淋巴细胞免疫治疗不明原因复发性流产不同疗程临床效果分析

李冬霞，郭九玲，安新涛，崔章丽，艾冬梅

（河北省衡水市第二人民医院，河北 衡水 053000）

淋巴细胞免疫治疗不明原因复发性流产不同疗程临床效果分析

李冬霞，郭九玲，安新涛，崔章丽，艾冬梅

（河北省衡水市第二人民医院，河北 衡水 053000）

目的探讨本院生殖门诊患者淋巴细胞主动免疫治疗对原因不明性复发性流产不同疗程的疗效。方法选取本院患者200例，治疗组：提取其丈夫淋巴细胞进行主动免疫，孕前及孕后均4次。对照组：同样进行淋巴细胞主动免疫，孕前4次，孕后只注射1～2次。自孕前免疫治疗4次疗程完成时开始，18个月后对其封闭抗体转阳率、妊娠成功率等进行比较。结果2组比较对照组封闭抗体转阳率、妊娠成功率均低于治疗组，差异有统计学意义（P＜0.05）。结论淋巴细胞提取治疗免疫原因引起的复发性流产，微创，操作简单，安全经济，疗效满意，值得临床推广。

淋巴细胞注射； 免疫治疗； 复发性流产； 治疗疗程与疗效

连续发生2次或2次以上的自然流产者称为复发性流产（RSA），其病因及发病机制复杂，迄今仍有半数左右原因不明。复发性流产中免疫性相关因素包括自身免疫型，如系统性红斑狼疮等；同种免疫型功能失调包括母体细胞毒性抗体、母亲缺乏封闭抗体等。同种免疫型流产的诊断是排除性诊断，即排除染色体、内分泌等方面的病因后仍病因不明，也可称为原因不明复发性流产，约占免疫性不孕的2／3。目前普遍认为与母体对父系抗原反应性降低，不能产生足够的保护性抗体即封闭抗体保护胎儿有关，从而使其被母体排斥而发生流产。本试验旨在通过父系免疫细胞刺激母体产生足够的封闭抗体即免疫治疗的方法，分析研究免疫治疗的不同疗程达到的不同临床效果，为临床提供相关的治疗意见。

材料和方法

1 研究对象及临床资料

选取本院生殖门诊2013年 1月至 2015年 1月期间，不明原因复发性流产患者200例，经医院伦理委员会批准，初始选择的患者总数为206例，随机分为治疗组104例，对照组 102例；其中治疗组中3例因各种原因失访，1例妊娠已达16周以上，但因母体患有严重的糖尿病及妊高症人工终止妊娠；对照组失访2例，均不再作为本实验的研究对象，最终确定研究的不明原因复发性流产患者总数为 200例，其中治疗组100例，对照组100例。除外其他非免疫性因素疾病：夫妇双方染色体检测正常；母体生殖道无畸形和结构异常；内分泌项目性激素及甲状腺激素功能正常；TORCH检查阴性（弓形虫等抗体检测阴性）；出凝血功能正常；自身免疫性抗体阴性（抗卵巢抗体、抗子宫内膜抗体，抗心磷脂抗体等，其中封闭抗体阴性）；男方精液常规检查正常，传染病系列检查正常（乙肝五项、丙肝、梅毒、艾滋病抗体阴性，若配偶患有传染性疾病使用其他健康人的血液）；患者均为早期流产（孕周 ＜12周）或 B型超声只见空孕囊，患者年龄22～46岁，平均 28.2岁。流产次数2～6次，流产时孕周为5～11周，平均8周。（注：为保证研究对象处于抗体产生的有效期间，本实验研究选取的入组患者均为孕前经正规免疫治疗4次后，半年内即怀孕者。半年内未怀孕者不列为本研究的实验对象。

2 研究方法

选取本院的生殖门诊 200例不明原因复发性流产患者，按上面所述除外其他因素，孕前半年内均进行过免疫治疗（2周1次，共 4次），怀孕后随机分为治疗组100例，对照组 100例，2组在年龄、流产次数、流产时孕周、体重等指标方面比较无显著性差异。治疗组：提取其丈夫淋巴细胞并注射至患者皮下进行主动免疫：抽取男方全血 10mL（肝素抗凝），运用淋巴细胞分离液（国药集团有限公司，250mL）进行细胞提取，离心机3000r／18min，巴氏吸管提取淋巴细胞层，洗涤2次，配制细胞悬液1mL，使其浓度在3～4×107左右，即时对女方分六点前臂屈侧进行皮下注射（首次注射为皮内），2周1次，共4次；之后指导受孕，孕后治疗的开始时间是一旦确定妊娠立即开始［1］，争取在孕90d左右完成；同样 4次。对照组：同样提取其丈夫淋巴细胞对患者进行主动免疫，孕前 4次，之后指导受孕，孕后治疗的开始时间同样是一旦确定妊娠立即开始，因各种原因只注射1～2次，不足 4次。常见的不良反应有红肿，瘙痒，色素沉着等，红肿瘙痒患者一般可以耐受，过段时间可以消失不需特别处理；关于色素沉着，患者权衡利弊，一般也可接受。

自孕前淋巴细胞免疫治疗4次疗程完成之时开始进行统计，18个月后对 2组患者的封闭抗体转阳率、再次流产率、妊娠成功率进行比较。

3 统计学处理

封闭抗体转阳率 ＝抗体转阳例数／患者总例数，再次流产率 ＝再次流产例数／患者妊娠例数，妊娠成功率 ＝妊娠成功例数（妊娠37～40周足月分娩）／妊娠例数，组间率数据比较采用 χ2检验。所有数据输入统计分析软件SPSS进行统计处理，P＜0.05表示差异有统计学意义。

结 果

治疗组和对照组封闭抗体转阳率分别为87.00%、72.00%，相比有显著性差异（P＜0.05）；再次流产率分别为 10.00%、18.00%，妊娠成功率为90.00%、82.00%，治疗组与对照组相比差异有统计学意义（P＜0.05），具体数据见下表1。

表2 两组患者再次流产率及妊娠成功率的比较（n）

讨 论

习惯性流产指连续自然流产 3次及 3次以上者，给患者身心及其家庭带来巨大的伤害。复发性流产的原因大致可分为内分泌因素，如黄体功能不全、甲状腺功能异常；泌尿生殖系统的结构异常，如子宫发育异常、宫腔粘连等；染色体异常、自身免疫因素等。复发性流产又可分为早期及晚期流产。早期复发性流产系指流产发生在妊娠12周以前，一般多与遗传因素，母内分泌失调及免疫学因素等有关；晚期复发性流产多指流产发生在妊娠12周以后，多与胎盘问题（如胎盘早剥）、子宫问题（如宫颈无力、子宫畸形等）、血型不合及孕妇患有疾病（如糖尿病，弓形体病）等因素有关。自然流产的原因复杂，除以上因素，尚有40%的自然流产原因不明，约50%的复发性流产发病与免疫因素有关，流产是母胎之间免疫状态失衡，发生免疫排斥所致［2］。免疫紊乱是导致自然流产的重要因素，又分为自身免疫型和同种免疫型复发性流产，自身免疫型主要有三方面：①抗磷脂抗体形成，引起胎盘微循环血栓，从而引起流产。②组织非特异性抗体例如抗核抗体、抗 DNA抗体的形成，损害胎儿和胎盘 DNA，引起胎盘炎症；③组织特异性抗体如抗精子抗体等损害胚胎导致流产。自身免疫型治疗以免疫抑制剂和抗凝剂为主，而同种免疫型必须除外其他明确的流产原因，即所谓的不明原因复发性流产，表现为封闭抗体产生不足，可占到免疫型复发流产的 2／3，为其主要的病因类型，采取主动免疫治疗可对异常的细胞免疫功能进行调节，使得再次妊娠成功率提高［3］。

同种免疫型反复自然流产与患者体内的封闭抗体缺乏有关，尤其在原发性反复自然流产患者中更为明显，故而在流产患者中及时进行封闭抗体的检测，对于原因不明自然流产的实验室诊断及免疫治疗非常重要［4］。封闭抗体的存在被认为是妊娠成功的必要因素。现代生殖免疫学上妊娠被认为是半同种移植，母体免疫功能正常时，胚胎刺激母体免疫系统产生封闭抗体，可以中和胚胎抗原，阻断免疫反应，从而使胎儿不受排斥，另外封闭抗体还可以与母体免疫细胞结合，封闭其细胞毒作用，阻止对胎儿的杀伤；它还可直接结合到靶细胞的抗原上，从而降低它们对受体细胞参与的免疫反应的敏感性；一旦缺乏封闭因子，免疫系统容易对胚胎产生免疫攻击，最终导致自然流产。正常妊娠时，胚胎同时携带父系和母系基因，父系的抗原可刺激母体免疫系统产生免疫保护，一旦母体免疫功能低下或紊乱，不能产生足够的封闭抗体，则胚胎被母体免疫系统攻击，造成流产。

淋巴细胞提取治疗不明原因反复自然流产患者，发现其能提高封闭抗体阳性率及再次妊娠成功率，对于临床治疗有很好的指导价值［5］。而本研究通过实验发现，不同注射次数即不同疗程与封闭抗体的产生率和妊娠成功率密切相关。在主动免疫治疗时，淋巴细胞提取的要点为淋巴数量足够多［6］，且为避免其活性丧失，需在2小时内注射，且采取孕前治疗一个疗程，注射4次，孕后加强一个疗程，也注射4次，其效果明显优于孕前4次，孕后1～2次，不足4次的治疗；可能与相应时间内多次的免疫刺激才能产生足够的封闭抗体有关。通过实验可以看出，不同的注射次数与患者的免疫结局存在重要关系，而封闭抗体的产生又与妊娠结局密切相关。本实验通过对患者进行不同次数的免疫刺激后，分析不同疗程后的封闭抗体的产生率和妊娠成功率，发现治疗组比对照组的封闭抗体转阳率和妊娠成功率均有提高，差别具有统计学意义。淋巴细胞免疫治疗习惯性流产疗效确切肯定，但其疗程并未规范统一，如何达到更好的临床效果而又不增加严重的不良反应，是医患双方均重点关注的问题。本实验说明不同注射次数即不同疗程影响妊娠结局，且经过对两组患者出生的172名新生儿随访观察，均未出现畸形儿，证明增加注射次数并未增加严重的不良反应，故临床上宜建议患者切勿半途而废，要按疗程完整治疗，才能产生满意的疗效。

目前，提取淋巴细胞后注射母体的主动免疫治疗方法，越来越受到临床重视，其操作简便，安全、微创，不良反应轻微，经济，疗效满意［7］。本研究旨在通过淋巴细胞主动免疫治疗过程中分析不同疗程对妊娠结局的影响，为临床医生的治疗提供更多参考，从而规范治疗，早日解除患者痛苦，增加社会的和谐因素。

［1］张占华，安新涛.淋巴细胞注射治疗原因不明复发性自然流产60例疗效观察.中国性科学，2013，22（1）：32-33.

［2］仝佳丽，陈子江.复发性自然流产的病因学研究进展.现代妇产科进展，2005，14（2）：152-154.

［3］邱香廷，宋玉翠.主动免疫疗法在原因不明习惯性流产患者中的应用.国际检验医学杂志，2009，30（6）：548-550.

［4］张运丽，郭婧婧，金燕，等.反复自然流产患者封闭抗体检测的临床意义.实用预防医学，2009，16（6）：1917-1918.

［5］范开蓉，吴侃倪，李丽琴，等.反复自然流产患者主动免疫治疗前后封闭抗体变化对再次妊娠的影响研究.中国医药导报，2013，10（9）：56-58.

［6］孙玲.封闭抗体疗法治疗免疫性不孕症与习惯性流产效果.齐鲁医学杂志，2006，21（5）：401-403.

［7］徐艳，翁时秋.封闭抗体不足性习惯性流产的治疗概况.吉林医学，2008，29（21）：1958-1959.

（潘子昂编辑）

Effect of Different Courses of Lymphocyte Active Immunotherapy in the Treatment of Unexplained Recurrent Spontaneous Abortion

LI Dong-xia，GUO Jiu-ling，AN Xin-tao，CUI Zhang-li，AI Dong-mei
（The Second Hospital of Hengshui，Hengshui 053000，China）

ObjectiveTo explore the effect of different courses of lymphocyte active immunotherapy in the treatment of unexplained recurrent spontaneous abortion in our hospital.MethodsA total of 200 cases of patients in our hospital，the treatment group，received the extraction of lymphocyte from partner 4 times prepregnancy and 4 times post-pregnancy..The control group received the same lymphocyte treatment 4 times pre-pregnancy，but only 1 or 2 times post-pregnancy.Starting from the 4thpregnancy immune treatment，the positive rate of blocking antibody and pregnancy rate were compared eighteen month after.ResultsThe positive rate of blocking antibody and pregnancy success rate in control groups were lower than the treatment group，the differences were statistically significant（P＜0.05）.ConclusionLymphocyte extraction in the treatment of recurrent spontaneous abortion induced immunization.It is minimally invasive，simple，safe and economic operation.The curative effect is satisfactory.It is worthy of clinical promotion.

Lymphocyte injection； Immunotherapy； Recurrent spontaneous abortion； Treatment course and curative effect

10.11748／bjmy.issn.1006-1703.2016.12.015

2016-08-03；

2016-10-08

李冬霞（1976—），女，医学学士，主管检验技师，主要从事医学免疫和微生物方面的研究。