温度、抗凝剂对1例PTCP患者血小板检测结果的影响

张 敏

（吉林省白城中心医院检验科，吉林 白城 137000）

温度、抗凝剂对1例PTCP患者血小板检测结果的影响

张 敏

（吉林省白城中心医院检验科，吉林 白城 137000）

目的观察温度、抗凝剂对EDTA依赖性假性血小板减少症（PTCP）患者血小板检测结果的影响。方法将EDTA抗凝血放置不同温度下和枸橼酸钠抗凝血用全自动血细胞分析仪，按不同时间检测血小板，同时涂片瑞-吉氏染色镜检，观察血小板聚集情况。结果采血30 min后，血小板计数结果均降低，涂片可见血小板聚集。结论当遇到PTCP患者时，采血后保温，立即送检测定，同时加强血常规检测的显微镜复检工作。

血小板；抗凝剂；EDTA；EDTA依赖性假性血小板减少症

国际血液学标准化委员会（ICSH）推荐使用EDTA盐做为血常规检测的抗凝剂，其对血细胞形态影响较小，适用于血小板计数，现已被广大临床实验室选用。但EDTA又可诱导血小板黏附聚集，引起EDTA依赖性假性血小板减少症（EDTA-dependent pseudothrombocytopenia，PTCP）。

1 资料与方法

1.1 病例资料：患者女性，72岁，因突然头昏、头晕后意识不清入院，行CT检查后，诊断为右侧丘脑出血后破入脑室。初次在急诊检验血常规：WBC 22.0×109/L、RBC 4.38×109/L、HGB 134 g/L、PLT 230×109/L。入院第2天复查血常规：WBC 23.0×109/L、RBC 4.04× 1012/L、HGB 122 g/L、PLT 94×109/L。患者临床无明显出血倾向，无皮肤紫癜，无肝、脾、淋巴结肿大，凝血功能、尿常规、肝、肾功能、肝炎标志物、艾滋病、风湿三项、抗核抗体、甲功七项检查均正常。由于血小板结果波动较大，与临床不符，临床要求重新采血复查。护士采血后立即送检，检验科接收标本后5 min检测，结果为WBC 22.5×109/L、RBC 4.28×1012/L、HGB 130 g/L、PLT 227×109/L。1 h后将前后两管标本涂片、瑞-吉氏染色后，油镜镜检，均见大片聚集的血小板，考虑该患可能为PTCP。

1.2 方法：次日，嘱经验丰富的高年资护士采血，采集EDTA抗凝2管、枸橼酸钠抗凝1管。采血后立即送检。将一管EDTA抗凝血和枸橼酸钠抗凝血室温放置，将另一管EDTA抗凝血放置于37 ℃水浴箱。使用日本光电全自动血细胞分析仪8222-K型及其原厂配套试剂，按不同时间检测，测得血小板结果见表；同时每管取10微升推片、瑞-吉氏染色镜检，观察血小板聚集情况，每张涂片油镜观察20个视野，计数聚集簇数，将2个以上的血小板聚集计为1簇。

2 结 果

由表1可见：EDTA抗凝标本，室温放置20 min时，血小板检测结果开始降低，30 min时明显降低，结果降低近50%，4 h后结果趋于稳定，降低80%多。EDTA抗凝37 ℃水浴放置的标本，30 min时血小板检测结果降低，45 min～4 h降低30%。枸橼酸钠抗凝血，30 min开始降低，4 h将为原来的50%左右；而采血5 min时，3管血均无聚集。采血20 min后，3管血均见不同程度的聚集。30 min时均见明显聚集，EDTA室温放置管聚集簇达到最多101簇。45 min时EDTA37 ℃放置和枸橼酸钠管聚集最多，分别为61簇和47簇。

3 讨 论

该患者因前1 d测定血小板240×109/L，当天结果为94×109/L，所以当临床接到检验结果时，及时将结果波动太大又没有临床症状的情况反馈给检验科。检验科嘱护士重新采血立即送检，复查，血小板227×109/L，将复查的标本又拿到急诊检验科的血细胞分析仪检测，血小板230×109/L。查找原因，当天的仪器运行情况正常、质控在控，基本可以排除仪器因素。1 h后把两管标本都送到形态室，涂片瑞氏-吉姆沙染色后镜检，发现两管标本所做涂片均见血小板大片聚集，无姜毅，刘甲辰等报道的血小板卫星现象[1]。

次日，采取EDTA抗凝2管、枸橼酸钠抗凝1管。采血后立即送检。为了排除冷凝集素的影响，将一管EDTA抗凝血置于37 ℃水浴箱，还有人报道遇到PTCP的患者，可以用枸橼酸钠替代EDTA[2]，所以我们同时做了对照。枸橼酸钠抗凝标本采血后30 min时血小板检测结果也降低与王苏平等人报道的结果不一致[3]。

PTCP患者极为罕见，在临床发生率仅为0.09%～0.21%。可能是因为患者的血浆中存在抗血小板抗体、抗心磷脂抗体、自身抗体等因素，没有病理和生理意义。多发生于肿瘤患者，自身免疫疾病及不明原因疾病[4]。EDTA盐做为抗凝剂时可以介导血液中的冷抗血小板抗体与血小板膜表面某种隐匿性抗原结合，同时激活PLA、PLC、AA、ADP、5-HT等活性物质，这些活性物质又能活化血小板纤维蛋白受体，促使血小板与纤维蛋白原聚集成团，出现血小板聚集现象[5]。

自动化血细胞分析仪对血小板的检测应用电阻抗法：悬浮在电解质溶液中的血细胞在通过检测小孔时内、外电流或电压发生变化，形成脉冲信号，根据信号的多少和大小进行血细胞数量和体积测定，将体积为2～30 fl的细胞计数为血小板[6]。PTCP患者，随着标本放置时间的延长，血小板聚集就越多。仪器误把一簇血小板计数成一个血小板。还有一部分血小板聚集的体积超出血小板检测阈值上限，与白细胞、红细胞体积大小相仿时，就会被仪器误认成白细胞、红细胞，从而使白细胞、红细胞的结果假性升高，使血小板的结果假性降低。

该患临床无明显出血倾向，无皮肤紫癜，无肝、脾、淋巴结肿大，凝血功能、尿常规、肝功能、肾功能、肝炎标志物、艾滋病、抗链-ASO、类风湿因子、C反应蛋白、抗核抗体、甲功七项检查均正常，基本可以排除疾病引起的血小板减少[7]；疗区护士一般早晨6点就统一采血，采血后室温放置，8点送至检验科，一般检验科最快也得8点半才能测定，这期间就有2个半小时左右，远超过30 min，因此该患者血小板减少并不是她自身真的减少，没有病理和生理意义。

此病例警示我们，当遇到PTCP患者时，要与护士沟通好，特殊标本特殊对待，采血后尽量保温，立即送检，嘱检验科立即检测，给患者提供一个真实可靠的检验结果。另外，加强血常规检测的显微镜复检工作势在必行，避免误诊、误治。

[1]姜毅,刘甲辰.DETA-K2抗凝剂导致血小板假性减少[J].当代医学,2010,16(10):113.

[2]董敏,方颖,王永才.纠正EDTA抗凝剂依赖引起的假性血小板减少的方法学探讨[J]中国医疗前沿,2009,20(4):68.

[3]王苏平,周金,吴静,等.EDTA抗凝血检测血小板计数变化一例分析[J].现代检验医学杂志,2008,23(2):39.

[4]秦俊生,史冰洋,王小艳,等.EDTA依赖性假性血小板减少症1例[J].现代检验医学杂志,2006,21(1):63-64.

[5]陈言伟,张一民,董娟.EDTA依赖性假性血小板减少症1例分析[J].中国误诊学杂志,2011,11(4):849.

[6]罗春丽.临床检验基础[M].北京:人民卫生出版社,2010:47-52.

[7]窦心灵,何贵山,朱建敏,等.EDTA-K2抗凝剂导致血小板假性减少1例报道[J].中国实验诊断学,2005,9(1):77.

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1671-8194（2017）04-0190-02