欧盟法和国家标准法对辣椒酱中苏丹红Ⅰ号含量检测的比较

□ 曾 婧 武汉工控检验检测有限公司

欧盟法和国家标准法对辣椒酱中苏丹红Ⅰ号含量检测的比较

□ 曾 婧 武汉工控检验检测有限公司

对比国家标准法和欧盟法的前处理、标准曲线、检出限和回收率，确定更简便高效的测试方法。结果表明欧盟法与国家标准法在技术指标上并无太大差异，但欧盟法前处理更为简便。

苏丹红Ⅰ号；欧盟法；国家标准法；高效液相色谱

苏丹红Ⅰ号是一种合成型偶氮染料，在一定条件下能分解产生致癌芳香胺。2004年我国质量检验检疫总局出台了国家标准检测法，但国家标准法样品处理过程复杂，欧盟法前处理简单。笔者以市场上购买的辣椒酱为待测样品，分别用国家标准法、欧盟法对苏丹红Ⅰ号进行检测，对比这两种方法的线性回归系数、加标回收率、检出限，发现欧盟法与国家标准法检测技术水平相当，但欧盟法前处理步骤相对简单，更高效。

1 仪器与试药

1.1 仪器

高效液相色谱仪（Waters e2695-DAD 2998）、梅特勒ME 204/02电子天平。

1.2 试药

苏丹红Ⅰ号标准品（含量98%）；乙腈、丙酮（色谱纯）；乙醚、正己烷（分

析纯）；水（超纯水）；辣椒酱（市场购买）。

2 方法与结果

2.1 色谱条件

色谱柱：C18 3.5 μm 4.6 mm×150 mm。流动相：溶剂A（0.1%甲酸水溶液:乙腈=85:15），溶剂B（0.1%甲酸乙腈溶液:丙酮=80:20），梯度洗脱。流速：1 mL/min。柱温：30 ℃。检测波长：478 nm。

2.2 溶液的制备

2.2.1 对照品储备液

称取苏丹红Ⅰ号10.0 mg（按实际含量折算），乙醚溶解后用正己烷定容至250 mL。

2.2.2 对照品工作曲线

吸取适量对照品储备液，用正己烷逐级稀释成浓度为0.16 μg/mL、0.32 μg/mL、0.64 μg/mL、1.28 μg/mL、2.56 μg/mL的工作曲线。

2.3 线性关系

分别取20 μL工作曲线注入高效液相色谱仪，记录色谱图，以峰面积A和质量浓度C进行线性回归，得欧盟法线性回归方程：A=4.339C+0.017 3，r=0.999 9。国家标准法线性回归方程：A=0.080 5C+0.001 3，r=0.999 2。 结果表明，欧盟法和国家标准法在苏丹红Ⅰ号浓度为0.16~2.56 μg/mL范围内线性关系均良好。

2.4 检出限

将标准溶液进行逐级稀释，依次取20 μL样液注入高效液相色谱仪，记录色谱图，记录信噪比为3时，待测样液的浓度。得欧盟法检出限为12.08 μg/kg，国家标准法检出限为19.38 μg/kg。

2.5 辣椒酱样品含量的测定

2.5.1 欧盟法

称取10 g样品于三角瓶，加入100 mL乙腈，涡旋5 min，超声振荡1 h，取适量上清液用0.45 μm有机滤膜过滤，取20 μL滤液注入高效液相色谱仪，记录色谱图，按外标法以峰面积计算含量，结果表明该批次辣椒酱中苏丹红Ⅰ号含量为未检出。

2.5.2 国家标准法

称取10 g样品于小烧杯，加入10 mL正己烷溶解后，慢慢加入氧化铝层析柱中，待样液完全淋出后，用30 mL正己烷清洗层析柱至流出液无色。用60 mL 5%的丙酮正己烷溶液进行洗脱，收集、浓缩后，用丙酮转移并定容至5 mL［1］，滤液用0.45 μm有机滤膜过滤，取20 μL滤液注入高效液相色谱仪，记录色谱图，按外标法以峰面积计算含量，结果表明该批次辣椒酱中苏丹红Ⅰ号含量为未检出。

2.6 加标回收率

2.6.1 欧盟法

称取该辣椒酱样品6份，按照0.64 μg/mL的加标量进行加标，按2.5.1操作进行处理，得6份样品的加标量分别为0.596 7、0.604 6 、0.6089、0.606 4、0.606 0、0.612 3 μg/mL；回收率分别为 93.20%、94.50%、95.10%、94.70%、94.70%、95.70%，平均值为94.66%。

2.6.2 国家标准法加标试验

称取该辣椒酱样品6份，按照0.64 μg/mL的加标量进行加标按2.5.2操作进行处理，得6份样品的加标量分别为0.573 9、0.583 2 、0.589 4 、0.596 9 、0.580 1、0.593 2 μg/mL；回收率分别为 89.70%、91.10%、93.30%、90.60%、90.60%、92.30%，平均值为91.27%。

3 讨论

此次实验中，两种方法的标准曲线线性系数均大于0.999；欧盟法的检出限为12.08 μg/kg，国家标准法的检出限约为19.38 μg/kg；两种方法的回收率均大于90%，技术水平上并无太大差异。

实验操作过程中，国家标准法需要进行复杂的中性氧化铝柱实验［2］，使用大量的试剂，耗时长，此过程虽能除去干扰物质，但造成了色素的大量损失［3］，影响样品中苏丹红Ⅰ号的检出；欧盟法仅使用乙腈，操作简单、时间短，最大程度节省了处理时间，相比较而言，欧盟法的分析成本相对低廉，且快速方便。

[1]国家标准化管理委员会.食品中苏丹红染料的检测方法（GB-19681-2005）[S].北京:国家标准出版社,2005.

[2]唐英章.现代食品安全检测技术[M].北京:科学出版社,2004.

[3]王凤池,孙汉文,吕红英.高效液相色谱法同时测定食品中苏丹红1号、2号、3号和4号[J].食品科技,2002(7).