马链球菌兽疫亚种和阴沟肠杆菌混合感染的诊治

艾山·麦麦提力 ，肖开提·阿不都克里木

(新疆维吾尔自治区动物卫生监督所，新疆乌鲁木齐830011)

马链球菌兽疫亚种和阴沟肠杆菌混合感染的诊治

艾山·麦麦提力 ，肖开提·阿不都克里木

(新疆维吾尔自治区动物卫生监督所，新疆乌鲁木齐830011)

马链球菌兽疫亚种属于兰氏分群的C群链球菌马链球菌的一个亚种。阴沟肠杆菌是肠杆菌属细菌的代表种[1]。在我国上述两种病的混合感染报道病例较少。

1 发病情况、临床症状及剖检变化

2015年2月末，新疆和丰县一牧民的20多匹马在收割后的玉米地采食，牧民发现有马匹卧地不起，在其后2 d内有5匹马以同样的症状相继死亡，主要表现为突然减食或停食，精神委顿，体温41 ℃～42 ℃，呼吸困难，结膜发绀，卧地不起，口、鼻流出淡红色泡沫样液体，多在6～24 h内死亡；急性病例表现为精神沉郁，体温43 ℃，食欲废绝，眼结膜潮红，流泪，呼吸、脉搏增数、(心跳加快)，继发稽留热，流浆液状鼻液，间有咳嗽，无毛皮肤呈紫红色，有出血点，短时间内死亡。发病率、死亡率为100%。剖检变化为出血性败血症。血液凝固不良，全身淋巴结肿大、出血，黏膜、浆膜、皮下均有出血斑点。心包、胸腔、腹腔积液、浑浊，心肌炎。脾脏肿大，呈黑紫色，易脆裂。肾肿大、出血。肝肿大出血性坏死。

2 诊断方法

2.1 组织涂片镜检 取无菌采集的病死马匹心血、肝、肺、脾及肠系膜淋巴结等病料，制作触片、涂片，干燥、火焰固定后进行革兰染色镜检。

2.2 细菌分离培养 按常规细菌分离方法操作，获2株不同的菌株。

2.3 动物试验 设3组小鼠试验组(小鼠由新疆医科大学医学实验动物中心提供)，每两只为1组，其中两组分别经腹腔注射上述培养获得的两株纯培养物，每只注射0.2 mL，另设健康对照组观察。观察其死亡和发病情况。

2.4 生化鉴定试验 取造成小鼠的一株菌将接种于细菌自动鉴定Rapid ID32STREP鉴定试条上37 ℃培养24 h，另一株菌接种于细菌自动鉴定ID32E鉴定试条上37 ℃培养24 h。2.5 药敏试验 取造成小鼠死亡的株菌，分别根据细菌自动鉴定ATB ANTIBIOCRAM 抗生素敏感试验试剂条要求进行接种培养。

3 结果

3.1 在肝、脾，等实质脏器 可见呈长链串珠状排列、无芽孢、有荚膜、革兰阳性球菌，另在小肠可见一些无荚膜、无芽孢两端钝圆革兰阴性短杆菌。

3.2 增菌厌气肝汤和肉汤基培养物 进行革兰染色后镜检，可在厌气肝汤培养物中见到组织涂片当中见到的革兰阳性球菌，在肉汤培养物涂片可见革兰阳性球菌和革兰阴性短杆菌。在鲜血培养基上产生β型溶血环，在营养培养基上呈灰白色、圆形、边缘整齐、透明、中央隆起的水滴状，麦康凯培养基生长贫瘠的菌落为革兰阳性球菌，该菌兼性厌氧。在鲜血培养基上和营养培养基上呈灰白色、圆形、边缘整齐、半透明、湿润、闪光且不溶血，在麦康凯培养基上呈红色的菌落为革兰阴性短杆菌。

3.3 动物试验结果 注射革兰阳性球菌和阴性杆菌的4只实验小鼠在12 h内死亡，无菌剖检，染色、镜检可见与注射菌相同的菌株。而对照组没有发生异常情况。

3.4 生化试验结果 ID32E鉴定试条经37 ℃培养24 h后ATI鉴定系统自动读取结果为阴沟肠杆菌。Rapid ID32STREP鉴定试条上37 ℃培养24 h后ATI鉴定系统自动读取结果为马链球菌兽疫亚种。且符合阴沟肠杆菌和马链球菌兽疫亚种常规生化反应特性，说明分离的致病菌为阴沟肠杆菌和马链球菌兽疫亚种。

3.5 药敏试验 ATB ANTIBIOCRAM 抗生素敏感试验试剂条37 ℃培养24 h后，鉴定系统自动读取结果为哌拉西林、阿奇霉素、诺佛沙星、头孢噻朌。

4 分析与讨论

根据分离到的两个菌株的形态染色特征、培养、生化特性及动物试验，结合临床症状、剖检变化，诊断为马链球菌兽疫亚种和阴沟杆菌混合感染。

4.1 阴沟肠杆菌广泛存在于自然界中，在人和动物粪便、水、泥土、植物等均可检出。当机体存在其他疫病和免疫功能低下时，其引起的细菌感染性疾病，常累及多个器官系统，包括皮肤软组织感染、泌尿道感染、呼吸道感染以及败血症等，由于阴沟肠杆菌能产生超广谱β-内酰胺酶和Amp C酶耐药情况严重，给临床治疗带来了新的挑战[3～4]。

4.2 马链球菌兽疫亚种旧称兽疫链球菌，常存在于皮肤、呼吸道、扁桃体及生殖道，可致各种家畜的炎症和败血症。其中以马最易感，引起子宫炎，流产或不孕症。致病性链球菌能产生多种与致病力相关的毒素与酶[3～5]。

4.3 现代农业使用的大量化肥，农药，除草剂等化学合成物，随春季冰雪逐渐消融，这些化学合成物的残留物融化于雪水中，家畜饮用这些雪水或饲食农作物秸秆，开始慢性中毒，致肝损伤，引起体质减弱，免疫功能降低，容易引起传染病感染，因此每年春季都有不少家畜死亡或流产的报道。

4.4 治疗 对还没有发病的所有同群马匹紧急注射头孢噻呋钠；对已发病马匹注射哌拉西林；没有出现新的病例，病马经3 d治疗后康复。

[1] 费恩阁，动物传染病学[M].长春：吉林科学技术出版社，1995：8.

[2] 白文彬，于康震. 动物传染病诊断学[M]. 北京：中国农业出版社，2002：12.

[3] 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所.兽医微生物学[M].2版.北京：中国农业出版社，2013：12．

[4] 王世若．兽医微生物学及免疫学[M]．长春：吉林科学技术出版社，1990：8．

[5] 杨本升，刘玉斌，苟仕金，等．动物微生物学[M].长春：吉林科学技术出版社，1995：5．

2016-03-01

艾山·麦麦提力(1988-)，男(维吾尔族)，兽医师，本科，主要从事家畜传染病的防疫与诊断检测工作，E-mail:419374380@qq.com

肖开提·阿不都克里木，E-mail：xkt301@sohu.com

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0529-6005(2017)04-0057-02