血清抗衰老因子Klotho水平与冠状动脉粥样硬化发生的关系*

黄 强 ，张 勇，刘富强

1.陕西省人民医院心内一科(西安710068)，2.西安市高陵区医院内三科(西安710200)



·临床研究·

血清抗衰老因子Klotho水平与冠状动脉粥样硬化发生的关系*

黄 强1,2，张 勇1，刘富强1

1.陕西省人民医院心内一科(西安710068)，2.西安市高陵区医院内三科(西安710200)

目的：观察冠心病患者与正常人群血清Klotho蛋白水平，探讨Klotho在冠状动脉粥样硬化过程中的作用。方法：对行冠状动脉造影确诊冠心病患者30例及冠状动脉正常30例采用SYNTAX评分评估冠脉情况，采用酶联免疫吸附方法(ELISA方法)测定血清Klotho的含量。结果：冠心病组血清Klotho水平明显降低[(48.7±6.6)pg/ml与(24.9±6.2)pg/ml,P<0.05]；进一步相关分析表明：血清Klotho水平与冠脉SYNTAX评分发现具有统计学意义的相关性(r=0.59，P=0.038)。结论：冠心病患者血清Klotho水平明显降低，有可能在将来成为冠心病早期识别更加方便、快捷的标记物。

冠心病是危险人类健康的重大疾病之一，Klotho基因在小鼠中表达缺陷时会引起一系列类Klotho基因缺陷的小鼠可以表现出早衰，如动脉粥样硬化、骨质疏松及痴呆等。本研究通过观察冠心病患者Klotho水平，探讨Klotho与冠状动脉粥样硬化的关系。

资料与方法

1 一般资料 2014年1-12月陕西省人民医院内一科就诊的冠心病患者30例，按照年龄匹配原则选择对照组30例。纳入标准：①年龄18～65岁；②初次就诊行冠脉造影术明确冠脉病变，冠心病组冠脉主支血管大于50%以上狭窄，对照组未见明显冠脉病变者；③无服用心血管药物史；④同意参加本研究并签署知情同意书。

2 研究方法

2.1 临床调查：调查所有患者冠心病相关的危险因素，包括性别、年龄、吸烟、饮酒、高血压、糖尿病及家族史等，完善血脂、肝肾功能、C-反应蛋白、心电图、心脏彩超、颈动脉超声等检查。

2.2 冠脉造影结果评分：对受试者进行冠脉造影，冠脉病变采用SYNTAX评分进行评估，一处病变的SYNTAX积分等于冠脉节段的权重因子与该处病变狭窄程度的倍增因子的乘积，再加上病变不良特点的附加因子。所有病变的总分值相加之和即为该患者的SYNTAX的评分。所有评估方法由两名经验丰富的医生协商进行。

2.3 血清Klotho测定：采血标本前一天20:00后禁食，清晨空腹抽取血标本，血清Klotho水平采用酶联免疫吸附法测定，具体操作按试剂盒说明书。试剂盒及检测方法的各项指标、室内质量控制指标和其他质控参数均在允许范围内。Klotho试剂盒购自美国Eversystems biology laboratory inc。

结 果

1 两组基线资料比较 见表1。30例冠心病患者与30例对照组均完成试验，两组除SYNTAX评分有统计学差异(P<0.01)外，其余各项均无统计学差异(P>0.05)。

表1 两组受试者基线资料比较

2 两组血浆超敏C反应蛋白比较 冠心病受试者血压较正常组血浆超敏C反应蛋白水平明显高[(6.12±1.8)mg/L与(2.3±1.2)mg/L]， 两组差异有统计学意义(P<0.05)。

3 两组血清Klotho蛋白水平比较 见图1。与对照组相比，冠心病组血清Klotho水平明显降低[(48.7±6.6)pg/ml与(24.9±6.2)pg/ml,P<0.05]。

图1 两组血清Klotho蛋白水平比较

4 血清Klotho蛋白水平与冠脉病变评分关系 进一步相关分析表明：血清Klotho水平与冠脉SYNTAX评分发现具有统计学意义的相关性(r=0.59，P=0.038)。

讨 论

Klotho基因是一种与衰老疾病密切相关的基因，由5个外显子、4个内含子组成，定位于染色体的13q12，Klotho蛋白主要在肾脏和脑组织表达，分为膜结合型和分泌型两种,它们分别是膜结合受体和体液调节因子,能通过如调节维生素D和钙、内皮功能、氧化应激、能量代谢等途径,对衰老过程进行调节。近年相关研究发现Klotho基因敲除小鼠出现血压升高、动脉硬化、血管钙化等心血管系统衰老的表现[1-2]。

内皮功能损伤是冠状动脉硬化形成的重要环节，Klotho基因缺陷小鼠在出生4周即可出现动脉硬化，表现为动脉严重钙化,肌性中动脉中层钙化、内膜增厚等，同时依赖乙酰胆碱的动脉舒张功能明显下降，进一步研究发现Klotho蛋白及其代谢产物可以通过抑制胰岛素/胰岛素样生长因子-1信号通路，增强机体抗氧化应激能力，并能促进内皮源性NO合成[3]。Klotho基因与冠心病之间的关系在人群中也得到多方面的印证。Imamura 等研究发现，发生日本人群患者中Klotho基因G-395A携带者的冠心病发病率明显高于健康人群[4]。近年来有研究显示人群血清Klotho水平与心血管疾病发生率呈负相关，血清Klotho水平低人群患心血管疾病风险明显升高。Lim 等[5]发现Klotho 及FGF受体在人动脉血管上表达，提示Klotho蛋白可能与小鼠动物模型相似在人体内皮细胞功能调节方面发挥作用。刘威等[6]研究发现急性心肌梗死患者血清klotho表达水平显著降低。Navarro-González等发现低Klotho水平与冠脉病变程度有关[7]，更进一步有学者提出低Klotho可能是动脉硬化的一种预测因子[8]。本研究发现，冠心病患者血清Klotho水平明显低于冠脉正常人群，与前述研究结果一致，同时发现Klotho水平与冠脉病变程度成负相关，提示Klotho有可能成为冠心病早期识别的生化指标。

总之，本研究发现冠心病患者血清Klotho水平明显降低，其可能通过减少血管内皮NO合成进而导致冠状动脉粥样硬化的形成，同时Klotho有可能在将来成为冠心病早期识别更加方便、快捷的标记物。

[1] Donate-Correa J, Martín-NúEz E, Mora-Fernández C,etal. Klotho in cardiovascular disease:Current and future perspectives[J]. World Journal of Biological Chemistry, 2015, 6(4): 351-357.

[2] Moe SM. Klotho: a master regulator of cardiovascular disease [J]. Circulation, 2012, 125(125):2181-3.

[3] 林雅军,胡 刚,魏 洁.Klotho蛋白与血管内皮关系研究进展[J].中国老年学杂志, 2015，35(17)：5035-5037.

[4] Imamura A, Okumura K, Ogawa Y,etal. Klotho gene polymorphism may be a genetic risk factor for atherosclerotic coronary artery disease but not for vasospastic angina in Japanese[J]. Clinica Chimica Acta, 2006, 371(1-2)：66-70.

[5] Lim K, Lu TS, Molostvov G,etal. Vascular klotho deficiency potentiates the development of human artery calcification and mediates resistance to fibroblast growth factor 23[J]. Circulation，2012，125:2243-2255.

[6] 刘 威,康 林,曹贵方.血清抗衰老因子Klotho水平与急性心肌梗死发生的关系[J]. 中国介入心脏病学杂志，2013，21(3)：146-148.

[7] Navarro-González JF,Javier DC,Mercedes MDF,etal.Reduced Klotho is associated with the presence and severity of coronary artery disease[J]. Heart, 2014,100(1):34-40.

[8] Keles N,Caliskan M,Dogan B,etal.Low serum level of Klotho is an early predictor of atherosclerosis[J].Tohoku Journal of Experimental Medicine, 2015,237(1):17-23.

(收稿：2016-07-15)

Relation of serum Klotho level and coronary atherosclerosis

Huang Qiang,Zhang Yong,Liu Fuqiang.

First Department of Cardiology,Shaanxi Provincial People’s Hospital (Xi’an 710068)

Objective：To investigate serum Klotho level and coronary atherosclerosis. Methods： Thirty patients with coronary heart disease and normal coronary artery were screened for coronary angiography. The SYNTAX score was used to evaluate the coronary artery. The concentration of serum Klotho was measured by an immunoenzyme method (ELISA). Results： Serum Klotho levels in patients with coronary heart disease was significantly lower than that of the normal control group[ (48.7±6.6)pg/ml vs(24.9±6.2)pg/ml,P<0.05]; Furthermore, significant correlation was found between Klotho level and SYNTAX score (r=0.59，P=0.038). Conclusion： The Klotho level decreases significantly in coronary heart disease patients, which may be a more convenient marker of early recognition of coronary heart disease in the future.

Coronary arteriosclerosis/etiology Coronary arteriosclerosis /diagnosis Coronary angiography @ Klotho

*国家自然科学基金青年基金资助项目(81200512)

冠状动脉硬化/病因学 冠状动脉硬化/诊断 冠状血管造影术 @Klotho

R541.4

A

10.3969/j.issn.1000-7377.2017.01.005