血清CEA、SCCA、CYFRA21-1、NSE与血浆D-D联合检测对肺癌诊断的临床意义

许利芳 胡克



血清CEA、SCCA、CYFRA21-1、NSE与血浆D-D联合检测对肺癌诊断的临床意义

许利芳 胡克

目的 探讨癌胚抗原(CEA)、鳞状细胞癌抗原(SCCA)、细胞角蛋白19片段21-1(CYFRA21-1)、神经元特异性烯醇化酶(NSE)及D-二聚体(D-D)联合检测对肺癌诊断的临床意义。 方法 分别检测170例肺癌患者、44例肺部良性肿瘤患者及90例同期体检健康者血清CEA、SCCA、CYFRA21-1、NSE及血浆D-D含量并计算上述指标诊断肺癌的灵敏度与特异度。 结果 肺癌组血清CEA、SCCA、CYFRA21-1、NSE及血浆D-D水平均高于肺部良性肿瘤组及健康对照组(P均<0.05)；肺癌患者血清CEA、NSE及血浆D-D水平在Ⅲ/ Ⅳ期均明显高于Ⅰ/Ⅱ期(P<0.05)；腺癌中CEA灵敏度最高(68.4%，65/95), 小细胞肺癌中NSE灵敏度最高(71.4%，20/28)，鳞癌中CYFRA21-1灵敏度最高 (66.0%，31/47)；血清CEA、SCCA、CYFRA21-1、NSE及血浆D-D单项检测对肺癌诊断的灵敏度分别为50.6%、37.6%、51.8%、52.4%、62.4%，特异度分别为91.8%、85.1%、87.3%、82.1%、89.6%,5项联合检测的灵敏度上升至85.3%，但特异度下降至76.1%。结论 血清CEA、SCCA、CYFRA21-1、NSE与血浆D-D联合检测对肺癌辅助诊断有重要的临床意义，且优于单项检测。

肺癌；癌胚抗原；鳞状细胞癌抗原；细胞角蛋白19片段21-1 ；神经元特异性烯醇化酶；D-二聚体

肺癌是全球最常见恶性肿瘤之一，其发病率及死亡率居各类恶性肿瘤的首位[1]。早期肺癌患者常无特异的表现，但肺癌的恶性程度高、进展快，大部分肺癌患者被确诊时已是晚期，往往治疗效果欠佳。目前临床影像学检查特异性较低，无法鉴别肺部良性结节与早期肺癌，而获取细胞学及病理学证据往往需要有创检查，早期肺癌患者有创检查的阳性率低且反复取材很难实现。因此，寻找更加简单、有效的方法用于早期肺癌的诊断十分必要。随着分子生物学及免疫学研究进展，血清肿瘤标志物对肺癌的早期诊断、疗效、预后等方面应用广泛并且有重要的意义，但目前尚未发现一种特异的肿瘤标志物对不同病理类型的肺癌的诊断具有较高的敏感度及特异度。本研究通过检测血清CEA、SCCA、CYFRA21-1、NSE及血浆D-二聚体水平来探讨其对肺癌的诊断及鉴别诊断的意义。

资料与方法

一、资料

肺癌组：2013年1月至2016年2月在武汉大学人民医院胸外科、肿瘤科、呼吸内科住院并经细胞学或病理学确诊为肺癌患者170例，其中腺癌95例、小细胞肺癌28例、鳞癌47例；TNM分期：Ⅰ期36例、Ⅱ期23例、Ⅲ期44例、Ⅳ期67例；其中男性117例、女性53例，年龄32岁-83岁；采集标本时，所有患者均未行手术、放疗、化疗等治疗。良性肿瘤组：同期该院住院的良性肿瘤患者44例，均经病理学确诊，其中肺炎性假瘤13例、错构瘤20例、血管瘤11例；其中男30例，女14例，年龄29岁-82岁；正常对照组：同期该院的体检健康者90例， 其中男 59例、女31例； 年龄30岁-79岁。三组患者均排除自身免疫系统疾病、血液系统疾病及除肺癌外其他部位恶性肿瘤，一般资料差异无统计学意义，具有可比性。

二、标本采集与处理

所有调查对象空腹抽取静脉血4mL，3 000r/min 离心 10min，血清CEA、SCCA使用化学发光法检测(仪器型号为雅培ARCHITECT I2000全自动化学发光仪)，血清NSE、CYFRA21-1检测采用化学发光法(仪器采用德国罗氏公司Cobase 601全自动电化学发光仪)，血浆 D-二聚体检测采用免疫比浊法(仪器为日本Sysmex 公司型号为 CA7000的全自动凝血仪)，所有试剂均为仪器配套试剂盒，标本采集及仪器使用均严格按照说明书进行。根据实验室检测标准,以CEA>5ng/mL、SCCA>1.5ng/mL、CYFRA21-1>3.3ng/mL、NSE>16.3ng/mL、D-D>0.55mg/L判定为阳性，联合检测时若有1个及1个以上的指标阳性则判定为阳性，否则判定为阴性。

三、统计学方法

结 果

一、正态性检验

将各组血浆D-D、血清CEA、SCCA、CYFRA21-1、NSE值进行Kolmogrov-Smirnov检验，结果均呈非正态分布，故所有计量资料采用非参数检验。

二、三组患者血清CEA、SCCA、CYFRA2l-1、NSE及血浆

D-D 含量比较使用Kruskal-Wallis H 检验：肺癌组患者的血清CA125、CEA、SCCA、CYFRA21-1、NSE及血浆D-D水平均明显高于良性肿瘤组和健康对照组(P<0.05)，而良性肿瘤组与健康对照组血清CA125、CEA、SCCA、CYFRA21-1、NSE及血浆D-D水平差异均无统计学意义(PCEA=0.514， PSCCA=0.482，PCYFRA21-1=0.765， PNSE=0.450,PD-D=0.386)。(见表1)。

表1 肺癌组、肺良性肿瘤组、健康对照组血清CEA、SCCA、CYFRA2l-1、NSE及血浆 D-D测定结果比较M(P25，P75)

三、不同病理类型肺癌血清CA125、CEA、SCCA、CYFRA21-1、NSE及血浆 D-D 含量比较

使用Kruskal-Wallis H 检验，腺癌CEA水平显著高于鳞癌和小细胞肺癌(P<0.05),鳞癌与小细胞肺癌CEA水平差异无统计学意义(P=0.499)；鳞癌血清SCCA、CYFRA21-1含量高于小细胞肺癌及腺癌(P<0.05)，小细胞肺癌与腺癌比较差异均无统计学意义(PSCCA=0.124，PCYFRA21-1=0.098)；小细胞肺癌NSE水平高于鳞癌和腺癌，差异具有统计学意义(P<0.05)，鳞癌与腺癌NSE水平差异无统计学意义(P=0.471)；不同病理类型的肺癌血浆D-D差异无统计学意义(P=0.341)。(见表2)。

表2 不同病理类型肺癌血清CEA、SCC、CYFRA2l-1、NSE及血浆 D-D含量比较M(P25，P75)

四、不同TNM分期的肺癌患者血清CEA、SCCA、CYFRA2l-1、NSE及血浆 D-D 含量比较

采用Mann-WhitneyU检验，Ⅲ/Ⅳ期肺癌患者血清CEA、NSE及血浆D-二聚体水平均明显高于Ⅰ/Ⅱ期，差异均具有统计学意义(P<0.05)，而两组患者血清SCCA、CYFRA21-1水平差异均无统计学意义(PSCCA=0.094，PCYFRA21-1=0.338)。(见表3)。

五、血清CEA、SCCA、CYFRA2l-1、NSE及血浆D-D单项检测

对肺癌诊断的评估，血清CEA、SCCA、CYFRA2l-1、NSE及血浆D-D诊断肺癌的灵敏度分别为50.6%、37.6%、51.8%、52.4%、62.4%，特异度分别为91.8%、85.1%、87.3%、82.1%、89.6%。5个指标联合检测的灵敏度为85.3%，明显高于各指标单独检测，但联合检测特异度下降至76.1%。(见表4)。

六、不同病理类型肺癌各指标的灵敏度

CEA在腺癌中的灵敏度最高，分别68.4%， CYFRA21-1在鳞癌中敏感性最高,分别为66%， NSE在小细胞肺癌敏感性最高，为71.4%。(见表5)。

表3 不同TNM分期肺癌血清CEA、SCC、CYFRA2l-1、 NSE及血浆 D-D含量比较M(P25，P75)

表4 肺癌血清中单个项目及联合检测的灵敏度和特异度比较(%)

表5 不同病理类型肺癌中各参数的灵敏度比较(%)

讨 论

肺癌是全球最常见恶性肿瘤，全球每年因肺癌死亡的患者约为140万，占各种恶性肿瘤死亡总人数的18%[2]。早发现、早诊断、早治疗可明显提高肺癌患者的生存率，由于痰脱落细胞学检测的灵敏度很低，经皮肺穿刺活检和纤支镜取活检等有创检查对早期肺癌检出率较低，且难以反复操作，并可能出现各种并发症，部分患者难以接受，血清肿瘤标志物检测虽非肺癌的诊断标准，但由于其操作简便、安全，近年来已作为肺癌的辅助诊断方法在临床得到广泛应用。

本研究发现肺癌患者血清CEA、SCCA、CYFRA21-1、NSE及血浆D-D水平均明显高于肺部良性肿瘤及健康组(P<0.05)，表明上述指标对肺癌的诊断均有一定的意义。血清CEA、SCCA、CYFRA21-1、NSE及血浆D-D单项检测对肺癌诊断的灵敏度分别为50.6%、37.6%、51.8%、52.4%、62.4%，特异度分别为91.8%、85.1%、87.3%、82.1%、89.6%，5个指标联合检测可使灵敏度上升至85.3%，由于肺癌预后差，提高灵敏度较大程度降低肺癌的漏诊率，对肺癌辅助诊断具有重要意义。本研究结果显示Ⅲ/ Ⅳ期肺癌患者血清CEA、NSE及血浆D-D水平均明显高于Ⅰ/Ⅱ期，提示其血清水平随病情进展而升高，故可作为肺癌患者评估病情提供依据。

CEA是1965年Gold[3]等从结肠癌提取出来的一种酸性糖蛋白，它可以执行癌细胞间或者癌细胞与基质胶原之间的粘附反应，在肿瘤的生长及转移过程中起着十分关键的作用，是目前公认的肿瘤标志物之一。CEA在正常成人血清中含量极低,在胃肠道恶性肿瘤中高表达，特异性高，多用于胃肠道恶性肿瘤的诊断、疗效判断及转归，近年来对肺癌的辅助诊断价值也日益得到重视[4-5]。本研究发现腺癌血清CEA的含量及灵敏度(68.4%)最高，显著高于鳞癌和小细胞肺癌(P<0.05)，提示CEA对肺腺癌有较好的诊断价值，与之前研究[5-6]一致。SCCA是Kato等[7]1977年用单克隆技术从宫颈鳞状细胞癌患者宫颈标本中分离、提纯出的一个糖蛋白片段，其广泛存在于恶变的上皮细胞中，其中以鳞癌最为显著。本研究发现血清SCC-Ag在肺癌的灵敏度较低(37.6%)，但在鳞癌的灵敏度较高(53.3%)，高于小细胞肺癌及腺癌，提示其对鳞癌的特异性较高，与倪军[5]、陆国军[8]等人的报道类似。CYFRA21-1是细胞角蛋白家族成员之一，当肿瘤细胞溶解或死亡时大量的细胞角蛋白19可溶性片段进入血液循环，使其血清水平明显升高，其可作为非小细胞肺癌检测的首选标志物[9]，本研究显示肺鳞癌组CYFRA21-1在血清中表达水平及灵敏度明显高于腺癌和小细胞癌，进一步证实了CYFRA21-1对肺鳞癌有较高的诊断价值。NSE是糖酵解过程中的一种关键酶，在神经细胞、神经内分泌细胞及这些细胞所引发的肿瘤细胞中具有较高的浓度，而小细胞肺癌是一种常见的起源于神经内分泌细胞的肿瘤，已有多项研究[4、8、10-11]表明血清NSE可作为小细胞肺癌的诊断指标，且与对非小细胞肺癌的预后有重要意义。本研究也发现小细胞肺癌患者血清 NSE表达水平明显高于其他病理类型肺癌,其灵敏度高达71.4%， 并且Ⅲ/Ⅳ期的血清含量较Ⅰ/Ⅱ期明显升高，提示CEA与肺癌的侵犯程度相关。D-D是纤维蛋白经纤溶酶水解后产生的一种特异性交联纤维蛋白降解产物，是特异性反映体内高凝状态和继发性纤溶亢进的标志物之一,不仅与肺栓塞、慢性阻塞性肺疾病、肺炎等多种肺部疾病的关系密切，也有不少关于D-D与肝脏、血液、心脏及颅脑等方面的研究。近年研究发现D-D在恶性肿瘤的检测中的也具有广泛的用途，可能与癌细胞释放的二磷酸腺苷可产生引起血小板聚集的产物、肿瘤组织产生的大量组织因子直接激活外源性途径后纤维蛋白原升高及肿瘤侵袭血管壁对血管内壁造成机械性损伤等因素有关。活化的凝血系统物质可以促进肿瘤的生长、浸润及转移，多种恶性肿瘤如肝癌、乳腺癌、宫颈癌、结直肠癌及胃癌等患者血浆中D-D水平均有所升高。本研究所纳入的病例均排除了除肺癌外合并其他部位恶性肿瘤的患者，结果表明肺癌患者血浆D-D明显高于良性肿瘤及健康对照组，单项检测D-D敏感性较血清CEA、SCCA、CYFRA21-1、NSE高，但其在不同病理类型肺癌的含量差异无统计学意义，而且本研究还发现血浆D-D含量与肺癌TMN分期有关，Ⅲ/Ⅳ期肺癌含量明显高于Ⅰ/Ⅱ期，提示肺癌的凝血-纤溶系统功能亢进有利于肿瘤浸润及转移，与张金虹、李珺等[12-13]研究一致。

综上，血清CEA、SCCA、CYFRA21-1、NSE与血浆D-D检测对肺癌的筛查具有重要的参考价值，联合检测可提高诊断的敏感性及准确度，为肺癌患者的诊断提供依据，同时有助于判断分期及预后，值得在临床上推广。

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Value of the CEA, SCCA, CYFRA21-1, NSE and D-D combined detection in the diagnosis of lung cancer

XULi-fang,HUKe

DepartmentofRespiratory,People'sHospitalofWuhanUniversity,Wuhan,Hubei430060,China

Objective To evaluate the clinical value of combined detection of Carcino-embryonic antigen (CEA), squamous cell carcinoma antigen (SCCA), Cytokeratin 19 fragment 21-1 (CYFRA21-1), neuronspecific enolase (NSE) and D-dimer (D-D)in patients with lung cancer. Methods The levels of serum CEA, SCCA, CYFRA21-1, NSE, and plasma D-dimer in 170 lung cancer cases, 44 cases with benign lung benign tumor and 90 healthy controls were detected respectively. The sensitivity and specificity of those markers for the diagnosis of lung cancers were calculated. Results The lung cancer group showed higher serum CEA, SCCA, CYFRA21-1, NSE and plasma D-dimer levels than those in the benign lung tumor group and the healthy control group (Pboth<0.05). The levels of serum CEA, NSE and plasma D-dimer at stage Ⅲ/Ⅳ were higher than stageⅠ/Ⅱ(Pboth<0.05). The highest sensitivity markers for adenocarcinoma, SCLC and SCC were CEA (68.4%, 65/9), NSE (71.4%, 20/28) and CYFRA21-1 (66.0%, 31/47) respectively. The sensitivity of serum CEA, SCCA, CYFRA21-1, NSE, and plasma D-dimer in the diagnosis of lung cancer was 50.6%, 37.6%, 51.8%, 52.4% and 62.4% respectively, and the specificity was 91.8%, 85.1%, 87.3%, 82.1% and 89.6%. The combined sensitivity was 85.3%, but the specificity decreased to 76.1%. Conclusion The combined detection of serum CEA, SCCA, CYFRA21-1, NSE and plasma D-dimer plays an important role in the diagnosis of lung cancer and is better than single assay.

lung cancer; carcino-embryonic antigen; squamous cell carcinoma antigen; cytokeratin 19 fragment 21-1; neuronspecific enolase; D-dimer

10.3969/j.issn.1009-6663.2017.02.011

430060 湖北 武汉，武汉大学人民医院呼吸内科

胡克,E-mail：:huke-rmhospital@163.com

2016-06-02]