化学

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王和兴，周颖，姜庆五

化学

超高效液相色谱-四极杆飞行时间串联质谱法同时分析奶粉中9种雌激素

王和兴，周颖，姜庆五

近几年来不断发生的奶粉安全事件致使奶粉的安全问题备受关注。雌激素作为内分泌干扰物之一，有研究表明儿童性早熟，男性前列腺癌，妇女乳腺癌和子宫癌发病率的上升与食品中雌激素的残留有关。我国农业部在2002年第193号公告里禁止性激素和具有雌激素样作用的物质在食品动物中的使用。但是在经济利益驱动下，违规滥用这类物质的情况仍然很多；同时有研究表明：奶牛在养殖过程中，可能会引起牛奶中内源性雌激素的升高。因此，为保障食品的安全，内源性和外源性雌激素的同时检测就显得很重要。食品中雌激素常用的检测方法是气相色谱-质谱联用法（GC-MS）和液相色谱-质谱联用法（LC-MS）。GC-MS 虽然分离效果好，但是雌激素挥发性低，需要衍生化，操作繁琐。LC-MS因为灵敏度高，选择性好，样品前处理相对简单而成为雌激素检测的主要方法。超高效液相色谱（UPLC）相对普通LC分离效果好，分析速度快，非常适合于多组分快速检测。飞行时间质谱（TOF-MS）能够进行分子量的精确测定，适合复杂基质中组分的准确定性，因此UPLC-TOF-MS成为复杂基质中多组分残留的有效分析方法。本研究通过对样品提取条件、除脂净化条件以及色谱和质谱条件进行优化，建立了奶粉中9种雌激素（雌三醇、β-雌二醇、α-雌二醇、马烯雌甾酮、17α-乙炔雌二醇、雌酮、己烯雌酚、己二烯雌酚、己烷雌酚）的超高效液相色谱-四极杆飞行时间串联质谱（UPLC-QTOF-MS）分析方法。样品用水溶解，乙腈超声提取雌激素，NaCl快速分层，上清液用正己烷除脂，NH2柱净化，经Waters ACQUITY UPLC HSS T3色谱柱（100mm×2.1mm×1.8μm）分离，采用电喷雾离子源（ESI）负离子模式，对9种雌激素进行 Q-TOF分析。保留时间和分子离子与子离子的精确分子量测定共同定性，9种雌激素的分子离子测定质量数与理论值误差在－1.0～0.9 mDa之间，而子离子测定质量数与理论质量数之间的误差仅为－0.9～0.5 mDa。基质匹配内标标准曲线法定量，内标物为β-雌二醇-d3。方法：分析时间为13min，线性范围为0.001～0.5 mg/L；检出限（S/N＝3）为0.11～0.30 μg/kg，定量限（S/N＝10）为 0.37～1.0 μg/kg。在添加水平分别为1，2，10和100 μg/kg时，平均回收率为 61%～137%，RSD为1.0%～22.6%。采用本方法对市售的7种奶粉进行检测，均未检出上述9种雌激素。本方法实现了奶粉中9种雌激素的快速提取和基线分离，质谱母离子和特征子离子的精确质量数测定，增强了本方法在复杂基质中雌激素的定性能力，结合基质匹配内标法准确定量，能够满足奶粉样品中雌激素多残留快速分析的要求。

来源出版物：分析化学,2011,39(9):1323-1328

入选年份：2015

快速高效液相色谱-串联质谱法同时测定水产品中5类33种药物残留

罗辉泰，黄晓兰，吴惠勤，等

摘要：目的：近年来，抗生素（如四环素类、喹诺酮类、磺胺类、磺胺增效剂等）及三苯甲烷类染料常被作为抗菌药物用于水产寄生虫病的防治或作为消毒剂用于延长鲜活水产品寿命，这些药物残留在水产品中并通过食物链在人体内蓄积，将对人体健康造成严重威胁。因此，建立一种水产品中药物多残留同时快速测定的方法显得非常迫切。方法：5g匀质试样置50 mL聚四氟乙烯离心管中，加入100 μL浓度为50 μg/L的内标溶液，加入2 mL 0.1 mol/L Na2EDTA-Mcllvaine缓冲溶液，混匀，再加入10 mL乙腈，涡旋混匀2min后，超声提取10min，4000 r/min离心10min，上清液转移至100 mL烧杯；向残渣加入4g酸性氧化铝，充分搅匀，加入10 mL乙腈，合并上清液，于45℃水浴氮吹浓缩至约2 mL，浓缩液转移至1.0 mL刻度的梨形瓶中，用乙腈洗涤烧杯多次，洗涤液合并入梨形瓶中，继续浓缩至1.0 mL。加入1.0 mL 50%（体积比）乙腈水溶液，混匀，正己烷除脂，下层清液经RRLC分离，在电喷雾离子源的正离子模式下以动态多反应监测（DMRM）模式对33种待测物进行定性定量分析。结果：（1）质谱分析：所有待测物均在 ESI正离子模式下获得[M＋H]＋母离子，每个化合物均有两个特征碎片离子作为定性定量子离子。采用DMRM方式采集数据，仪器可根据每个化合物的保留时间动态分配采集时间，仅对保留时间窗口内的目标化合物进行检测，极大提高了采集效率。（2）色谱分析：以Hypersil BDS C8柱（100mm×2.1mm，2.4μm）为分析柱，在流动相A为0.4%（体积比）甲酸+10mmol/L乙酸铵的水溶液，流动相 B为含 0.4%（体积比）甲酸的乙腈条件下，所有待测物均获得了良好峰形及分离。（3）样品预处理：采用 Na2EDTA-Mcllvaine缓冲溶液-乙腈作为提取溶剂，不但改善了四环素类药物的回收率，还沉淀了大多数蛋白质，实现同时提取与净化，有效缩短样品处理时间。（4）方法验证：33种药物在相应的浓度范围内线性良好，相关系数均大于0.99，在三个不同浓度添加水平下，平均回收率为63.6%～115.2%，相对标准偏差（RSD）为4.6%～14.6%，检出限（LOD，S/N≥3）和定量限（LOQ，S/N≥10）分别为 0.1～2.0 μg/kg及0.5～5.0 μg/kg。（5）实际样品测定：采用本法对鲩鱼、鳙鱼、鳗鱼、淡水蟹及东风螺共5种水产品进行检测，其中有3个鳗鱼样品检出隐色孔雀石绿（含量在2.2～3.1 μg/kg之间）及恩诺沙星（含量在3.3～13.3 μg/kg之间）外，其余样品均未检出33种药物残留。结论：本研究建立的可同时提取并测定水产品中四环素类、喹诺酮类、磺胺类、磺胺增效剂和三苯甲烷类共 5类33种药物残留的 RRLC-MS/MS法具有简便快速、灵敏可靠等优点。样品实测结果表明，该法非常适用于水产品中药物多残留的同时快速定性定量测定。

来源出版物：分析化学,2012, 40(2):273-279

入选年份：2015