全身炎症反应综合征，对于新生儿的生命安全威胁极大，由于新生儿免疫系统发育未成熟等原因，对新生儿期重症感染的早期临床诊断仍缺乏一种可靠准确的检测手段。降钙素原、内毒素、T淋巴细胞亚群是目前感染诊断方面的热点，而脐血是可在新生儿获取的最早血液标本，因此我们尝试检测脐血中的降钙素原、内毒素、T淋巴细胞亚群水平来达到早期诊断早发型新生儿败血症的目的。本文对于我院已经确诊为早发型新生儿败血症的患儿进行临床研究，报告如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选择我院2014年1月—2015年5月出生、在72 h以内发病、后经过血培养证实为早发新生儿败血症的80 例患儿为观察组，选择同期住院的无感染征象的新生儿80 例为对照组。两组均无先天性畸形、免疫系统缺陷、严重肝肾疾病以及遗传代谢性疾病。观察组男52 例，女28 例；出生体重(2 561.34±24.07) g；日龄1～15 d；胎龄35～42 周。对照组男49 例，女31 例；出生体重(2 557.18±21.37) g；日龄1～16 d；胎龄34～42 周。两组患者性别、出生体重、日龄、胎龄等基础资料比较，差异无统计学意义(P>0.05)，具有可比性[1]。

1.2 方法

观察组在入院初期用药前和恢复期(抗感染治疗1 周后)分别采集空腹静脉血，采用美国Beckman CoulterEpics-XL4型单激光4色流式细胞仪检测CD4、CD8，试剂及质控品均为Beckman Coulter公司配套产品，采用免疫荧光检测仪(广州万孚生物技术股份有限公司)检测降钙素原(PCT)，采用鲎试剂动态比浊定量测定法检测内毒素。对照组入院时一次性采血检测CD4、CD8、PCT以及内毒素，检测方法同观察组。

1.3 标本采集

由于脐血难以保存，并且出生后一般都会丢弃，因此对于母体有高危感染因素(如糖尿病、三度以上羊水、胎膜早破、母体感染等)，全身情况较差的新生儿常规留取脐血；所有患儿入院后需在严格无菌条件下采集静脉血，避免污染导致血培养检查假阳性[2]。

1.4 统计学方法

2 结 果

入院时观察组PCT、内毒素显著高于对照组，观察组CD4、CD8指标均显著低于对照组，两组比较，差异有统计学意义(P<0.05)(见表1)。

观察组治疗后恢复期时与治疗前比较，PCT、内毒素指标均显著降低，CD4、CD8指标均显著升高，差异有统计学意义(P<0.05)(见表2)。

表1 两组入院时CD4、CD8、PCT以及内毒素的比较

表2 观察组治疗前后CD4、CD8、PCT以及内毒素水平的变化

3 讨 论

早发型新生儿败血症(ENOS)目前在临床上没有统一的认证标准，而通过对我国的相关文献进行查阅可以发现几乎没有任何一篇文献对此进行了确定的定义[3-5]。在对该病症进行诊断时，由于缺乏统一标准，使诊断变得比较困难。每年全世界有超过百万的新生儿死于感染。据不完全统计，新生儿感染的发病率为0.3%～3%。早期发现感染并及时治疗能显著改善新生儿的预后。早发型新生儿败血症感染与围生期因素有关，一般由母婴垂直传播引起。本研究检测脐血中降钙素原、内毒素、T淋巴细胞亚群的水平，明确脐血中此三项感染标志物在诊断早发型新生儿败血症的作用，更好地为新生儿早期感染的诊断与治疗提供指导和帮助[6-7]。对于如何提高早发新生儿败血症的临床诊断效果一直是现代临床医学的重点研究课题。在选择可以判断新生儿早发型败血症的标志物时，要综合考虑各方面的因素，首先标志物的选择应对该种病情的变化具有非常高的灵敏度，另外，在特异性、阴性/阳性预测值方面也要具有比较高的比拟性。由于ENOS具有的高发病率和高致死率，所以漏诊会给患者带来严重影响，甚至危及患者的生命安全[8]。因此，对于ENOS标志物的选择至关重要。患儿脐血中降钙素原、内毒素、T淋巴细胞亚群对于该疾病的灵敏度较高，而且临床表现特征明显，是临床诊断的一种重要参考指标。

降钙素原(PCT)是临床诊断ENOS的一种重要参考指标。有试验研究[9]将PCT作为对ENOS进行诊断的标准。通过研究发现，PCT的特异性和灵敏度都非常高，分别达到了86%和82%。PCT是降钙素原的前身，作为一种非固醇类的抗炎物质，该元素在对人体内的细胞因子进行调控过程中发挥着非常重要的作用。在正常情况下，人体内的PCT含量很低，一个健康成年人的血清中的PCT含量通常为0.1 μg/L，很难检测到。本次研究结果表明，入院时观察组患儿的PCT水平为(15.74±4.28) ng/mL，显著高于对照组的(0.23±0.12) ng/mL(P<0.05)，恢复期时患儿的PCT水平为(0.31±0.12) ng/mL，显著低于治疗前(P<0.05)。可见PCT在感染急性期和治疗后的恢复期均有较明显的特性变化，可用于诊断细菌感染，监测病情转归[10]。

脐血中的T淋巴细胞群同样也是一种非常重要的参考指标。临床上常用T淋巴细胞亚群对相关的机体细胞免疫类疾病进行检测。对于该细胞亚群的检测方法常用的有免疫荧光法、SPA花环法等。对比新生儿体内的T淋巴细胞亚群变化值可以发现，当新生儿发生某些炎性疾病时，其体内的CD4淋巴细胞会减少，而CD8淋巴细胞则会增多，这样CD4/CD8的比值发生异常。不过需要注意的一点是在检测过程中，需要在前散射与侧散射中对于患儿体内的二维Dot-plot区域划分出专门的淋巴细胞区[11]。然后对该区域的淋巴细胞进行FITC荧光检测。本研究结果显示，新生儿败血症者外周血CD4、CD8较对照组降低，说明T细胞功能不完善，不能有效辅助免疫细胞，导致重症感染时患儿细胞免疫功能低下，与邱丽影等[12]研究结果一致，说明重症感染患儿细胞免疫功能受到抑制，同时细胞免疫功能低下亦是新生儿发生重症感染的重要原因之一。

脐血中的内毒素也是在对EONS进行诊断时的一种非常重要的指标，是革兰阴性菌中的一种成分，主要的构成成分是类脂质A。该类物质变化受到机体内炎症的影响非常突出。通过对我院ENOS新生儿患者的临床研究结果显示，观察组患儿的内毒素水平显著高于对照组(P<0.05)，恢复期时的水平显著低于治疗前(P<0.05)，与李正浩等[13]的研究结果一致。需要关注的是，内毒素的灵敏度与特异度不如PCT，但PCT只可反映是否受细菌感染，而内毒素能够进一步表明是否为革兰阴性菌感染，对抗生素的选取具有重要指导价值[14-16]。

综上所述，通过对我院ENOS新生儿患者进行临床研究，对于早发型新生儿败血症这种疾病有了进一步的认识。由于该病症具有较高的致死率，且目前在临床上并没有统一的诊断标准，所以临床上对于该疾病的确诊一直存在难度。标志物的选择是对ENOS进行准确诊断的关键因素。本次研究发现，早发型新生儿败血症患者脐血中的降钙素原、内毒素以及T淋巴细胞群的变化比较明显，可以作为诊断该疾病的重要参考指标，试验结果与国内外研究结果相吻合，所以可以在临床上将脐血中降钙素原、内毒素以及T淋巴细胞亚群的含量变化作为诊断早发型新生儿败血症疾病的重要参考指标。

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(本文编辑：张红)

Role in early-onset neonatal sepsis detection in cord blood

ZHONG Xiaomei，WU Cheng

(People′s Hospital of Ganzhou，Ganzhou 341000，China)

Objective：To explore the role of cord blood test in the diagnosis of early-onset neonatal sepsis.Methods：Eighty newborns with neonatal sepsis who were born in January 2014 to May 2015，who had been diagnosed within 72 h after the onset of blood culture，were selected as the observation group.Eighty newborns without signs of infection were selected as the control group.In the observation group，fasting venous blood was collected before and during the initial period of hospitalization，CD4，CD8，procalcitonin (PCT) and endotoxin were detected，and the above indexes were detected in the control group.Results：There were statistically significant differences in CD4，CD8，PCT and endotoxin between the two groups on admission (P<0.05).There were statistically significant differences in CD4，CD8，PCT and endotoxin between the two groups before treatment (P<0.05).The umbilical cord blood and venous blood of procalcitonin，endotoxin，tlymphocyte subsets were detected，cord blood procalcitonin，endotoxin，tlymphocyte subsets were significantly increased，especially calcitonin was the highest diagnostic value.Conclusion：Umbilical cord blood can be used as the earliest blood sample in neonatal，which shows great superiority in clinical application.The umbilical cord blood index such as procalcitonin，endotoxin and tlymphocyte subsets can be extremely improve diagnosis accuracy of neonatal sepsis by earth.

early-onset neonatal sepsis；cord blood test；clinical role

张振芳(1982— )，男，河北省廊坊市人，学士学位，主治医师。研究方向：脑血管疾病。

1671-8631(2017)02-0093-04

R722

B

2016-09-14

〔1〕本课题为江西省卫生计生委科技计划项目(项目编号：20167222)