探索鱼腥草注射液中的过敏原成分及其致敏机理

包敏 陈阳桔

探索鱼腥草注射液中的过敏原成分及其致敏机理

包敏 陈阳桔

目的 分析鱼腥草注射液中的过敏原成分及其致敏原理。方法 选择阳性对照物、阴性对照物、吐温80、鱼腥草蒸馏液、鱼腥草注射液分别对BN大鼠和豚鼠实施全身主动过敏试验，同时选择吐温80首次静脉注射对BN大鼠和豚鼠实施类过敏试验。结果 激发给药后，吐温80组、鱼腥草注射液A组、鱼腥草注射液B组、阳性对照组动物的过敏反应发生率高达100.0%，鱼腥草蒸馏液组动物的过敏反应则为50.0%，差异具备统计学意义（P＜0.05）。结论鱼腥草注射液中的过敏原主要为吐温80，可能导致BN大鼠和豚鼠出现全身主动过敏反应。

鱼腥草注射液；过敏原成分；致敏原理

随着现代医学技术的快速发展，中药注射液在临床中的应用也越来越广泛，其所导致的不良反应报道也在不断增加，人们也开始更加关注和重视中药注射液的用药安全性[1]。鱼腥草注射液的不良反应主要为过敏性休克、皮疹、高热、呼吸困难以及猝死等，国家食品药品监督管理局于2006年决定在全国范围内暂停出售具有鱼腥草素钠或鱼腥草的注射液[2]。临床研究发现，吐温80可能是鱼腥草注射液的主要过敏原[3]。本研究主要分析了鱼腥草注射液中的过敏原成分及其致敏原理，现做如下总结。

1 资料与方法

1.1 仪器材料

选择酶标仪、低速离心机、生化培养箱、高压灭菌锅、超低温冰箱以及药品冷藏柜。鱼腥草蒸馏液、鱼腥草注射液A（商用鱼腥草注射液）、鱼腥草注射液B（根据药典，与含5 g/L吐温80的鱼腥草蒸馏液配伍所得）、阴性对照生理盐水、阳性药物卵白蛋白、检测豚鼠血清中IL-4、IgM、IgE、IgG和组胺的ELISA试剂盒、检测BN大鼠血清中IL-4、IgM、IgE、IgG和组胺的ELISA试剂。

选择长春国家生物产业基底科技发展有限公司的40只雄性白化豚鼠；选择上海西普尔必凯实验动物有限公司的49只雄性BN大鼠。

1.2 方法

（1）饲养及分组：选择全价营养颗粒饲料和定期检测的过滤水来喂养动物，并对喂养的湿度、温度和照明条件进行严格控制，试验期间动物应自由饮水和进食。根据体质量均衡原则将40只豚鼠分为6组，分别为阳性对照组、阴性对照组、吐温80组、鱼腥草蒸馏液组、鱼腥草注射液A组、鱼腥草注射液B组，每组6只，剩余4只为类过敏反应组。根据体质量均衡原则将49只BN大鼠分为7组，分别为阳性对照组、阴性对照组、吐温80组、鱼腥草蒸馏液组、鱼腥草注射液A组、鱼腥草注射液B组、类过敏反应组，每组均为7只。

（2）致敏试验：按照临床最高给药剂量来换算BN大鼠和豚鼠的致敏剂量；给药途径选择腹腔注射，隔天给药1次，共给药4次。

（3）激发试验：致敏剂量的2倍即为激发试验的给药剂量。BN大鼠选择尾静脉注射，豚鼠则选择后肢隐静脉注射；于末次致敏后10～12天给药。类过敏试验组的首次给药静脉注射吐温80；激发给药后，应将豚鼠和BN大鼠放置在观察笼中，对其行为变化情况进行观察。根据相关评分标准来进行判断[4]。

（4）制备血清：观察行为学后，给予乙醚麻醉，采集腹主动脉血。在冰上静置半小时，进行20分钟离心，速率为每分钟3 000 r，血清分离后进行分装，保存在超低温冰箱中以备用。根据ELISA试剂盒方法来对BN大鼠和豚鼠的血清生化指标进行检测。

1.3 统计学方法

将数据纳入SPSS 19.0统计软件中进行分析，计数资料比较采用χ2检验，以（%）表示，若P＜0.05，则差异有统计学意义。

2 结果

豚鼠行为学变化情况：激发给药后，吐温80组、鱼腥草注射液A组、鱼腥草注射液B组、阳性对照组动物的过敏反应发生率高达100.0%，鱼腥草蒸馏液组动物的过敏反应则为50.0%；过敏反应的临床表现主要为呼吸急促、喷嚏、挠鼻、不安宁、立毛以及休克等，差异具有统计学意义（χ2=66.667，P=0.000）。

3 讨论

本研究中，鱼腥草注射液A、鱼腥草注射液B、鱼腥草蒸馏液以及吐温80均可能导致一定程度的行为学反应；豚鼠血清中，鱼腥草注射液A、鱼腥草注射液B、鱼腥草蒸馏液以及吐温80组的IL-4、IgE含量均显著上升，提升到IL-4值56.69 μg/ml，IgE值2.36 U/L；BN大鼠血清中，鱼腥草注射液A、鱼腥草注射液B、吐温80组的IL-4、IgE含量均显著上升，提升到IL-4值68.57 μg/ml，IgE值2.45 U/L；；鱼腥草蒸馏液组的IgE、吐温80组的IgM含量均显著上升，提升到IgE值3.05 U/L，IgM值2.87 U/L。

鱼腥草注射液和吐温80挥发油是一种小分子物质，无免疫原性，单独存在不会导致免疫应答，药物在进入机体后则能形成半抗原载体复合物，让机体出现特异性IgE抗体，并在嗜碱粒细胞和肥大细胞表面附着，导致机体致敏[5-8]。

总之，鱼腥草注射液中的过敏原主要为吐温80，可能导致BN大鼠和豚鼠出现全身主动过敏反应，但不会导致类过敏反应。鱼腥草蒸馏液中可能存在其他导致过敏反应的过敏原。

[1] 吴江英，胡晓丽，李军胜. 鱼腥草注射液致过敏性休克1例[J].中国实用医药，2013，8（9）：168.

[2] 李曼，赵志恒，王忠，等. 鱼腥草注射液安全性的计量学评价[J].中国药物警戒，2012，9（2）：85-88.

[3] 郑丰渠. 鱼腥草注射液致豚鼠全身主动性过敏反应的实验研究[J].中医学报，2012，27（7）：841-843.

[4] 毛宏梅，韩超，崔璐，等. 4种不同类型药物的豚鼠全身主动过敏试验研究[J]. 军事医学，2016，40（5）：405-408.

[5] 易艳，李春英，张宇实，等. 3种中药注射剂类过敏反应评价及其机制探讨[J]. 中国中药杂志，2015，40（14）：2711-2716.

[6] 贾芳芳，沈姣，岳鹏，等. 抗癌药物全身主动过敏试验剂量设计探讨[J]. 医药前沿，2012，2（17）：78-79.

[7] 李晓昕，朱磊，吴宏坚. 注射用盐酸吉西他滨处方工艺研究[J].药学研究，2013，32（3）：159-161.

[8] 王春玲，李孝壁，朱凤姝，等. 注射用盐酸吉西他滨无菌方法验证[J]. 中国医药科学，2013，3（4）：55-56.

Investigate the Allergen Components and Its Sensitization Mechanism in Houttuynia Cordata Injection

BAO Min CHEN Yangju Zhuzhou Institute of Food and Drug Control, Zhuzhou Hu’nan 412000, China

Objective To analyze the allergens and the principle of sensitization in houttuynia cordata injection. Methods Selected the positive control, the negative control, polysorbate 80, houttuynia cordata extract, houttuynia cordata injection, respectively, BN rats and guinea pigs to carry out systemic active allergy test. Meanwhile, polysorbate 80 was given to the first intravenous injection of anaphylactoid test on BN rats and guinea pigs. Results Stimulate allergic reaction after administration, twain 80 group, A group, herba houttuyniae injection of houttuynia cordata injection B group, positive control group animal rate as high as 100%, allergic reaction of houttuynia cordata distillate group animal was 50%, the difference has statistical significance(P < 0.05). Conclusion The main allergen in Houttuynia cordata injection was polysorbate 80, which might cause systemic active anaphylaxis in BN rats and guinea pigs.

houttuynia cordata injection; allergen components; sensitization principle

R285.5

A

1674-9316（2017）12-0126-02

10.3969/j.issn.1674-9316.2017.12.074

株洲市食品药品检验所，湖南 株洲412000